Name: O ensaio de hemostase de Nijmegen: Medição Simultânea de Geração de Trombina e Plasmina em um Único Poço (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T13:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 1 s
Description: Aprenda a medir simultaneamente a geração de trombina e plasmina em plasma usando o ensaio de hemostase de Nijmegen. Este método integra coagulação e fibrinólise para avaliar o equilíbrio hemostático em amostras clínicas.

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<ol><li>Chapin, J. C., Hajjar, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolysis+and+the+control+of+blood+coagulation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Rev%22%5BJournal%5D)">Fibrinolysis and the control of blood coagulation.</a> Blood Rev. 29 (1), 17-24 (2015).</li>
<li>Furie, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hematology%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of thrombosis.</a> Hematology. 2009 (1), 255-258 (2009).</li>
<li>Teruya, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+normal+aPTT+does+not+guarantee+adequate+coagulation+factor+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">A normal aPTT does not guarantee adequate coagulation factor levels.</a> Anesthesiology. 94 (3), 542(2001).</li>
<li>Puetz, J., Hugge, C., Moser, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normal+aPTT+in+children+with+mild+factor+XI+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Blood+Cancer%22%5BJournal%5D)">Normal aPTT in children with mild factor XI deficiency.</a> Pediatr Blood Cancer. 65 (4), pbc.26910(2018).</li>
<li>Toulon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+sensitivity+of+different+activated+partial+thromboplastin+time+reagents+to+mild+clotting+factor+deficiencies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Lab+Hematol%22%5BJournal%5D)">In vitro sensitivity of different activated partial thromboplastin time reagents to mild clotting factor deficiencies.</a> Int J Lab Hematol. 38 (4), 389-396 (2016).</li>
<li>Massignon, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prothrombin+time+sensitivity+and+specificity+to+mild+clotting+factor+deficiencies+of+the+extrinsic+pathway%3Aevaluation+of+eight+commercial+thromboplastins%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Prothrombin time sensitivity and specificity to mild clotting factor deficiencies of the extrinsic pathway:evaluation of eight commercial thromboplastins.</a> Thromb Haemost. 75 (4), 590-594 (1996).</li>
<li>Burns, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradoxic+effect+of+multiple+mild+coagulation+factor+deficiencies+on+the+prothrombin+time+and+activated+partial+thromboplastin+time%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Paradoxic effect of multiple mild coagulation factor deficiencies on the prothrombin time and activated partial thromboplastin time.</a> Am J Clin Pathol. 100 (2), 94-98 (1993).</li>
<li>van Geffen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+hemostasis+assay+for+the+simultaneous+measurement+of+coagulation+and+fibrinolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Hematology%22%5BJournal%5D)">A novel hemostasis assay for the simultaneous measurement of coagulation and fibrinolysis.</a> Hematology. 16 (6), 327-336 (2011).</li>
<li>van Geffen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacodynamics+of+recombinant+activated+factor+VII+and+plasma-derived+factor+VII+in+a+cohort+of+severe+FVII+deficient+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Pharmacodynamics of recombinant activated factor VII and plasma-derived factor VII in a cohort of severe FVII deficient patients.</a> Thromb Res. 132 (1), 116-122 (2013).</li>
<li>Hemker, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+calibrated+automated+thrombogram+%28CAT%29%3Aa+universal+routine+test+for+hyper-+and+hypocoagulability%5BTitle%5D)+AND+%22Pathophysiol+Haemost+Thromb%22%5BJournal%5D)">The calibrated automated thrombogram (CAT):a universal routine test for hyper- and hypocoagulability.</a> Pathophysiol Haemost Thromb. 32 (5-6), 249-253 (2002).</li>
<li>Kristensen, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+generation+measured+on+ST+Genesia%2C+a+new+platform+in+the+coagulation+routine+lab%3Aassessment+of+analytical+and+between-subject+variation%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Pract+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombin generation measured on ST Genesia, a new platform in the coagulation routine lab:assessment of analytical and between-subject variation.</a> Res Pract Thromb Haemost. 6 (1), e12654(2022).</li>
<li>Hemker, H. C., Béguin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotyping+the+clotting+system%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Phenotyping the clotting system.</a> Thromb Haemost. 84 (5), 747-751 (2000).</li>
