Name: Janela de Crânio Opticamente Transparente Montada na Cabeça (HOTS) para Imagem Transcraniana Profunda do Córtex do Camundongo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Aprenda a técnica HOTS para imagem transcraniana profunda em camundongos acordados e livres. Este método permite visualização cortical até ~800 µm com microscopia de dois fótons, superando limitações de técnicas anteriores.

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	<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+intravital+imaging+of+cerebral+microinfarction+reveals+a+dynamic+astrocyte+reaction+leading+to+glial+scar+formation.">Longitudinal intravital imaging of cerebral microinfarction reveals a dynamic astrocyte reaction leading to glial scar formation.</a> Glia. 70 (5), 975-988 (2022).</li><li>Hierro-Bujalance, C., Bacskai, B. J., Garcia-Alloza, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+microglia+with+multiphoton+microscopy.">In vivo imaging of microglia with multiphoton microscopy.</a> Front Aging Neurosci. 10, 218 (2018).</li><li>Fan, J. L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+volumetric+two-photon+fluorescence+imaging+of+neurovascular+dynamics.">High-speed volumetric two-photon fluorescence imaging of neurovascular dynamics.</a> Nat Commun. 11 (1), 6020 (2020).</li><li>Fan, X., Zheng, W., Singh, D. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+scattering+and+surface+plasmons+on+small+spherical+particles.">Light scattering and surface plasmons on small spherical particles.</a> Light Sci Appl. 3 (6), e179 (2014).</li><li>Kneipp, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+murine+skull+in+optoacoustic+brain+microscopy.">Effects of the murine skull in optoacoustic brain microscopy.</a> J Biophotonics. 9 (1-2), 117-123 (2016).</li><li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term,+high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window.">Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li><li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull.">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat Methods. 7 (12), 981-984 (2010).</li><li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thinned-skull+cranial+window+technique+for+long-term+imaging+of+the+cortex+in+live+mice.">Thinned-skull cranial window technique for long-term imaging of the cortex in live mice.</a> Nat Protoc. 5 (2), 201-208 (2010).</li><li>Xu, H. T., Pan, F., Yang, G., Gan, W. B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+of+cranial+window+type+for+in+vivo+imaging+affects+dendritic+spine+turnover+in+the+cortex.">Choice of cranial window type for in vivo imaging affects dendritic spine turnover in the cortex.</a> Nat Neurosci. 10 (5), 549-551 (2007).</li><li>Roth, T. L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+amelioration+of+inflammation+and+cell+death+after+brain+injury.">Transcranial amelioration of inflammation and cell death after brain injury.</a> Nature. 505 (7482), 223-228 (2014).</li><li>Dorand, R. D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+intravital+thinned+skull+and+cranial+window+approaches+to+study+CNS+immunobiology+in+the+mouse+cortex.">Comparison of intravital thinned skull and cranial window approaches to study CNS immunobiology in the mouse cortex.</a> Intravital. 3 (2), e29728 (2014).</li><li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+large,+switchable+optical+clearing+skull+window+for+cerebrovascular+imaging.">A large, switchable optical clearing skull window for cerebrovascular imaging.</a> Theranostics. 8 (10), 2696-2708 (2018).</li><li>Zhao, Y. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skull+optical+clearing+window+for+in+vivo+imaging+of+the+mouse+cortex+at+synaptic+resolution.">Skull optical clearing window for in vivo imaging of the mouse cortex at synaptic resolution.</a> Light Sci Appl. 7, 17153 (2018).</li><li>Li, D. Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+through-intact-skull+(TIS)+chronic+window+technique+for+cortical+structure+and+function+observation+in+mice.">A through-intact-skull (TIS) chronic window technique for cortical structure and function observation in mice.</a> eLight. 2 (1), 15 (2022).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SeeThrough:+a+rationally+designed+skull+clearing+technique+for+in+vivo+brain+imaging.">SeeThrough: a rationally designed skull clearing technique for in vivo brain imaging.</a> Nat Commun. 16 (1), 7584 (2025).</li><li>Liu, L. N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+mouse+brain+imaging+facilitated+by+a+head-mounted+optically+transparent+skull+(HOTS)+window+allowing+offline+clearing.">Structural and functional mouse brain imaging facilitated by a head-mounted optically transparent skull (HOTS) window allowing offline clearing.</a> Optica. 12 (12), 1946-1960 (2025).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidimensional+dynamic+optical+imaging+unveils+anesthetic-driven+hemispheric+lateralization+in+blood-brain+barrier+homeostasis.">Multidimensional dynamic optical imaging unveils anesthetic-driven hemispheric lateralization in blood-brain barrier homeostasis.</a> Sci Adv. 11 (49), eady6275 (2025).</li><li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphiphilic+hemicyanine+molecular+probes+crossing+the+blood-brain+barrier+for+intracranial+optical+imaging+of+glioblastoma.">Amphiphilic hemicyanine molecular probes crossing the blood-brain barrier for intracranial optical imaging of glioblastoma.</a> Sci Adv. 11 (3), eadq5816 (2025).</li><li>Pang, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+monitoring+of+whole-brain+electrodynamics+via+high-spatiotemporal-resolution+photoacoustics+with+voltage-sensitive+dye.">Direct monitoring of whole-brain electrodynamics via high-spatiotemporal-resolution photoacoustics with voltage-sensitive dye.</a> Laser Photonics Rev. 18 (10), 2400165 (2024).</li><li>Paoletti, P., Ellis-Davies, G. C. R., Mourot, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+control+of+neuronal+ion+channels+and+receptors.">Optical control of neuronal ion channels and receptors.</a> Nat Rev Neurosci. 20 (9), 514-532 (2019).</li><li>Deisseroth, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetics:+10+years+of+microbial+opsins+in+neuroscience.">Optogenetics: 10 years of microbial opsins in neuroscience.</a> Nat Neurosci. 18 (9), 1213-1225 (2015).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL de pipeta descartável</td><td>Beijing Biotopped&nbsp; Ciência &nbsp; & Tecnologia&nbsp; Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cimento dentário</td><td>Shanghai Rongxiang Dental Materials Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>D-mannose</td><td>Macklin</td><td>D813082</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Aladdin</td><td>El 16428</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>RWD</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kwik-Cast</td><td>WPI</td><td>N/A</td><td>Um selante biocompatível</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Macklin</td><td>S832169</td><td></td></tr><tr><td>Autocura &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; odontologia&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Material macio do forro</td><td>Yangmahu Biotechnology (Hebi) Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital sódico</td><td>Biopike</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Aparelho estereotáxico</td><td>RWD</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Seringa descartável estéril</td><td>Minank</td><td>N/A</td><td>1 mL; Agulha 26 G</td></tr><tr><td>Sulfolano</td><td>Macklin</td><td>S817950</td><td></td></tr><tr><td>Ratos Thy1-GFP-M</td><td></td><td>N/A</td><td>Fornecido&nbsp; por Prof. Yang Zhan</td></tr><tr><td>Thyl-GCaMP6s&nbsp; ratos</td><td>Laboratório Jackson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Vetec</td><td>V900548</td><td></td></tr><tr><td>Objetivo de imersão na água &nbsp;</td><td>Nikon</td><td>N25X-APO-MP</td><td>25&times;/NA 1.1 objetivo&nbsp;</td></tr><tr><td>Objetivo de imersão na água &nbsp;</td><td>Nikon</td><td>N16XLWD-PF</td><td>16&times;/NA 0,8 objetivo&nbsp;</td></tr></tbody></table>

