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<ol><li>Knudsen, L., Ochs, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+micromechanics+of+lung+alveoli%3A+structure+and+function+of+surfactant+and+tissue+components%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The micromechanics of lung alveoli: structure and function of surfactant and tissue components.</a> Histochem Cell Biol. 150 (6), 661-676 (2018).</li>
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<li>Shiraishi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysical+forces+mediated+by+respiration+maintain+lung+alveolar+epithelial+cell+fate%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Biophysical forces mediated by respiration maintain lung alveolar epithelial cell fate.</a> Cell. 186 (7), 1478-1492.e15 (2023).</li>
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<li>Harris, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vitro+investigation+of+the+inflammatory+response+to+the+strain+amplitudes+which+occur+during+high+frequency+oscillation+ventilation+and+conventional+mechanical+ventilation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">An in vitro investigation of the inflammatory response to the strain amplitudes which occur during high frequency oscillation ventilation and conventional mechanical ventilation.</a> J Biomech. 88, 186-189 (2019).</li>
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<li>Huh, D., Hamilton, G. A., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+3D+cell+culture+to+organs-on-chips%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">From 3D cell culture to organs-on-chips.</a> Trends Cell Biol. 21 (12), 745-754 (2011).</li>
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<li>Lim, M. J., Kim, S. J., Jo, A., Kim, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+application+potential+of+alveolar+organoids+through+epithelial+and+niche+cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Enhanced application potential of alveolar organoids through epithelial and niche cell interactions.</a> Sci Rep. 15 (1), 17538(2025).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
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<li>Manuyakorn, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+strain+causes+adaptive+change+in+bronchial+fibroblasts+enhancing+profibrotic+and+inflammatory+responses%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mechanical strain causes adaptive change in bronchial fibroblasts enhancing profibrotic and inflammatory responses.</a> PLoS One. 11 (4), e0153926(2016).</li>
<li>Kılıç, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+forces+induce+an+asthma+gene+signature+in+healthy+airway+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanical forces induce an asthma gene signature in healthy airway epithelial cells.</a> Sci Rep. 10 (1), 966(2020).</li>
<li>Tam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hedgehog+signaling+as+a+therapeutic+target+for+airway+remodeling+and+inflammation+in+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Hedgehog signaling as a therapeutic target for airway remodeling and inflammation in allergic asthma.</a> Cells. 11 (19), 3016(2022).</li>
<li>Georas, S. N., Rezaee, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+barrier+function%3A+at+the+front+line+of+asthma+immunology+and+allergic+airway+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Epithelial barrier function: at the front line of asthma immunology and allergic airway inflammation.</a> J Allergy Clin Immunol. 134 (3), 509-520 (2014).</li>
<li>Ivanov, A. I., Parkos, C. A., Nusrat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+regulation+of+epithelial+barrier+function+during+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal regulation of epithelial barrier function during inflammation.</a> Am J Pathol. 177 (2), 512-524 (2010).</li>
<li>Barnett, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+epithelial-immune+circuit+amplifies+inflammasome+and+IL-6+responses+to+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+Microbe%22%5BJournal%5D)">An epithelial-immune circuit amplifies inflammasome and IL-6 responses to SARS-CoV-2.</a> Cell Host Microbe. 31 (2), 243-259.e6 (2023).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HB-EGF-induced+IL-8+secretion+from+airway+epithelium+leads+to+lung+fibroblast+proliferation+and+migration%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">HB-EGF-induced IL-8 secretion from airway epithelium leads to lung fibroblast proliferation and migration.</a> BMC Pulm Med. 21 (1), 347(2021).</li>
<li>Guo, T. J. F., Singhera, G. K., Leung, J. M., Dorscheid, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airway+epithelial-derived+immune+mediators+in+COVID-19%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Airway epithelial-derived immune mediators in COVID-19.</a> Viruses. 15 (8), 1655(2023).</li>
<li>Thomas, D., Choi, S., Alamana, C., Parker, K. K., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+engineered+organoids+for+cardiovascular+models%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular and engineered organoids for cardiovascular models.</a> Circ Res. 130 (12), 1780-1802 (2022).</li>
<li>Li, K., He, Y., Jin, X., Jin, K., Qian, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+extracellular+matrices+for+tumor+organoid+culture%3A+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Reproducible extracellular matrices for tumor organoid culture: challenges and opportunities.</a> J Transl Med. 23 (1), 497(2025).</li>
<li>Vande Geest, J. P., Di Martino, E. S., Vorp, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+the+complete+strain+field+within+Flexercell+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">An analysis of the complete strain field within Flexercell membranes.</a> J Biomech. 37 (12), 1923-1928 (2004).</li>
<li>Mondoñedo, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+system+for+cyclic+stretching+of+precision-cut+lung+slices+during+acute+cigarette+smoke+extract+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">A high-throughput system for cyclic stretching of precision-cut lung slices during acute cigarette smoke extract exposure.</a> Front Physiol. 11, 566(2020).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6700">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/69447">10.3791/69447</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/69447">Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor</a>.&#160;