<li>Tripodi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+generation+assay+and+its+application+in+the+clinical+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chem%22%5BJournal%5D)">Thrombin generation assay and its application in the clinical laboratory.</a> Clin Chem. 62 (5), 699-707 (2016).</li>
<li>Valke, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolytic+assays+in+bleeding+of+unknown+cause%3Aimprovement+in+diagnostic+yield%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Pract+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Fibrinolytic assays in bleeding of unknown cause:improvement in diagnostic yield.</a> Res Pract Thromb Haemost. 6 (2), e12681(2022).</li>
<li>van Geffen, M., van Heerde, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+haemostasis+assays%2C+from+bench+to+bedside%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Global haemostasis assays, from bench to bedside.</a> Thromb Res. 129 (6), 681-687 (2012).</li>
<li>Luddington, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombelastography%2Fthromboelastometry%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Lab+Haematol%22%5BJournal%5D)">Thrombelastography/thromboelastometry.</a> Clin Lab Haematol. 27 (2), 81-90 (2005).</li>
<li>Hartmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+testing%3Aan+illustrated+review+of+technology+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Pract+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic testing:an illustrated review of technology and clinical applications.</a> Res Pract Thromb Haemost. 7 (1), 100031(2023).</li>
<li>Schoeman, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+chamber+and+microfluidic+approaches+for+measuring+thrombus+formation+in+genetic+bleeding+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Platelets%22%5BJournal%5D)">Flow chamber and microfluidic approaches for measuring thrombus formation in genetic bleeding disorders.</a> Platelets. 28 (5), 463-471 (2017).</li>
<li>Bavinck, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+testing+in+patients+with+very+rare+bleeding+disorders+of+secondary+hemostasis%3Aa+scoping+review%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic testing in patients with very rare bleeding disorders of secondary hemostasis:a scoping review.</a> Thromb Res. 2025, 109449(2025).</li>
<li>Mansouritorghabeh, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+total+thrombus-formation+analysis+system+%28T-TAS%29+in+the+thrombosis+and+hemostasis+field%3Aa+scoping+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Lab+Hematol%22%5BJournal%5D)">The utility of total thrombus-formation analysis system (T-TAS) in the thrombosis and hemostasis field:a scoping review.</a> Int J Lab Hematol. 47 (2), 201-211 (2025).</li>
<li>Lecchi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-chamber+device+%28T-TAS%29+to+diagnose+patients+suspected+of+platelet+function+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Transfus%22%5BJournal%5D)">Flow-chamber device (T-TAS) to diagnose patients suspected of platelet function defects.</a> Blood Transfus. 22 (1), 55-64 (2024).</li>
<li>Zekavat, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+thrombin+generation+assay+with+conventional+coagulation+tests+in+evaluation+of+bleeding+risk+in+patients+with+rare+bleeding+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Appl+Thromb+Hemost%22%5BJournal%5D)">Comparison of thrombin generation assay with conventional coagulation tests in evaluation of bleeding risk in patients with rare bleeding disorders.</a> Clin Appl Thromb Hemost. 20 (6), 637-644 (2014).</li>
<li>Brummel-Ziedins, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+generation+and+bleeding+in+haemophilia+A%5BTitle%5D)+AND+%22Haemophilia%22%5BJournal%5D)">Thrombin generation and bleeding in haemophilia A.</a> Haemophilia. 15 (5), 1118-1125 (2009).</li>
<li>Al Dieri, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+generation%3Awhat+have+we+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Rev%22%5BJournal%5D)">Thrombin generation:what have we learned.</a> Blood Rev. 26 (5), 197-203 (2012).</li>
<li>Binder, N. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+use+of+thrombin+generation+assays%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Clinical use of thrombin generation assays.</a> J Thromb Haemost. 19 (12), 2918-2929 (2021).</li>
<li>Verhagen, M. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+patients+with+hemophilia%2C+a+decreased+thrombin+generation+profile+is+associated+with+a+severe+bleeding+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Pract+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">In patients with hemophilia, a decreased thrombin generation profile is associated with a severe bleeding phenotype.</a> Res Pract Thromb Haemost. 7 (2), 100062(2023).</li>
