Name: Ensaio de Formação de Colônias Detectando a Capacidade Proliferativa de Células de Osteossarcoma por Knockdown de RNAs LncRNA (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-16T13:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Aprenda a realizar ensaios de formação de colônias para avaliar a capacidade proliferativa de células de osteossarcoma 143B após knockdown de lncRNA. Este protocolo oferece maior relevância biológica que ensaios metabólicos de curto prazo.

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<ol><li>Chen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IAV+inhibits+the+host+antiviral+defense+mediated+by+LncRNA-LRIR+to+enhance+viral+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Macromol%22%5BJournal%5D)">IAV inhibits the host antiviral defense mediated by LncRNA-LRIR to enhance viral replication.</a> Int J Biol Macromol. 322 (Pt 1), 146665(2025).</li>
<li>Zhu, J., Mo, Y. Y., Peng, W. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+binding+protein-mediated+competing+endogenous+RNA+mechanism+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">RNA binding protein-mediated competing endogenous RNA mechanism in cancer.</a> Gene. 963, 149606(2025).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KIAA1429-mediated+ZFPM2-AS1+m%286%29A+modification+promotes+the+proliferation%2C+migration+and+invasion+of+osteosarcoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oncol+Lett%22%5BJournal%5D)">KIAA1429-mediated ZFPM2-AS1 m(6)A modification promotes the proliferation, migration and invasion of osteosarcoma cells.</a> Oncol Lett. 30 (4), 453(2025).</li>
<li>Oh, M., Kadam, R. N., Charania, Z. S., Somarowthu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LncRNA+SChLAP1+promotes+cancer+cell+proliferation+and+invasion+via+its+distinct+structural+domains+and+conserved+regions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">LncRNA SChLAP1 promotes cancer cell proliferation and invasion via its distinct structural domains and conserved regions.</a> J Mol Biol. 437 (19), 169350(2025).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TBX5-AS1+induces+ER+stress+and+suppresses+lung+cancer+growth+and+tumor+stemness+via+the+miR-494-3p%2FATF6+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stress+Chaperones%22%5BJournal%5D)">TBX5-AS1 induces ER stress and suppresses lung cancer growth and tumor stemness via the miR-494-3p/ATF6 axis.</a> Cell Stress Chaperones. 30 (6), 100113(2025).</li>
<li>Xu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((lncRNA+POU3F3+promotes+osteosarcoma+progression+through+GPX4-modulated+ferroptosis+by+interaction+with+IGF2BP2+to+facilitate+NRF2+mRNA+stability%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dis%22%5BJournal%5D)">lncRNA POU3F3 promotes osteosarcoma progression through GPX4-modulated ferroptosis by interaction with IGF2BP2 to facilitate NRF2 mRNA stability.</a> Genes Dis. 12 (5), 101439(2025).</li>
<li>Li, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LncRNA+HOXA-AS3+promotes+cell+proliferation+and+invasion+via+targeting+miR-218-5p%2FFOXP1+axis+in+osteosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">LncRNA HOXA-AS3 promotes cell proliferation and invasion via targeting miR-218-5p/FOXP1 axis in osteosarcoma.</a> Sci Rep. 14 (1), 16581(2024).</li>
<li>Ghasemi, M., Turnbull, T., Sebastian, S., Kempson, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+MTT+assay%3A+Utility%2C+Limitations%2C+pitfalls%2C+and+interpretation+in+bulk+and+single-cell+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The MTT assay: Utility, Limitations, pitfalls, and interpretation in bulk and single-cell analysis.</a> Int J Mol Sci. 22 (23), (2021).</li>
<li>Harris, L., Zalucki, O., Piper, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BrdU%2FEdU+dual+labeling+to+determine+the+cell-cycle+dynamics+of+defined+cellular+subpopulations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Histol%22%5BJournal%5D)">BrdU/EdU dual labeling to determine the cell-cycle dynamics of defined cellular subpopulations.</a> J Mol Histol. 49 (3), 229-234 (2018).</li>
