Name: Modelo murino de transição aguda para crônica de doença renal induzida por isquemia/lesão de reperfusão renal (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Aprenda a induzir lesão renal por isquemia-reperfusão em camundongos usando abordagem dorsal e nefrectomia contralateral. Este modelo reprodutível permite estudar a progressão de lesão renal aguda para doença renal crônica com alta sobrevivência.

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<ol><li>Susantitaphong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((World+incidence+of+AKI%3A+A+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">World incidence of AKI: A meta-analysis.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 8, 1482-1493 (2013).</li>
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<li>Coca, S. G., Singanamala, S., Parikh, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+kidney+disease+after+acute+kidney+injury%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Chronic kidney disease after acute kidney injury: a systematic review and meta-analysis.</a> Kidney Int. 81, 442-448 (2012).</li>
<li>Chawla, L. S., Eggers, P. W., Star, R. A., Kimmel, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury+and+chronic+kidney+disease+as+interconnected+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury and chronic kidney disease as interconnected syndromes.</a> N Engl J Med. 371, 58-66 (2014).</li>
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<li>Malek, M., Nematbakhsh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+ischemia%2Freperfusion+injury%3B+from+pathophysiology+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Renal+Inj+Prev%22%5BJournal%5D)">Renal ischemia/reperfusion injury; from pathophysiology to treatment.</a> J Renal Inj Prev. 4, 20-27 (2015).</li>
<li>Le Clef, N., Verhulst, A., D'Haese, P. C., Vervaet, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+renal+ischemia-reperfusion+as+a+robust+model+for+acute+to+chronic+kidney+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Unilateral renal ischemia-reperfusion as a robust model for acute to chronic kidney injury in mice.</a> PLoS One. 11, e0152153(2016).</li>
<li>Smith, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+rat+and+mouse+models+of+bilateral+renal+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo%22%5BJournal%5D)">Robust rat and mouse models of bilateral renal ischemia reperfusion injury.</a> In Vivo. 38, 1049-1057 (2024).</li>
<li>Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+model+of+acute+kidney+injury+and+post-injury+fibrosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post-injury fibrosis in mice.</a> J Vis Exp. (78), e50495(2013).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sirtuin+5+regulates+proximal+tubule+fatty+acid+oxidation+to+protect+against+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Sirtuin 5 regulates proximal tubule fatty acid oxidation to protect against AKI.</a> JASN. 37 (1), 0163(2019).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-derived+miR-17%7E92+promotes+angiogenesis+to+protect+against+renal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Endothelial-derived miR-17~92 promotes angiogenesis to protect against renal ischemia-reperfusion injury.</a> JASN. 32 (3), 552-563 (2021).</li>
<li>Silva Barbosa, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dicarboxylic+acid+dietary+supplementation+protects+against+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Dicarboxylic acid dietary supplementation protects against AKI.</a> JASN. 35, 135-148 (2024).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+long-chain+acyl-CoA+dehydrogenase+protects+against+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Loss of long-chain acyl-CoA dehydrogenase protects against acute kidney injury.</a> JCI Insight. 10, (2025).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinoic+Acid+signaling+coordinates+macrophage-dependent+injury+and+repair+after+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Retinoic Acid signaling coordinates macrophage-dependent injury and repair after AKI.</a> JASN. 27, 495-508 (2016).</li>
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<li>Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ureteral+obstruction+as+a+model+of+renal+interstitial+fibrosis+and+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy.</a> Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).</li>
<li>Bonventre, J. V., Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+pathophysiology+of+ischemic+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Cellular pathophysiology of ischemic acute kidney injury.</a> J Clin Invest. 121, 4210-4221 (2011).</li>
