Name: Modelo de camundongo com embolia microvascular para microscopia in vivo de dois fótons usando microesferas fluorescentes de poliestireno (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Aprenda a criar um modelo de embolia microvascular em camundongos usando microesferas fluorescentes de poliestireno para microscopia de dois fótons in vivo. Este método permite estudar os efeitos da obstrução capilar no cérebro.

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<table><tbody><tr><td>Agulha calibre 27 (0,1x16 mm)</td><td>Terumo</td><td>-</td><td>Agulha calibre 27 (Passo 2.1.2.)</td></tr><tr><td>Software Articulus</td><td>-</td><td>-</td><td>Software de análise 3D (Passos 4.2.2 & 4.3.3)</td></tr><tr><td>Betadina 30 ml (100 mg/ml)</td><td>Mylan</td><td>8712207037612</td><td>Betadina/iodo (Passo 1.1.8. & 2.2.10.)</td></tr><tr><td>C& Monômero B</td><td>Sun Medical</td><td>7111</td><td>Componente da supercola (Passo 1.3.1.)</td></tr><tr><td>Lâminas cirúrgicas em aço carbono (nº 15)</td><td>Swann-Morton</td><td>205</td><td>Lâmina para arranhar o crânio (Passo 1.2.4.)</td></tr><tr><td>Carprofeno (50 mg/ml)</td><td>Zoetis</td><td>-</td><td>Medicação para alívio da dor (passos 1.1, 1.6, 2.2 & 2.8)</td></tr><tr><td>Catalisador</td><td>Sun Medical</td><td>7110</td><td>Componente da supercola (Passo 1.3.1.)</td></tr><tr><td>Cateter (DI 0,31 OD 0,64 mm)</td><td>Freudenberg</td><td>228-0661</td><td>Cateter transparente (Passo 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Ganchos de papel de seda feitos pela Costom</td><td>-</td><td>-</td><td>Gancho de papel (Passo 2.3.4.)</td></tr><tr><td>Pontas de algodão</td><td>-</td><td>-</td><td>Ponta de algodão (Passo 1.1.8, 1.2.4 & 1.5.1.)</td></tr><tr><td>Vidro de cobertura</td><td>Instrumentos Warner</td><td>64-0724</td><td>Vidro da tampa craniana da janela (Passo 1.4.2.)</td></tr><tr><td>Barra de cabeça de mouse feita sob medida</td><td>-</td><td>-</td><td>Barra de cabeça para suporte de imagem (Passo 1.3.2.)&nbsp;</td></tr><tr><td>Suporte de imagem de mouse personalizado &nbsp;</td><td>-</td><td>-</td><td>Suporte de mouse de imagem (Passo 1.4.1. & 3.1.1.)</td></tr><tr><td>Quadro estereotáxico personalizado</td><td>-</td><td>-</td><td>Quadro estereotáxico (Passo 1.1.7.)</td></tr><tr><td>Fluido para cementação dentária</td><td>Kulzer</td><td>64707937</td><td>Componente do cimento dentário (Passo 1.3.3.)</td></tr><tr><td>Pó de cemento dental</td><td>Kulzer</td><td>64707945</td><td>Componente do cimento dentário (Passo 1.3.3.)</td></tr><tr><td>Broca dentária & nbsp;</td><td>Saeshin</td><td>&nbsp; L-206</td><td>Exercício (Passo 1.4.3.)</td></tr><tr><td>Dexametasona (4 mg/ml)</td><td>Centrafarm</td><td>-</td><td>Medicação pré-operatória (Passo 1.1.4.)</td></tr><tr><td>Pinça dissecadora</td><td>Braun-Esculap</td><td>BD023R</td><td>Pinças (Passo 1.2.2. & 2.3.2.)</td></tr><tr><td>broca de rebarba PK/100,5 (0,5mm)</td><td>Belas Ciências</td><td>19007-05</td><td>Broca (Passo 1.4.3.)</td></tr><tr><td>Duratears (3,5 g)</td><td>Alcon</td><td>-</td><td>Pomada ocular (Passo 1.1.8. & 2.2.7.)</td></tr><tr><td>Cola epóxi (1g)</td><td>Pattex</td><td>9H PSMG3X</td><td>Cola epóxi (Passo 1.5.2. & 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Pinças micro finas retas</td><td>Ferramentas científicas finas</td><td>Dumont #5</td><td>Pinça micro fina (Passo 2.6.6.)</td></tr><tr><td>FITC-Dextrano (70 KDa)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FD70S</td><td>Solução FITC-Dextran (Passo 2.5.2.)