<li>Romar, G. A., Kupper, T. S., Divito, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+techniques+made+simple%3A+Techniques+to+assess+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Research techniques made simple: Techniques to assess cell proliferation.</a> J Invest Dermatol. 136 (1), e1-e7 (2016).</li>
<li>Stefanowicz-Hajduk, J., Ochocka, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+cell+analysis+system+in+cytotoxicity+applications%3A+Usefulness+and+comparison+with+tetrazolium+salt+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Rep%22%5BJournal%5D)">Real-time cell analysis system in cytotoxicity applications: Usefulness and comparison with tetrazolium salt assays.</a> Toxicol Rep. 7, 335-344 (2020).</li>
<li>Franken, N. A., Rodermond, H. M., Stap, J., Haveman, J., van Bree, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonogenic+assay+of+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Clonogenic assay of cells in vitro.</a> Nat Protoc. 1 (5), 2315-2319 (2006).</li>
<li>Brix, N., Samaga, D., Belka, C., Zitzelsberger, H., Lauber, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+clonogenic+growth+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of clonogenic growth in vitro.</a> Nat Protoc. 16 (11), 4963-4991 (2021).</li>
<li>Rajendran, V., Jain, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+tumorigenic+assay%3A+Colony+forming+assay+for+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vitro tumorigenic assay: Colony forming assay for cancer stem cells.</a> Methods Mol Biol. 1692, 89-95 (2018).</li>
<li>Guzman, C., Bagga, M., Kaur, A., Westermarck, J., Abankwa, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ColonyArea%3A+An+ImageJ+plugin+to+automatically+quantify+colony+formation+in+clonogenic+assays%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">ColonyArea: An ImageJ plugin to automatically quantify colony formation in clonogenic assays.</a> PLoS One. 9 (3), e92444(2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,5 mL MICROTUBOS</td><td>Merck</td><td>AXYMCT150C</td><td></td></tr><tr><td>Formalina tamponada 10% neutra</td><td>VICTREX</td><td>5205000</td><td></td></tr><tr><td>100 - 1000 & mu; L Pontas Graduadas Azuis Estendidas</td><td>Shanghai BioScience Co., Ltd</td><td>BS10401ML</td><td></td></tr><tr><td>Laboratório de Pratos de Cultura Celular de 100mm</td><td>Wuxi NEST Biotechnology Co., Ltd</td><td>704001</td><td></td></tr><tr><td>143B</td><td>ATCC</td><td>ATCC CRL-8303TM</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 15 mL</td><td>Shanghai BioScience Co., Ltd</td><td>BL2002150</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Cultura Celular de 6 Poços</td><td>Wuxi NEST Biotechnology Co., Ltd</td><td>703001</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora CO2</td><td>Thermo Fisher Technology (China)Co., Ltd.</td><td>300583057</td><td></td></tr><tr><td>Violeta Cristalina</td><td>TCI Xangai</td><td>C0428</td><td></td></tr><tr><td>Meio DMEM</td><td>WISENT CORPORATION</td><td>319-005-CL</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Research Plus</td><td>Eppendorf</td><td>3123000233</td><td></td></tr><tr><td>FBS - Qualidade superior</td><td>WISENT CORPORATION</td><td>086-150</td><td></td></tr><tr><td>Caneta de marca</td><td>Zebra Trading (Shenzhen) Co., Ltd.&nbsp;</td><td>YYST5</td><td></td></tr><tr><td>Opti-MEM</td><td>Gibco</td><td>31985070</td><td></td></tr><tr><td>PASTEUR PIPETTE</td><td>Labgic</td><td>BS-XG-O3L</td><td></td></tr><tr><td>Buffer PBS (pó seco)</td><td>Labgic</td><td>BL601A</td><td></td></tr><tr><td>PEI</td><td>Policiências</td><td>24765</td><td></td></tr><tr><td>Pontas de pipeta</td><td>Merck</td><td>AXYT200Y</td><td></td></tr><tr><td>Enzima TrypLE Express</td><td>Gibco</td><td>12604021</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina/EDTA</td><td>Gibco</td><td>R001100</td><td></td></tr></tbody></table>

ensaio de formação de colônias detectando a capacidade proliferativa de células de osteossarcoma por knockdown de rnas lncrna

Colony Formation Assay Detecting the Proliferative Capacity of LncRNA-knockdown Osteosarcoma Cells

Ensaio de Formação de Colônias Detectando a Capacidade Proliferativa de Células de Osteossarcoma por Knockdown de RNAs LncRNA