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<li>Jordan, C. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+kidney+transplant+outcome+is+best+measured+by+transdermal+glomerular+filtration+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Murine kidney transplant outcome is best measured by transdermal glomerular filtration rate.</a> Am J Transplant. 24, 2150-2156 (2024).</li>
<li>Scarfe, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+of+kidney+function+by+minimally+invasive+techniques+correlate+with+histological+glomerular+damage+in+SCID+mice+with+adriamycin-induced+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Measures of kidney function by minimally invasive techniques correlate with histological glomerular damage in SCID mice with adriamycin-induced nephropathy.</a> Sci Rep. 5, 13601(2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Filtro de gás anestésico</td><td>A.M. Bickford&nbsp;</td><td>F-AIR</td><td></td></tr><tr><td>Câmara de indução de anestesia, aquecimento</td><td>Produtos do Laboratório AIMS</td><td>WCS8</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de coleta de sangue</td><td>BD Microtainer</td><td>365967</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Laboratórios de Descontaminação</td><td>2701</td><td></td></tr><tr><td>Ethiqa XR (buprenorfina de liberação prolongada)</td><td>Saúde Animal Fidelis</td><td>NDC 86084-100-30</td><td></td></tr><tr><td>Pomada para os olhos</td><td>AKORN</td><td>NDC 17478-062-35</td><td></td></tr><tr><td>Compressas de gaze, estéreis &nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>3353</td><td></td></tr><tr><td>Aparador de cabelo para pequenos animais</td><td>WAHL</td><td>CLP-9868</td><td></td></tr><tr><td>Lâmpada de calor, infravermelho</td><td>Instrumentos Physitemp</td><td>HL-1</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de calor para circulação de água quente</td><td>BrainTree Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Calor/Anestesia para pequenos animais, Versaflex & nbsp;</td><td>BrainTree Scientific</td><td>EZ-7150</td><td></td></tr><tr><td>Cortinas cirúrgicas que retêm calor</td><td>Braintree Scientific</td><td>SPDR-MPS</td><td></td></tr><tr><td>Esterilizador de esferas quentes</td><td>Simon Keller</td><td>Steri 250</td><td></td></tr><tr><td>Solução de isoflurano</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clipe de ligação</td><td>NOSSO</td><td>533140</td><td></td></tr><tr><td>Ligaduras</td><td>NOSSO</td><td>533837</td><td></td></tr><tr><td>Microsonda para temperatura retal &nbsp;</td><td>Fisitem</td><td>RET-3</td><td></td></tr><tr><td>Termômetro Microsonda</td><td>Fisitem</td><td>BAT-12</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio, óptico</td><td>Leica</td><td>DM2500</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio, scanner deslizante</td><td>Leica</td><td>Scanner de slides Aperio CS2</td><td></td></tr><tr><td>Mouse (FVB/NJ)</td><td>Laboratório Jackson</td><td>001800</td><td></td></tr><tr><td>Agulha (23G)</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>Povidone iode swabsticks&nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>1201</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de Bisturi</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>10020-00</td><td></td></tr><tr><td>Cabo de Bisturi</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>10060-13</td><td></td></tr><tr><td>Pinças cirúrgicas, não serrilhadas</td><td>Instrumento Cirúrgico Roboz</td><td>RS-5228</td><td></td></tr><tr><td>Pinças cirúrgicas, serrilhadas</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>11051-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinça cirúrgica, dentada</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>11019-12</td><td></td></tr><tr><td>Luvas cirúrgicas</td><td>CTI</td><td>SPGF750</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura separadora de tecido cirúrgico</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>14072-10</td><td></td></tr><tr><td>Sutura, Ácido Poliglicólico (PGA)/absorvível&nbsp; (5-0)</td><td>Dynarex</td><td>9131</td><td></td></tr><tr><td>Sutura, seda (4-0)</td><td>Oasis</td><td>MV-683-V</td><td></td></tr><tr><td>Seringa (3ml)</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Cortinas de toalha, estéreis &nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td></td></tr><tr><td>Pinça vascular aplicando pinças</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>15057-14</td><td></td></tr><tr><td>Pinça vascular, não traumática &nbsp;</td><td>Ferramentas de Ciência Fina &nbsp;</td><td>18055-03</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clipe de enrolamento</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>12020-09</td><td></td></tr><tr><td>Clipes de ferida</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>12022-09</td><td></td></tr></tbody></table>