</td></tr><tr><td>Isoflurano (1000 mg/g)</td><td>Laboratórios Karizoo S.A.</td><td>118938</td><td>Anestesia (Passo 1.1.6. & 2.2.5.)</td></tr><tr><td>grande criomrotômetro de imagem fluorescente 3D &nbsp;</td><td>Feito sob medida</td><td>-</td><td>FICS grandes-3D (Passo 4.3.3)</td></tr><tr><td>Lidocaína (100 mg/ml)</td><td>Aspen</td><td>-</td><td>Anestésico local (Passo 1.2.3. & 2.2.10)</td></tr><tr><td>Micro tesouras Vannas 3-3/8 polegada</td><td>Braun-Esculap</td><td>OC498R</td><td>Micro tesoura (Passo 2.6.2)</td></tr><tr><td>Pinças de Atar Micro Sutura com Cabo Redondo</td><td>Braun-Esculap</td><td>FD280R</td><td>Microforeceptores (Passo 2.3.3.)</td></tr><tr><td>Pinças de Atar Micro Sutura com Alça Redonda Curvada</td><td>Braun-Esculap</td><td>FD281R</td><td>Microforeceptores dobrados (Passo 1.5.1. & 2.3.3.)</td></tr><tr><td>Micro clipe vascular</td><td>Braun-Esculap</td><td>FD562R</td><td>Clipe de recipiente (Passo 2.6.1.)</td></tr><tr><td>Microcateter (DI 0,23114 mm OD 0,27432 mm)</td><td>Microlúmen</td><td></td><td>Microcateter (Passo 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Tapete Térmico do Mouse, Sonda Retal</td><td>Stoelting</td><td>53800R</td><td>Bolsa térmica (Passo 1.1.2. & 2.2.2.)</td></tr><tr><td>Camundongos NG2-DsRed</td><td>Jackson Laboratory, Bar Harbor, EUA, Stock No. 008241</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Monolurato de sorbitano de polietilenoglicol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9005-64-5</td><td>Tween20 (Passo 2.5.2.)</td></tr><tr><td>FluorEsferas de Poliestireno Azul (365/415)</td><td>Invitrogen</td><td>F8829</td><td>Microsferas azuis (Passo 2.5.1.)</td></tr><tr><td>FluorEsferas de poliestireno vermelho (580/605)</td><td>Invitrogen</td><td>F8834</td><td>Microsfera vermelha (Passo 2.5.1.)</td></tr><tr><td>Gaiola de recuperação</td><td>-</td><td>-</td><td>Gaiola de recuperação (Passos 1.6.2. & 2.8.2.)</td></tr><tr><td>Corte reverso com agulha curva 3/8 (12mm) com ponto</td><td>Bbraun</td><td>0762067</td><td>Sutura (Passo 2.7.5)</td></tr><tr><td>Ropivaca&iuml; Ne (2 mg/ml)</td><td>-</td><td>-</td><td>Medicação &nbsp; (Passo 1.1.5.)</td></tr><tr><td>pequeno criomicrotomo de imagem fluorescente 3D &nbsp; &nbsp;</td><td>Feito sob medida</td><td></td><td>Pequenos-3D-FICS (Passo 4.2.2)</td></tr><tr><td>Spongostan</td><td>Ethicon</td><td>MS0005</td><td>Spongostan (Passo 1.4.6.)</td></tr><tr><td>Microscópio cirúrgico</td><td>Euromex Microscopen B.V.</td><td>NZ.1903-B</td><td>Microscópio para cirurgia (Passo 1.2. 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Tesoura cirúrgica</td><td>Braun-Esculap</td><td>BC303R</td><td>Tesoura cirúrgica (Passo 1.2.2. & 2.3.2.)</td></tr><tr><td>Bomba de seringa (para seringas de 1 ml)</td><td>Aparelho Havard</td><td>70-2208</td><td>Bomba de seringa de 1 ml (Passo 2.5.6.)</td></tr><tr><td>Thread, 100m, &nbsp; 4/0 1,5&nbsp; &nbsp;</td><td>Bbraun</td><td>F1134035</td><td>4/0.15 threads (Passo 2.4.3.)</td></tr><tr><td>Mouses TIE2-GFP</td><td>Jackson Laboratory, Bar Harbor, EUA, Stock No. 003658</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pulverizador ultra puro</td><td>Thorlabs</td><td>CA6-EU</td><td>Ar comprimido (Passo 1.2.5.)</td></tr><tr><td>Transparente Universal de Polímero</td><td>Sun Medical</td><td>T058E</td><td>Componente da supercola (Passo 1.3.1.)</td></tr></tbody></table>

