Name: Um Modelo Padronizado Ex Vivo de Oromucosas Suínas para Avaliação de Fluxos de Peptídeos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-09T12:55:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Aprenda a avaliar a permeação de peptídeos através de mucosas orais suínas ex vivo usando células de difusão de Franz e inserções 3D. Este método padronizado identifica combinações otimizadas de potencializadores de permeação para formulações farmacêuticas bucais e sublinguais.

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<ol><li>Karki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oromucosal+films+for+peptide+delivery%3A+formulation+strategies+using+permeation+enhancers+and+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Deliv+Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Oromucosal films for peptide delivery: formulation strategies using permeation enhancers and polymers.</a> Drug Deliv Transl Res. , (2025).</li>
<li>Karavasili, C., Eleftheriadis, G. K., Gioumouxouzis, C., Andriotis, E. G., Fatouros, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+drug+delivery+and+3d+printing+technologies%3A+a+focus+on+special+patient+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Mucosal drug delivery and 3d printing technologies: a focus on special patient populations.</a> Adv Drug Deliv Rev. 176, 113858(2021).</li>
<li>Brayden, D. J., Hill, T., Fairlie, D., Maher, S., Mrsny, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+delivery+of+peptides+by+the+oral+route%3A+formulation+and+medicinal+chemistry+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Systemic delivery of peptides by the oral route: formulation and medicinal chemistry approaches.</a> Adv Drug Deliv Rev. 157, 2-36 (2020).</li>
<li>Al Musaimi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDA%27s+stamp+of+approval%3A+unveiling+peptide+breakthroughs+in+cardiovascular+diseases%2C+ACE%2C+HIV%2C+CNS%2C+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pept+Sci%22%5BJournal%5D)">FDA's stamp of approval: unveiling peptide breakthroughs in cardiovascular diseases, ACE, HIV, CNS, and beyond.</a> J Pept Sci. 30 (11), e3627(2024).</li>
<li>Lewis, A. L., McEntee, N., Holland, J., Patel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+approval+of+Rybelsus+%28oral+semaglutide%29%3A+ushering+in+a+new+era+in+peptide+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Deliv+Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Development and approval of Rybelsus (oral semaglutide): ushering in a new era in peptide delivery.</a> Drug Deliv Transl Res. 12 (1), 1-6 (2022).</li>
<li>Zhang, Y., Zhang, H., Ghosh, D., Williams, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Just+how+prevalent+are+peptide+therapeutic+products%3F+a+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Just how prevalent are peptide therapeutic products? a critical review.</a> Int J Pharm. 587, 119491(2020).</li>
<li>Wanasathop, A., Patel, P. B., Choi, H. A., Li, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeability+of+buccal+mucosa%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Permeability of buccal mucosa.</a> Pharmaceutics. 13 (11), 1814(2021).</li>
<li>Mazzinelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+mucosa+models+to+evaluate+drug+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Oral mucosa models to evaluate drug permeability.</a> Pharmaceutics. 15 (5), 1559(2023).</li>
<li>Djekic, L., Martinovic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro%2C+ex+vivo+and+in+vivo+methods+for+characterization+of+bioadhesiveness+of+drug+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Bioadhesives+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">In vitro, ex vivo and in vivo methods for characterization of bioadhesiveness of drug delivery systems.</a> Bioadhesives Drug Deliv. , (2020).</li>
<li>Mura, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+for+the+development+and+optimization+by+experimental+design+of+an+in+vitro+method+for+prediction+of+drug+buccal+absorption%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">A preliminary study for the development and optimization by experimental design of an in vitro method for prediction of drug buccal absorption.</a> Int J Pharm. 547 (1-2), 530-536 (2018).</li>
<li>Majid, H., Bartel, A., Burckhardt, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development%2C+validation+and+standardization+of+oromucosal+ex-vivo+permeation+studies+for+implementation+in+quality-controlled+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">Development, validation and standardization of oromucosal ex-vivo permeation studies for implementation in quality-controlled environments.</a> J Pharm Biomed Anal. 194, 113769(2021).</li>