modelo murino de transição aguda para crônica de doença renal induzida por isquemia/lesão de reperfusão renal

Mouse Model of Acute to Chronic Kidney Disease Transition Induced by Renal Ischemia/Reperfusion Injury

Modelo murino de transição aguda para crônica de doença renal induzida por isquemia/lesão de reperfusão renal

Surgical transient occlusion of the renal pedicle induces renal ischemia&#8211;reperfusion injury (IRI), a widely used model for studying acute kidney ...

Nossa pesquisa foca na lesão por isquemia renal e reperfusão, ou IRI, investigando como ela impulsiona o desenvolvimento e a progressão da doença renal crônica. Utilizamos um modelo isquêmico de DRC de camundongo, induzindo IRI renal unilateral, seguido de nefrectomia contralateral retardada para estudar a progressão da doença. Para começar, faça autoclave em todos os instrumentos cirúrgicos antes do uso.Ao realizar cirurgias em vários animais, remova sangue e detritos dos instrumentos entre os procedimentos e depois esterilize-os por 10 a 15 segundos usando um esterilizador de esferas quentes. Instale uma almofada térmica que circule água na mesa cirúrgica e posicione uma lâmpada infravermelha acima do campo cirúrgico. Transfira um rato anestesiado para a almofada cirúrgica aquecida.Administrar buprenorfina de liberação prolongada a 3,25 miligramas por quilograma por via subcutânea como analgesia. Coloque o rato na posição deitada e prenda os membros com fita adesiva para minimizar o movimento. Depois, remova o pelo do local cirúrgico.Aplique pomada oftálmica nos olhos para evitar o ressecamento durante o procedimento. Insira uma sonda retal, prenda-a com fita adesiva e conecte-a a um termômetro para monitoramento contínuo. Desinfete a área cirúrgica alternando sessões de 10%povidona/iodo e etanol 70% três vezes.Depois, cubra a área com uma tela estéril. Faça uma incisão na linha média da pele de três a quatro centímetros ao nível dos rins e separe a pele das camadas subcutâneas. Insira delicadamente um dedo estéril enluvado entre a parede abdominal e a mesa cirúrgica e deslize ao longo da parede abdominal para empurrar o rim dorsalmente até que ele fique visível através do tecido subcutâneo.No nível onde o rim é visualizado, aproximadamente um centímetro lateral à coluna no lado esquerdo, faça uma incisão muscular longitudinal de 1 a 1,5 centímetro. Depois, exteriorize suavemente o rim pela incisão dorsal. Se uma membrana fina obstruir o acesso, dissece-a de forma direta.Ao estabilizar o rim com pinças não serrilhadas, dissece de forma direta a gordura perihilar e o tecido conjuntivo ao redor do pedículo renal superior e inferior para criar um canal para a colocação da pinça vascular. Confirme que a temperatura corporal central está entre 36,8 e 37,2 graus Celsius. Depois, aplique uma pinça vascular não traumática na artéria e veia renal em um feixe.Puxe a pele para cobrir o rim e mantê-lo próximo à temperatura corporal central. Mantenha a temperatura corporal central entre 36,8 e 37,2 graus Celsius ajustando a bomba de calor e a lâmpada infravermelha conforme necessário. Após 30 minutos de isquemia, remova a pinça vascular.Após remover a pinça, confirme a reperfusão bem-sucedida e retorne o rim à cavidade abdominal usando um cotonete. Feche a camada muscular com pontos absorvíveis 5-0 e feche a pele com clipes para feridas. Deixe o rato se recuperar em uma gaiola limpa após interromper a anestesia.Realize nefrectomia contralateral um dia antes da colheita de tecido, que é 27 ou 41 dias após a lesão por isquemia-reperfusão. Após preparar o animal para a cirurgia, como demonstrado anteriormente, faça uma incisão na pele dorsal e subcutânea para expor o rim direito. Crie uma incisão muscular longitudinal de 1 a 1,5 centímetro, aproximadamente um centímetro lateral à coluna do lado direito.Enquanto segura o rim com pinças não serrilhadas, dissece de forma direta a gordura perihilar e o tecido conjuntivo para expor o pedículo renal. Separe cuidadosamente a glândula adrenal do rim, deixando a glândula suprarrenal intacta. Depois, ligue o pedículo renal com um pequeno clipe de ligadura e suturas de seda 4-0.Transecte os vasos do lado renal. Depois, corte o ureter e remova o rim. Feche a incisão suturando o músculo e prendendo a pele.Imagens de baixa ampliação das seções inteiras do rim tingido tricromo de Masson revelaram atrofia renal progressiva aos 28 e 42 dias após a lesão por isquemia-reperfusão renal. Além disso, a coloração tricromática de Masson mostrou fibrose intersticial extensa no córtex e na medula aos 28 e 42 dias após a lesão de isquemia renal-reperfusão. Os níveis séricos de nitrogênio ureia no sangue e creatinina sérica estavam significativamente elevados aos 28 e 42 dias após a lesão.A expressão dos genes marcadores da DRC Acta 2 e Col1a1 foi significativamente aumentada nos dias 28 e 42 após a lesão. Esse protocolo permite que os pesquisadores avaliem os resultados da cirurgia renal, demonstrando altas taxas de sobrevivência e melhora reprodutibilidade por meio de uma abordagem cirúrgica dorsal. Um grande desafio na nefrologia é a falta de terapias estabelecidas capazes de prevenir ou interromper a progressão da lesão renal aguda para a doença renal crônica.Estudos futuros podem usar esse modelo isquêmico de DRC para avaliar novas terapias e investigar a função gênica usando camundongos knockout direcionados.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Um modelo poderoso para perioperatório e crítica lesão renal aguda relacionada com o cuidado é apresentado. Usando hipoperfusão corpo inteiro induzida por parada cardíaca é possível a quase replicar as alterações histológicas e funcionais do AKI clínico.