Aberrant long non-coding RNAs (lncRNAs) expression profoundly influences cellular proliferation of osteosarcoma cells, suggesting that they may serve as ...

colony-formation-assay-detecting-proliferative-capacity-lncrna

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JoVE Journal

Medicine

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Este vídeo descreve o ensaio de formação de colônias, que ajuda a determinar a capacidade das células de câncer de pulmão de proliferar indefinidamente e formar colônias individuais. Podemos analisar o efeito de um agente anticancerígeno nas células formadoras de colônias, analisando as mudanças no número e / ou tamanho das colônias resultantes.

Ensaio de formação de colônias: avaliando a eficácia de agentes anticancerígenos em células de câncer de pulmão formadoras de colônias

O ensaio de formação de colônias de ágar mole é um método usado para confirmar o crescimento independente da ancoragem celular in vitro. O objetivo deste protocolo é ilustrar um método rigoroso para a detecção do potencial tumorigênico de células transformadas e os efeitos supressores tumorais de proteínas em células transformadas.

A Formação Ensaio macio Agar Colony

A presença de células-tronco cancerosas (CSCs) em sarcomas ósseos foi recentemente ligada à sua patogênese. Neste artigo, apresentamos o isolamento de CSCs de culturas de células primárias obtidas a partir de biópsias humanas de osteossarcoma convencional (OS) que utilizam a capacidade dos CSCs a crescer sob condições não aderentes.

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures de Human osteossarcoma convencional

O objetivo deste artigo é fornecer uma descrição detalhada do protocolo para o ensaio de metástase pulmonar (PuMA). Este modelo permite aos pesquisadores estudar o crescimento de células metastáticas osteossarcoma (OS) no tecido pulmonar, usando um widefield fluorescência ou microscópio confocal de varredura a laser.

Considerações práticas em estudar a colonização de pulmão metastático em osteossarcoma usando o ensaio de metástase pulmonar

Fenótipos de célula dormente e ativo câncer foram caracterizados utilizando imagens de fase quantitativa. Ensaios de proliferação, migração e morfologia celular foram integrados e analisados em um método simples.

Uma lapso de tempo, livre de rótulo, quantitativa fase estudo de células cancerosas humanas latentes e ativos de imagem

Aqui, apresentamos um protocolo para a geração de pluripotentes induzidas (iPSCs) as células-tronco do paciente fibroblastos derivada de síndrome de Li-Fraumeni (LFS), diferenciação de iPSCs através de células-tronco mesenquimais (MSCs) de osteoblastos e modelagem em vivo tumorigênese usando osteoblastos paciente-derivado do LFS.

Modelagem de osteossarcoma usando síndrome de Li-Fraumeni paciente-derivado induzido Pluripotent Stem Cells

O presente protocolo descreve a injeção de célula de osteossarcoma intratibia para gerar modelos de camundongos com osteossarcoma ortotópico e lesões de metástase pulmonar.

Injeção de células osteossarcoma intratibiais para gerar modelos de osteossarcoma ortotópico e metástase pulmonar

O presente protocolo descreve um método de hibridização in situ por fluorescência de RNA para localizar os lncRNAs em células humanas de osteossarcoma.

Hibridização in situ por fluorescência de RNA para localização de RNA longo e não codificante em células de osteossarcoma humano

O protocolo relatado aqui permite a avaliação da eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) em linhas de células e a optimização das condições de PDT, antes de aplicar a terapia em modelos animais.

Citotóxicos Eficácia da Terapia Fotodinâmica no osteossarcoma Células<em&gt; In Vitro</em

O ensaio de formao de foco fornece um método simples para avaliar o potencial de transformação de um oncogene candidato.

Concentre Formação: Um Ensaio Celular para Determinar o Potencial oncogénica de um Gene

Aprenda a realizar ensaios de formação de colônias para avaliar a capacidade proliferativa de células de osteossarcoma 143B após knockdown de lncRNA. Este protocolo oferece maior relevância biológica que ensaios metabólicos de curto prazo.

Ensaio de Formação de Colônias Detectando a Capacidade Proliferativa de Células de Osteossarcoma por Knockdown de RNAs LncRNA

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