<li>Wakchaure, R. S., Dhial, K., Pathak, A. Ethical and Safety Considerations in Drug Delivery Systems. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWakchaure%2C+RS+%22Next-Generation+Drug+Delivery+Systems%22">Next-Generation Drug Delivery Systems</a>. , Springer, Humana. New York, NY. (2025).</li>
<li>Wang, S., Zuo, A., Guo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+evaluation+of+in+vitro+penetration+models+for+buccal+mucosal+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Drug+Deliv+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Types and evaluation of in vitro penetration models for buccal mucosal delivery.</a> J Drug Deliv Sci Technol. 61, 102122(2021).</li>
<li>Sa, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+features+of+oral+epithelium+in+seven+animal+species%3A+as+a+reference+for+selecting+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Histological features of oral epithelium in seven animal species: as a reference for selecting animal models.</a> Eur J Pharm Sci. 81, 10-17 (2016).</li>
<li>Patel, V. F., Liu, F., Brown, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+the+oral+cavity%3A+in+vitro+and+in+vivo+evaluations+of+buccal+drug+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Modeling the oral cavity: in vitro and in vivo evaluations of buccal drug delivery systems.</a> J Control Release. 161 (3), 746-756 (2012).</li>
<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oromucosal+films%3A+from+patient+centricity+to+production+by+printing+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Oromucosal films: from patient centricity to production by printing techniques.</a> Expert Opin Drug Deliv. 16 (9), 981-993 (2019).</li>
<li>Malhotra, S., Lijnse, T., O'cearbhaill, E., Brayden, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Devices+to+overcome+the+buccal+mucosal+barrier+to+administer+therapeutic+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Devices to overcome the buccal mucosal barrier to administer therapeutic peptides.</a> Adv Drug Deliv Rev. 220, 115572(2025).</li>
<li>De Vries, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+the+permeability+barrier+inside+porcine+buccal+mucosa%3A+a+combined+in+vitro+study+of+drug+permeability%2C+electrical+resistance+and+tissue+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Localization of the permeability barrier inside porcine buccal mucosa: a combined in vitro study of drug permeability, electrical resistance and tissue morphology.</a> Int J Pharm. 76 (1-2), 25-35 (1991).</li>
<li>Diaz Del Consuelo, I., Pizzolato, G. P., Falson, F., Guy, R. H., Jacques, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+pig+esophageal+mucosa+as+a+permeability+barrier+model+for+buccal+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of pig esophageal mucosa as a permeability barrier model for buccal tissue.</a> J Pharm Sci. 94 (12), 2777-2788 (2005).</li>
<li>Pather, S. I., Rathbone, M. J., Şenel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+and+the+future+of+buccal+drug+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Current status and the future of buccal drug delivery systems.</a> Expert Opin Drug Deliv. 5 (5), 531-542 (2008).</li>
<li>Junginger, H. E., Hoogstraate, J. A., Verhoef, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+buccal+drug+delivery+and+absorption%E2%80%94in+vitro+and+in+vivo+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Recent advances in buccal drug delivery and absorption—in vitro and in vivo studies.</a> J Control Release. 62 (1-2), 149-159 (1999).</li>
<li>Goswami, T., Jasti, B. R., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+theoretical+pore+sizes+of+the+porcine+oral+mucosa+for+permeation+of+hydrophilic+permeants%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Oral+Biol%22%5BJournal%5D)">Estimation of the theoretical pore sizes of the porcine oral mucosa for permeation of hydrophilic permeants.</a> Arch Oral Biol. 54 (6), 577-582 (2009).</li>
<li>Otali, D., Fredenburgh, J., Oelschlager, D., Grizzle, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+tissue+as+a+control+for+histochemical+and+immunohistochemical+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Biotech+Histochem%22%5BJournal%5D)">Standard tissue as a control for histochemical and immunohistochemical staining.</a> Biotech Histochem. 91 (5), 309-326 (2016).</li>
<li>Franz-Montan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+different+pig+oral+mucosa+sites+as+permeability+barrier+models+for+drug+permeation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of different pig oral mucosa sites as permeability barrier models for drug permeation studies.</a> Eur J Pharm Sci. 81, 52-59 (2016).</li>