Cardiac Arrest normotérmica e Ressuscitação Cardiopulmonar: um modelo do rato de isquemia-reperfusão

Descrevemos modelos de lesão renal por isquemia e reperfusão induzida moderada e grave em que os ratos submetidos a clampeamento do pedículo renal unilateral seguido de nefrectomia contralateral simultânea ou tardia, respectivamente. Estes modelos consistentemente dar origem a uma disfunção renal e fibrose pós-lesão, mas a gravidade da lesão e sobrevivência dependem de fundo, idade e equipamento cirúrgico mouse.

Isquemia-reperfusão modelo de lesão renal aguda e Pós Lesão fibrose em camundongos

O modelo de camundongo de lesão de reperfusão de isquemia renal descrito aqui compreende uma nefrectomia direita que fornece tecido de controle e pinçamento do pedículo renal esquerdo para induzir isquemia que resulta em lesão renal aguda. Este modelo usa uma abordagem de laparotomia de linha média com todas as etapas realizadas por meio de uma incisão.

Renal Isquemia Reperfusão: um modelo do rato de lesão e regeneração

Este estudo apresenta um modelo animal de grande porte altamente reprodutível de isquemia renal-reperfusão em suínos usando oclusão bilateral de balão-cateter percutâneo temporário das artérias renais por 60 min e reperfusão por 24 h.

Um grande modelo animal para lesão renal aguda por oclusão bilateral temporária da artéria renal

A lesão por isquemia renal está associada à alta morbidade e mortalidade em pacientes hospitalizados. Aqui, apresentamos um modelo de camundongo simples e eficaz de lesão unilateral de isquemia renal-reperfusão e fornecemos uma visão geral sequencial das alterações patológicas representativas observadas no rim.

Um modelo eficaz de rato de isquemia renal unilateral-reperfusão lesão

Este estudo estabeleceu um protocolo com foco no refinamento técnico de um modelo murino de isquemia-reperfusão renal bilateral para pesquisa de lesão renal aguda.

Refinamento Técnico de um Modelo Bilateral de Isquemia-Reperfusão Renal em Camundongos para Pesquisa de Lesão Renal Aguda

O grau de disfunção vascular e contribuindo mecanismos fisiológicos podem ser avaliados em pacientes com doença renal crônica através da medição do fluxo-mediada dilatação da artéria braquial, a velocidade da onda de pulso da aorta, e expressão da proteína de célula endotelial vascular.

Avaliação da função vascular em pacientes com doença renal crônica

Aqui nós descrevemos o procedimento detalhado de isquemia e reperfusão em ratos que resulta em lesão reprodutível sem mortalidade para incentivar a padronização da técnica em todo o campo. Este modelo de lesão por isquemia-reperfusão intestinal pode ser utilizada para estudar os mecanismos celulares e moleculares da lesão e da regeneração.

Modelo murino de isquemia-reperfusão

Este artigo descreve um processo para induzir a lesão de isquemia-reperfusão da retina pela pressão intra-ocular elevada em ratos. lesão de isquemia-reperfusão da retina pela pressão intra-ocular elevada serve para modelar patologias humanas caracterizadas por oxigénio e entrega de nutrientes comprometida na retina, permitindo aos investigadores para examinar os mecanismos celulares e potenciais tratamentos para doenças humanas da unidade neurovascular da retina.

Um modelo de mouse Retinal isquemia-reperfusão Através elevação da pressão intra-ocular

Este protocolo descreve um rim completo check-up que deve ser realizado em modelos do rato da doença glomerular. Os métodos permitem análise detalhada funcional, estrutural e mecanicista da função glomerular, que pode ser aplicada a todos os modelos do rato da doença glomerular.

Avaliação da função renal em modelos do rato da doença Glomerular

Aprenda a induzir lesão renal por isquemia-reperfusão em camundongos usando abordagem dorsal e nefrectomia contralateral. Este modelo reprodutível permite estudar a progressão de lesão renal aguda para doença renal crônica com alta sobrevivência.

Modelo murino de transição aguda para crônica de doença renal induzida por isquemia/lesão de reperfusão renal

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