Erratum: Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor

<table><tbody><tr><td>Tubo microcentrífuga de 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>0030 125.215</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cônico de 15 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>16% paraformaldeído</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>2-mercaptoetanol</td><td>Millipore Sigma</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cônico de 50 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>Placa circular de espuma Tissue Train de 6 poços (membrana flexível)</td><td>Flexcell International</td><td>TTCF-5001</td><td></td></tr><tr><td>Células A549</td><td>Coleção de Cultura do Tipo Americano (ATCC)</td><td>CCL-171</td><td></td></tr><tr><td>Compressor de ar</td><td>Ferramentas Pneumáticas da Califórnia</td><td>10020DSPCAD</td><td></td></tr><tr><td>Albumina sérica bovina</td><td>Millipore Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Buffer RLT</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora CO2</td><td>PHCBI</td><td>MCO-170AICUVL-PA</td><td></td></tr><tr><td>Solução de colheita de organoides Cultrex</td><td>Bio-Techne</td><td>3700-100-01</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ensaio de citotoxicidade CyQUANT LDH</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>C20300</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4&prime;,6-diamidino-2-fenilindol)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sulfóxido</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D2650-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s modificado Eagle' s medium (DMEM)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio EVOS XL Core</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AMEX1200</td><td></td></tr><tr><td>Soro fetal bovino (FBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A5209501</td><td></td></tr><tr><td>Software de análise de imagens em Fiji</td><td>Institutos Nacionais de Saúde</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Tensão e Tecido Flexcell FX-6000 (inclui controlador de tensão Flexlink FX-6000, reservatório de pressão, base, janela de acrílico, estações cilíndricas de carga de 25 mm de diâmetro, sifão de água, software FlexSoft FX-6000 V1.0 e vários tubos)</td><td>Flexcell International</td><td>FX6000T</td><td></td></tr><tr><td>Interleucina-6 Duoset Humano ELISA</td><td>Bio-Techne</td><td>DY206</td><td></td></tr><tr><td>Interleucina-8 Duoset Humano ELISA</td><td>Bio-Techne</td><td>DY208</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio confocal Leica DMi8</td><td>Leica Microsystems</td><td>11889122</td><td></td></tr><tr><td>Matriz de Membrana Baseal Matrigel</td><td>Corning</td><td>356237</td><td></td></tr><tr><td>Células MRC-5</td><td>ATCC</td><td>CCL-185</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Millipore Sigma</td><td>P7793</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina/estreptomicina (Pen/Streptocócico)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Sondas de marcação de faloida, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A12379</td><td></td></tr><tr><td>Soro salino tamponado com fosfato (PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>Colágeno rato I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3867</td><td></td></tr><tr><td>Proteína desidrogenase de lactato humano recombinante (ativa)</td><td>Abcam</td><td>Ab93699</td><td></td></tr><tr><td>Buffer de lise RIPA</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>89901</td><td></td></tr><tr><td>Tubos microfuge sem RNase</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM12400</td><td></td></tr><tr><td>Frasco de cultura T75 cm2</td><td>Greiner</td><td>658175</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-5ML</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo monoclonal ZO-1 (ZO1-1A12), Alexa Fluor 594</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339194</td><td></td></tr></tbody></table>

geração de organoides alveolares 3d embutidos em colágeno a549/mrc-5 usando um biorreator mecânico de estiramento celular

Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor

Geração de organoides alveolares 3D embutidos em colágeno A549/MRC-5 usando um Biorreator Mecânico de Estiramento Celular

Although breathing dynamics and mechanical strain play critical roles in alveolar biology, their contributions to the pathogenesis of respiratory diseases ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

É descrito um método para a preparação de uma matriz de 3-dimensional constituído por colagénio do tipo I e fibroblastos humanos primários. Este gel organotípica serve como um substrato útil para avaliar a migração celular invasiva porque imita características básicas de estroma de tecido e é susceptível de muitas formas de microscopia.

Organotípica Colágeno Ensaio I: Uma Plataforma maleável para Avaliar Comportamento celular em um contexto de 3-Dimensional

Um novo protocolo de imagem foi desenvolvido usando um atuador mecânico acionado por motor personalizado para permitir a medição de respostas em tempo real à tensão mecânica em células vivas. Relevante para a mecanobiologia, o sistema pode aplicar deformações de até 20%, permitindo imagens quase em tempo real com microscopia de força confocal ou atômica.

Imagens de células vivas durante Mecânica estiramento

Neste trabalho, apresentamos uma técnica para a fabricação rápida de tecidos vasculares vivos por cultura direta de colágeno, células musculares lisas e células endoteliais. Além disso, um novo protocolo para a caracterização mecânica de tecidos vasculares projetados é descrito.

Engenharia 3D celularizados Colágeno Gel para Vascular Regeneração Tecidual

O artigo descreve a diferenciação direcionada de células-tronco pluripotentes induzidas a organoides pulmonares inteiros tridimensionais contendo células pulmonares epiteliais proximais e disais, juntamente com mesenchyme.

Geração de organoides pulmonares 3D inteiros de células-tronco pluripotentes induzidas para modelagem da biologia e doença do desenvolvimento pulmonar

Este protocolo apresenta um método para a cultura e crescimento 3D de células semelhantes a ameloblastos em microgravidade para manter sua forma alongada e polarizada, bem como a expressão de proteínas específicas do esmalte. Condições de cultura para a cultura de construções de engenharia periodontal e órgãos pulmonares em microgravidade também são descritas.

Propagação de Células e Órgãos Dentários e Respiratórios em Microgravidade

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Estabelecendo organoides pulmonares humanos e diferenciação proximal para gerar organoides maduros das vias aéreas

O presente protocolo descreve as capacidades e as modalidades de cultura essenciais do Open-Top Organ-Chip para o estabelecimento e maturação bem-sucedidos de culturas organ-on-chip de espessura total de tecidos primários (pele, alvéolo, vias aéreas e intestino), proporcionando a oportunidade de investigar diferentes aspectos funcionais da interface epitelial/mesenquimal e vascular humana in vitro.

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Aqui, demonstramos um modelo organoide de três etapas (expansão bidimensional [2D], estimulação 2D, maturação tridimensional [3D]) oferecendo uma ferramenta promissora para pesquisa fundamental de tendões e um potencial método livre de andaimes para engenharia de tecidos tendinosos.

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Este estudo apresenta uma metodologia econômica e eficiente para gerar estruturas celulares 3D usando um sistema baseado em carimbos para criar micropoços em moldes de agarose. O sistema promove a formação de esferóides/organoides uniformes, melhorando assim as interações celulares. Essa abordagem reduz a variabilidade experimental e oferece suporte a aplicações em testes de medicamentos e engenharia de tecidos.

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University of British Columbia - Okanagan.  Este protocolo descreve a geração de organoides a partir de células epiteliais alveolares A549 e fibroblastos pulmonares MRC-5 em um andaime de hidrogel de matriz extracelular, seguida pela incorporação em géis de colágeno 3D e exposição a tensão mecânica usando um biorreator de estiramento celular para investigar a mecanobiologia alveolar.

Geração de organoides alveolares 3D embutidos em colágeno A549/MRC-5 usando um Biorreator Mecânico de Estiramento Celular

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