<li>Pegg, D. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPegg%2C+DE+%22Cryopreservation+and+Freeze-Drying+Protocols%22">Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols</a>. , Springer, Humana. New York, NY. (2014).</li>
<li>Hoogstraate, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+buccal+delivery+of+fluorescein+isothiocyanate-dextran+4400+with+glycodeoxycholate+as+an+absorption+enhancer+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">In vivo buccal delivery of fluorescein isothiocyanate-dextran 4400 with glycodeoxycholate as an absorption enhancer in pigs.</a> J Pharm Sci. 85 (5), 457-460 (1996).</li>
<li>Karki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pullulan-based+bilayer+film+for+buccal+delivery+of+a+GLP-1+peptide+analogue%5BTitle%5D)+AND+%22Carbohydr+Polym%22%5BJournal%5D)">A pullulan-based bilayer film for buccal delivery of a GLP-1 peptide analogue.</a> Carbohydr Polym. 380, 125064(2026).</li>
<li>Shu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+and+experimental+analysis+of+drug-coated+microneedle+skin+insertion%3A+the+mode+of+administration+matters%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Computational and experimental analysis of drug-coated microneedle skin insertion: the mode of administration matters.</a> Adv Mater Interfaces. 12 (17), 2500202(2025).</li>
<li>Marxen, E., Axelsen, M. C., Pedersen, A. M. L., Jacobsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+cryoprotectants+for+maintaining+drug+permeability+barriers+in+porcine+buccal+mucosa%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Effect of cryoprotectants for maintaining drug permeability barriers in porcine buccal mucosa.</a> Int J Pharm. 511 (1), 599-605 (2016).</li>
<li>Rebollo, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salcaprozate-based+ionic+liquids+for+GLP-1+gastric+delivery%3A+a+mechanistic+understanding+of+in+vivo+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Salcaprozate-based ionic liquids for GLP-1 gastric delivery: a mechanistic understanding of in vivo performance.</a> J Control Release. 377, 267-276 (2025).</li>
<li>Hubatsch, I., Ragnarsson, E. G., Artursson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+drug+permeability+and+prediction+of+drug+absorption+in+Caco-2+monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Determination of drug permeability and prediction of drug absorption in Caco-2 monolayers.</a> Nat Protoc. 2 (9), 2111-2119 (2007).</li>
<li>Brayden, D. J., Stuettgen, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+glycodeoxycholate+and+sodium+deoxycholate+as+epithelial+permeation+enhancers%3A+in+vitro+and+ex+vivo+intestinal+and+buccal+bioassays%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Sodium glycodeoxycholate and sodium deoxycholate as epithelial permeation enhancers: in vitro and ex vivo intestinal and buccal bioassays.</a> Eur J Pharm Sci. 159, 105737(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Computer / Laptop</td><td>Genérico</td><td>Qualquer sistema padrão</td><td>&ge;8 GB RAM recomendado</td></tr><tr><td>Script de aquisição de dados</td><td>Personalizado</td><td>collect.py</td><td>Script de aquisição baseado em Python</td></tr><tr><td>Eletrodos de gel descartáveis</td><td>Genérico</td><td>Eletrodos Ag/AgCl pré-gelados</td><td>Uso único, adesivo</td></tr><tr><td>Módulo de aquisição EEG</td><td>Upside Down Labs</td><td>BioAmp EXG Pill</td><td>Front-end analógico para sinais de biopotencial</td></tr><tr><td>Gel de eletróde (se forem usados elétrodos reutilizáveis)</td><td>Genérico</td><td>Gel condutor</td><td>Melhora a condutividade do sinal</td></tr><tr><td>Aplicação interativa (jogo)</td><td>Genérico</td><td>Qualquer jogo simples (por exemplo, corrida)</td><td>Interface controlada por teclado</td></tr><tr><td>Fios de conexão</td><td>Genérico</td><td>Conectores Macho-Fêmea</td><td>Fios de breadboard padrão</td></tr><tr><td>Matplotlib / Seaborn</td><td>Open-source</td><td>Versões mais recentes</td><td>Bibliotecas de visualização</td></tr><tr><td>Placa de microcontrolador</td><td>Arduino</td><td>Uno / Maker Uno</td><td>ADC de 10 bits, interface USB</td></tr><tr><td>Ambiente de programação Python</td><td>Python Software Foundation</td><td>Python &ge;3.8</td><td>Linguagem de programação open-source</td></tr><tr><td>Biblioteca PyTorch</td><td>Meta AI</td><td>Versão &ge;1.12</td><td>Framework de aprendizado profundo</td></tr><tr><td>Scikit-learn</td><td>Open-source</td><td>Versão estável mais recente</td><td>Utilitários de ML</td></tr><tr><td>Bibliotecas de processamento de sinal</td><td>SciPy</td><td>Versão mais recente</td><td>Filtragem, STFT</td></tr><tr><td>Cabo USB</td><td>Genérico</td><td>USB Tipo-A para B</td><td>Cabo de transferência de dados</td></tr></tbody></table>