modelo de camundongo com embolia microvascular para microscopia in vivo de dois fótons usando microesferas fluorescentes de poliestireno

Microvascular Embolism Mouse Model for In Vivo Two-photon Microscopy Using Fluorescent Polystyrene Microspheres

Modelo de camundongo com embolia microvascular para microscopia in vivo de dois fótons usando microesferas fluorescentes de poliestireno

Microvascular occlusions in the brain are relatively common but remain largely understudied. The event rate, long-term consequences, and potential ...

microvascular-embolism-mouse-model-for-vivo-two-photon-microscopy

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Este artigo descreve uma sequência otimizada de eventos para imagiologia multimodal de enxertos celulares no cérebro de roedores por meio de: (i) na bioluminescência vivo e ressonância magnética, e (ii) a análise post mortem histológica. A combinação destas modalidades de imagem em um único animal permite uma avaliação do enxerto celular com alta resolução, sensibilidade e especificidade.

Imagem Multimodal de implante de células-tronco no sistema nervoso central de camundongos

Este vídeo demonstra o procedimento para gerar AVC fototrombótico em um modelo de camundongo por iluminação a laser de um crânio intacto após a administração de corante fotossensível.

Modelagem de AVC Fototrombótico em Modelo de Camundongo: Uma Técnica de Iluminação a Laser Através do Crânio de Camundongo Após Administração de Corante Fotossensível para Induzir Fototrombose

Este vídeo demonstra a técnica de microscopia de fluorescência intravital para estudar a formação de trombos em um modelo de camundongo. O camundongo é injetado com um polissacarídeo marcado com fluoróforo para monitorar a circulação sanguínea. Após a iluminação com uma luz de alta intensidade, a indução fototóxica de uma lesão na microvasculatura da orelha leva à formação de um trombo, que é confirmado pela visualização da obstrução no fluxo sanguíneo.

Microscopia de fluorescência intravital para estudar a formação de trombos microvasculares

Fonte: Jongbloets, B. C., et al. Visualizando a atividade da proteína quinase A em camundongos com comportamento fixo na cabeça usando microscopia de imagem de fluorescência de dois fótons in vivo. J. Vis. Exp. (2019) Este vídeo demonstra um procedimento de microscopia de imagem de fluorescência de dois fótons para visualizar a atividade da proteína quinase A em camundongos com comportamento fixo na cabeça durante a locomoção forçada.