<li>Haisma, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+thrombin+and+plasmin+generation+profiles+in+alpha-2-antiplasmin-deficient+patients%3Adata+from+the+Rare+Bleeding+Disorders+in+the+Netherlands+study%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Pract+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Enhanced thrombin and plasmin generation profiles in alpha-2-antiplasmin-deficient patients:data from the Rare Bleeding Disorders in the Netherlands study.</a> Res Pract Thromb Haemost. 8 (7), 102604(2024).</li>
<li>Haisma, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+thrombin+generation+platforms+for+patients+with+coagulation+factor+deficiencies%3Aa+comprehensive+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of thrombin generation platforms for patients with coagulation factor deficiencies:a comprehensive assessment.</a> Thromb Res. 240, 109045(2024).</li>
<li>van Geffen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrospective+evaluation+of+bleeding+tendency+and+simultaneous+thrombin+and+plasmin+generation+in+patients+with+rare+bleeding+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Haemophilia%22%5BJournal%5D)">Retrospective evaluation of bleeding tendency and simultaneous thrombin and plasmin generation in patients with rare bleeding disorders.</a> Haemophilia. 18 (4), 630-638 (2012).</li>
<li>Haisma, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((genotype%2C+and+laboratory+assessment+of+congenital+fibrinogen+disorders%3Adata+from+the+Rare+Bleeding+Disorders+in+the+Netherlands+study%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">genotype, and laboratory assessment of congenital fibrinogen disorders:data from the Rare Bleeding Disorders in the Netherlands study.</a> Thromb Res. 249, 109317(2025).</li>
<li>Bouma, B. N., Meijers, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin-activatable+fibrinolysis+inhibitor+%28TAFI%2C+plasma+procarboxypeptidase+B%2C+procarboxypeptidase+R%2C+procarboxypeptidase+U%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI, plasma procarboxypeptidase B, procarboxypeptidase R, procarboxypeptidase U).</a> J Thromb Haemost. 1 (7), 1566-1574 (2003).</li>
<li>Marx, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin-activatable+fibrinolysis+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor.</a> Curr Med Chem. 11 (17), 2335-2348 (2004).</li>
<li>Rijken, D. C., Lijnen, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+insights+into+the+molecular+mechanisms+of+the+fibrinolytic+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">New insights into the molecular mechanisms of the fibrinolytic system.</a> J Thromb Haemost. 7 (1), 4-13 (2009).</li>
<li>Depasse, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombin+generation+assays+are+versatile+tools+in+blood+coagulation+analysis%3Aa+review+of+technical+features%2C+and+applications+from+research+to+laboratory+routine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombin generation assays are versatile tools in blood coagulation analysis:a review of technical features, and applications from research to laboratory routine.</a> J Thromb Haemost. 19 (12), 2907-2916 (2021).</li>
<li>Subcommittee on Control of Anticoagulation of the SSC of the ISTH. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+recommendation+for+the+standardization+of+the+measurement+of+platelet-dependent+thrombin+generation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Towards a recommendation for the standardization of the measurement of platelet-dependent thrombin generation.</a> J Thromb Haemost. 9 (9), 1859-1861 (2011).</li>
<li>Duarte, R. C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+and+evaluation+of+the+performance+of+the+thrombin+generation+test+under+hypo-+and+hypercoagulability+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Hematol+Transfus+Cell+Ther%22%5BJournal%5D)">Standardization and evaluation of the performance of the thrombin generation test under hypo- and hypercoagulability conditions.</a> Hematol Transfus Cell Ther. 41 (3), 244-252 (2019).</li>
<li>Dargaud, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+standardization+and+normalization+on+imprecision+of+calibrated+automated+thrombography%3Aan+international+multicentre+study%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Haematol%22%5BJournal%5D)">Effect of standardization and normalization on imprecision of calibrated automated thrombography:an international multicentre study.</a> Br J Haematol. 139 (2), 303-309 (2007).</li>
<li>Ninivaggi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+measurement+of+thrombin+generation%3Acommunication+from+the+ISTH+SSC+Subcommittee+on+Lupus+Anticoagulant%2FAntiphospholipid+Antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the measurement of thrombin generation:communication from the ISTH SSC Subcommittee on Lupus Anticoagulant/Antiphospholipid Antibodies.</a> J Thromb Haemost. 19 (5), 1372-1378 (2021).</li>