um modelo padronizado ex vivo de oromucosas suínas para avaliação de fluxos de peptídeos

A Standardized Ex Vivo Porcine Oromucosal Model for Evaluating Peptide Fluxes

Um Modelo Padronizado Ex Vivo de Oromucosas Suínas para Avaliação de Fluxos de Peptídeos

Oromucosal administration of drugs in films, tablets, lozenges, and other dosage forms provides a convenient systemic administration route for pediatric ...

a-standardized-ex-vivo-porcine-oromucosal-model-for-evaluating

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Medicine

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Este protocolo de detalhes um método para a medida quantitativa da translocação de peptídeos em grandes vesículas lipídicas unilamelares. Este método também fornece informações sobre a taxa de translocação de membrana e pode ser usado para identificar peptídeos que de forma eficiente e espontânea cruz bicamadas lipídicas.

Medição Translocação Peptide em grandes vesículas Unilamelares

Este protocolo descreve o uso de preparações de tecido intestinal excisadas ou "sacos intestinais" como um modelo ex vivo da função da barreira intestinal. Este modelo pode ser usado para avaliar a integridade da barreira epitelial e da camada de gel mucoso em locais intestinais específicos em modelos animais de doenças digestivas.

Ex Vivo Intestinal Sacs para Avaliar mucosa Permeabilidade de modelos de doença gastrointestinal

Este protocolo descreve o isolamento e cultura de células do intestino delgado de murídeo mistos. Estas culturas primárias intestinais permitir a investigação das vias de sinalização subjacentes a secreção do péptido intestino utilizando um número de técnicas.

Culturas primárias mistas de Murino Intestino Delgado destinadas ao estudo de Gut hormonal Secreção e imagens de células vivas de Células Enteroendócrinas

Desenvolvemos um novo ex vivo modelo que se aplica uma tensão constante para o espécime gástrico porcino. Este desenvolvimento, foi possível avaliar o desempenho (a altura e a duração da elevação submucosa) de vários SIMs com precisão.  A metodologia de instalação detalhadas desse novo modelo é explicada.

Um novo modelo Ex Vivo para a avaliação de desempenho de Material de injeção submucosa endoscópica

Aqui, apresentamos um modelo poderoso e fisiológico para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à secreção de hormônio do intestino e a absorção intestinal — intestino isolado perfundido de rato.

Os mecanismos subjacentes a secreção do hormônio Gut usando o isolado perfundido intestino de rato

Descrevemos protocolos para avaliar o grau de transdução por peptídeos penetrantes por células utilizando sistemas de imagem ex vivo seguidos de incorporação de parafina, secção e microscopia fluorescente confocal usando peptídeos cardíacos como exemplo. Em nosso protocolo, um único animal pode ser usado para adquirir ambos os tipos de avaliação de imagem dos mesmos órgãos, reduzindo o número de animais necessários para estudos pela metade.

In Vivo Imagem de Eficiências de Transdução de Peptídeo de Direcionamento Cardíaco

O ensaio de vazamento de fluorescência é um método simples que permite a investigação de interações peptídeo/membrana a fim de entender seu envolvimento em vários processos biológicos e, especialmente, a capacidade de peptídeos penetrantes de células para perturbar bicamadas de fósforo durante um processo de translocação celular direta.

Ensaio de vazamento fluorescente para investigar desestabilização da membrana por peptídeo penetrante de células

Função de barreira epitelial intestinal disregulada e respostas imunológicas são marcas de doença inflamatória intestinal que permanecem mal investigadas devido à falta de modelos fisiológicos. Aqui, descrevemos um modelo de alça intestinal de camundongos que emprega um segmento intestinal bem vascularizado e exteriorizado para estudar a permeabilidade mucosa e o recrutamento de leucócitos in vivo.

Avaliação Funcional da Permeabilidade Intestinal e Migração Transepitelial de Neutrófilo em Camundongos usando um Modelo de Laço Intestinal Padronizado

Métodos imunoquímicos estabelecidos para medir transmissores de peptídeos in vivo dependem de microdiálise ou desenho de fluido a granel para obter a amostra para análise offline. No entanto, estes sofrem de limitações espessotemporais. O presente protocolo descreve a fabricação e aplicação de um biosensor de imunoprobe capacitivo que supera as limitações das técnicas existentes.

Medição in vivo de neuropeptídeos por imunoprobe capacitivo no coração suíno

Este artigo descreve: (1) entrega oral por gavage de moléculas de teste para camundongos neonatais já no DOL 6; e (2) avaliação ex vivo da função da barreira epitelial do cólon em biópsias desde filhotes DOL 10 até desmame (DOL 20), avaliando a permeabilidade paracelular e transcelular com câmaras de Ussing.

Gavage Oral em Filhotes de Camundongos Neonatais e Avaliação Funcional da Integridade da Barreira Intestinal Usando Câmaras de Uso

Aprenda a avaliar a permeação de peptídeos através de mucosas orais suínas ex vivo usando células de difusão de Franz e inserções 3D. Este método padronizado identifica combinações otimizadas de potencializadores de permeação para formulações farmacêuticas bucais e sublinguais.

Um Modelo Padronizado Ex Vivo de Oromucosas Suínas para Avaliação de Fluxos de Peptídeos

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