Visualizando a atividade da proteína quinase A em um camundongo usando microscopia de imagem de fluorescência de dois fótons 

Source:&lt;a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove. com/v/53582/quantificação-da-arquitetura-vascular-cerebral-usando-microscopia-de-dois-fótons-em-um-modelo-de-camundongo-de-neuroinflamação-induzida-por-HIV'&gt; Nishimura, C. et al. Quantificação da Arquitetura Vascular Cerebral usando Microscopia de Dois Fótons em um Modelo de Camundongo de Neuroinflamação Induzida pelo HIV. J. Vis. Exp. (2016). Este vídeo demonstra a visualização in vivo de capilares corticais no cérebro de...

 Microscopia de dois fótons para imagens in vivo de microvasculatura cerebral de camundongos 

Fonte: Kim, D., et. al. Imagem fluorescente combinada de infravermelho próximo e microtomografia computadorizada para visualização direta de tromboêmbolos cerebrais. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a visualização de trombos cerebrais em camundongos usando imagens de microtomografia computadorizada (micro-CT). Um modelo de camundongo tromboso cerebral é injetado com nanopartículas de ouro direcionadas à fibrina que atuam como um agente contrastante. O mouse é colocado na cama de uma...

Visualização de um trombo cerebral em um camundongo usando imagens de microtomografia computadorizada

A camada de superfície endotelial glicocálice / endotelial está idealmente estudada por microscopia intravital. Microscopia intravital é tecnicamente desafiante em um órgão em movimento, tais como o pulmão. Demonstramos como brightfield simultânea e microscopia de fluorescência pode ser utilizado para estimar a espessura da camada endotelial da superfície em um movimento...

Na medição in vivo da camada superficial do rato pulmonar endotelial

Este protocolo descreve a aplicação de tomografia combinada fluorescente no infravermelho próximo (NIRF) e imagiologia de micro-computadorizada (microCT) para visualizar tromboêmbolos cerebral. Esta técnica permite a quantificação da carga de trombo e evolução. A técnica de imagem NIRF visualiza fluorescente etiquetado trombo no cérebro extirpado, enquanto que a técnica microCT visualiza trombo no interior de animais vivos usando ouro-nanopartículas.

Combinada Near-infrared imagens fluorescentes e tomografia Micro-computado para Diretamente Visualizando Cerebral tromboêmbolos

A imagem in vivo é uma ferramenta poderosa para o estudo da biologia na saúde e na doença. Este protocolo descreve imagens transpupilares da retina de camundongos com um microscópio padrão de dois fótons. Também demonstra diferentes métodos de imagem in vivo para marcar fluorescentemente múltiplas coortes celulares da retina.

Imagem transpupilar de dois fótons in vivo da retina do rato

Apresentamos um protocolo detalhado para microscopia eletrônica e de luz correlativa pós-incorporação de Epon usando uma proteína fluorescente chamada mScarlet. Este método pode manter a fluorescência e a ultraestrutura simultaneamente. Esta técnica é passível de uma ampla variedade de aplicações biológicas.

Epon Post Embedding Correlative Light e Microscopia Eletrônica

O protocolo descreve um método para injetar células tumorais através da via de punção percutânea na cisterna magna que induz metástase leptomeníngea em camundongos, reduzindo o trauma e a carga tumoral extracraniana.

Modelo de injeção minimamente invasiva de cisterna magna para estudos de metástase leptomeníngea em camundongos

Aprenda a criar um modelo de embolia microvascular em camundongos usando microesferas fluorescentes de poliestireno para microscopia de dois fótons in vivo. Este método permite estudar os efeitos da obstrução capilar no cérebro.

Modelo de camundongo com embolia microvascular para microscopia in vivo de dois fótons usando microesferas fluorescentes de poliestireno (Vídeo) | JoVE Journal

Modelo de camundongo com embolia microvascular para microscopia in vivo de dois fótons usando microesferas fluorescentes de poliestireno

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