<li>Duchemin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+coagulation+factors+and+tissue+factor+concentration+on+the+thrombin+generation+test+in+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Influence of coagulation factors and tissue factor concentration on the thrombin generation test in plasma.</a> Thromb Haemost. 99 (4), 767-773 (2008).</li>
<li>Miszta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-fat+diet+delays+plasmin+generation+in+a+thrombomodulin-dependent+manner+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A high-fat diet delays plasmin generation in a thrombomodulin-dependent manner in mice.</a> Blood. 135 (19), 1704-1717 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><forte>Materiais</resistente></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cloridrato de cálcio (CaCl2.2H2O)</td><td>Merck</td><td>1.02382</td><td></td></tr><tr><td>Cefalina (kit de reagentes C.K. Prest 5 APTT)</td><td>Stago</td><td>00847</td><td>Estável por 6 meses em -20 &deg;C.&nbsp;</td></tr><tr><td>Água destilada</td><td></td><td></td><td>Anote a data de abertura. Use dentro de 1 dia após a primeira abertura.</td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido (DMSO)</td><td>Merck</td><td>1.02950.0500</td><td></td></tr><tr><td>Alfa-trombona humana</td><td>Laboratórios de Pesquisa em Enzimas</td><td>HT 1002a</td><td>A caixa contém um folheto com um certificado de análise. O volume de buffer a adicionar depende da concentração especificada e deve ser ajustado para que 1 & micro; L de trombona humana adicionada em 120 & micro; O reagente L produz uma concentração final de 76 nmol/L.</td></tr><tr><td>Plasmina humana</td><td>Laboratórios de Pesquisa em Enzimas</td><td>HPlas</td><td>A caixa contém um folheto com um certificado de análise. O volume de buffer a adicionar depende da concentração especificada e deve ser ajustado para que 1 & micro; L de plasmina humana adicionada em 120 & micro; O reagente L resulta em uma concentração final de 200 nmol/L.</td></tr><tr><td>Plasma normal em pool</td><td>Preparação interna</td><td>Não aplicável</td><td>Estável por 3 horas após o descongelamento se mantido no gelo.</td></tr><tr><td>Plasma do paciente</td><td>Não aplicável</td><td>Não aplicável</td><td></td></tr><tr><td>Substrato de plasmina (CBZ-L-fenilalalil-L-amida de arginina)-rodamina-morfolino ureia</td><td>Symeres</td><td></td><td>Estável por 6 meses em -80 &°C.&nbsp;</td></tr><tr><td>Fator tecidular humano recombinante (TF): Innovin</td><td>Dade Behring</td><td>B4212</td><td>Estável por 6 meses em -80 &°C.&nbsp;</td></tr><tr><td>Ativador de plasminógeno do tipo tecidual recombinante (tPA): Alteplase/Actilyse</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td></td><td>Estável por 12 meses em -80 &deg;C.&nbsp;</td></tr><tr><td>Tris(hidroximetil)aminometano (H2NC(CH2OH)3)</td><td>Merck</td><td>1.08382.2500</td><td></td></tr><tr><td>Tampão Tris-NaCl, pH 7,4 (TBS)</td><td>Preparação interna</td><td>Não aplicável</td><td></td></tr><tr><td>Tampão Tris-NaCl-CaCl2 tampão, pH 7,4 (TBS-Ca)</td><td>Preparação interna</td><td>Não aplicável</td><td></td></tr><tr><td>Substrato de trombina Bz-beta-Ala-Gly-Arg-7-amino-4-metilcumarina</td><td>Symeres</td><td></td><td>Estável por 6 meses em -80 &°C.&nbsp;</td></tr><tr><td><forte>Equipamento</forte></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluorímetro / leitor de microplacas Fluostar Optima com controle de temperatura e injetores de reagentes</td><td>BMG Labtech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Placa microtitulada de 96 poços, poliestireno, fundo plano, preta, superfície de ligação média (equivalente Microlon)</td><td>Greiner BIO-ONE</td><td>655076</td><td></td></tr><tr><td>Balanço analítico (balanço de carga superior)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pontas de pipeta azul (para 100-1000 e micro; L)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubos de Coleta de Sangue de Citrato 3mL (3,2% Citrato)</td><td>BD Vacutainer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Balde de gelo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Máquina de gelo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubadora / agitador microplate</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Agitador magnético</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rack de tubos para microcentrífugas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga, fechados</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medidor de pH</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pontas da pipeta 0,1-10 & micro; L, não estéril</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipetas (2, 10, 20, 100 e 1000 & micro; L)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chave de fenda (usada como sonda)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Misturador de válvulas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pontas de pipeta amarelas (para 20-200 e micro; L)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

o ensaio de hemostase de nijmegen: medição simultânea de geração de trombina e plasmina em um Único poço

The Nijmegen Hemostasis Assay: Simultaneous Fluorogenic Measurement of Thrombin and Plasmin Generation in a Single Well

O ensaio de hemostase de Nijmegen: Medição Simultânea de Geração de Trombina e Plasmina em um Único Poço

Thrombin and plasmin both play a central role in hemostasis, regulating coagulation and fibrinolysis, respectively. Conventional hemostatic assays often ...

the-nijmegen-hemostasis-assay-simultaneous-fluorogenic-measurement

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este estudo descreve um ensaio que mede a microplaca novel FV actividade de coagulação, durante a formação de coágulos de fibrina no plasma humano, que não havia sido descrita anteriormente. O método utiliza um leitor de microplacas cinético para medir continuamente a variação da absorvância a 405 nm durante a formação de coágulos de fibrina no plasma humano.

Medição da actividade de factor V no plasma humano, utilizando um ensaio de coagulação de Microplacas

Demonstração de um ensaio rápido quantitativa da inibição da coagulação do sangue pelo baixo peso molecular, heparina, enoxaparina. A contribuição de enoxaparina é avaliada através da remoção de sua influência através da digestão com heparinase. Uma descrição mais completa do ensaio está detalhado em nosso trabalho publicado.

Ensaio de Point-of-Care rápida de eficácia anticoagulante enoxaparina em sangue total

Este vídeo demonstra o uso de um espectrofotômetro UV-visível para monitorar a formação de coágulos de fibrina insolúveis em função da mudança na turbidez da solução. O espectrofotômetro UV-visível mede a absorbância da solução ao longo do tempo, o que representa a mudança de turbidez devido à formação de coágulos de fibrina insolúveis.

Espectroscopia UV-Visível para Monitorar a Formação de Coágulos de Fibrina

Este vídeo demonstra um ensaio para estudar a eficiência de reselamento da membrana plasmática em células de mamíferos. As células são expostas a uma toxina bacteriana formadora de poros, que forma poros na membrana celular. Na presença de íons de cálcio extracelulares, o poro causa influxo de cálcio, induzindo eventos de resselamento da membrana. A eficiência de reselagem é avaliada usando corante de iodeto de propídio de ligação ao DNA, que só entra nas células sem uma membrana resselada.

Um ensaio baseado em fluorescência in vitro para medir a eficiência de resselamento da membrana plasmática

Este trabalho descreve um modelo experimental de hemostasia que mede simultaneamente a função plaquetária e coagulação. Plaquetas e fibrina de fluorescência é medida em tempo real, e taxa de adesão de plaquetas, taxa de coagulação, e o início da coagulação são determinados. O modelo é usado para determinar as propriedades pró-coagulantes de plaquetas sob fluxo em concentrados para transfusão.

Um Modelo de Câmara Microfluidic Fluxo de transfusão de plaquetas e Hemostasia Medidas deposição de plaquetas e formação de fibrina em tempo real

A fibrina é responsável pela formação de coágulos durante a hemostasia e trombose. Ensaios de turbidez e tromboelastograhy (TEG) podem ser utilizados como ferramentas sinérgicas que fornecem avaliação complementar de um coágulo. Essas duas técnicas juntas podem dar mais informações sobre como as condições de coagulação afetam a formação de coágulos fibrinas.

Alavancando a Turbidez e a Tromboelastografia para Caracterização Complementar do Coágulo

Os ensaios de trombólise in vitro muitas vezes têm lutado para replicar as condições in vivo, seja no trombo modelo que está sendo digerido ou no ambiente em que a trombólise está ocorrendo. Aqui, exploramos como o acoplamento do loop de Chandler e do ensaio de fibrinólise de fluxo fluorométrico em tempo real (RT-FluFF) é usado para monitoramento de lise de coágulo de alta fidelidade, ex-vivo.

Rastreamento da fibrinólise de coágulos sanguíneos totais formados por alça de Chandler sob fluxo de cisalhamento em um modelo de trombólise in vitro

A função plaquetária sob fluxo pode ser avaliada e a ressuscitação hemostática simulada pode ser modelada usando um dispositivo microfluídico, que tem aplicações em trauma e medicina transfusional.

Microfluídica na avaliação da função plaquetária

O presente protocolo fornece um conjunto abrangente de procedimentos necessários para analisar plaquetas pró-coagulantes, que exibem características sobrepostas de necrose, apoptose e ativação plaquetária.

Análise abrangente de plaquetas pró-coagulantes exibindo características de necrose, apoptose e ativação plaquetária

Este trabalho descreve um ensaio microfluídico que utiliza o estresse de cisalhamento para desencadear a formação de trombos no sangue e caracteriza o trombo por múltiplas dimensões de leitura. O ensaio pode medir a tendência protrombótica de amostras de sangue e, portanto, é útil no diagnóstico de doenças, descoberta de fármacos, bem como em estudos mecanicistas básicos relacionados à trombose.

Ensaio de Perfil de Trombo: Uma Plataforma Baseada em Microfluídica para Caracterização Abrangente da Trombogênese Biomecânica

Aprenda a medir simultaneamente a geração de trombina e plasmina em plasma usando o ensaio de hemostase de Nijmegen. Este método integra coagulação e fibrinólise para avaliar o equilíbrio hemostático em amostras clínicas.

O ensaio de hemostase de Nijmegen: Medição Simultânea de Geração de Trombina e Plasmina em um Único Poço

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