janela de crânio opticamente transparente montada na cabeça (hots) para imagem transcraniana profunda do córtex do camundongo

A Head-Mounted Optically Transparent Skull (HOTS) Window For Deep Transcranial Imaging of the Mouse Cortex

Janela de Crânio Opticamente Transparente Montada na Cabeça (HOTS) para Imagem Transcraniana Profunda do Córtex do Camundongo

High-resolution two-photon imaging of the adult mouse cerebral cortex is severely limited by light scattering from the skull, which attenuates signals and ...

Nossa pesquisa desenvolve um método de varredura transparente para imagem não invasiva do neocórtex, permitindo a visualização de longo prazo da estrutura e função cerebrais in vivo. Os métodos atuais de imagem do crânio são frequentemente invasivos e limitados a animais restritos. Nosso protocolo permite a imagem do crânio transparente em camundongos livremente móveis, melhorando a transparência e prolongando o tempo de observação.Para começar, prepare o cimento dental de acordo com as instruções do fabricante. Aplique uma camada fina do cimento sobre a superfície exposta do crânio e os tecidos circundantes do camundongo anestesiado para proporcionar proteção, deixando a área destinada à janela de exposição sem revestimento. Usando cimento dental, fixe uma pequena placa de titânio na cabeça ao crânio.Após a cura do cimento dental por cerca de cinco minutos, cubra-o com uma camada fina de revestimento dental macio autopolimerizável, excluindo a região da janela transparente, para criar um selo contínuo sobre o crânio. Em seguida, modele suavemente o material do revestimento dental macio autopolimerizável ao redor da margem planejada da janela de desobstrução, criando uma superfície

a-head-mounted-optically-transparent-skull-hots-window-for-deep

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Neurociência

Neste material de vídeo e suplementar, vamos mostrar um protocolo para a...

Imagem crônica de rato Visual Cortex usando uma preparação diluída crânio-

Nós apresentar um método para formar uma janela de imagem no crânio do rato que se estende por milímetro e é estável durante meses sem inflamação do cérebro. Este método é bem adequado para estudos longitudinais de fluxo de sangue, a dinâmica celular, e as células / estrutura vascular utilizando dois fotões microscopia.

A polido e reforçado Janela afinado crânio para longo prazo de imagens do cérebro de camundongo

Este vídeo apresenta um procedimento cirúrgico para implantar janela craniana em um modelo de camundongo para acesso óptico estável a diferentes regiões do cérebro.

Implantação de janela de imagem craniana em modelo de camundongo: um procedimento cirúrgico para implantar lamínula à base de vidro para acesso óptico estável a regiões do cérebro murino

Este vídeo demonstra a gravação da atividade neural do cérebro através de uma janela óptica em camundongos transgênicos. Os camundongos expressam uma proteína fluorescente que permite a detecção de atividades neurais. Uma pequena parte do crânio é cuidadosamente removida para instalar uma janela óptica, e o crânio é então coberto com cimento preto para bloquear a luz antes da imagem.

Instalação de janelas ópticas no cérebro de camundongos transgênicos para imagens de atividades neurais

Apresenta-se um método de criação de uma janela diluído crânio-cortical (TSCW) em um modelo de rato...

Diluído crânio-técnica de janela cortical para<em&gt; Em Vivo</em&gt; Tomografia de coerência óptica

Este manuscrito descreve um procedimento para controlar a remodelação do cerebrovasculature durante amyloid acúmulo de placa in vivo utilizando microscopia de dois fótons longitudinal. Uma preparação crânio-diluídos permite a visualização de corantes fluorescentes para avaliar a progressão do dano vascular cerebral num modelo de rato da doença de Alzheimer.

Longitudinal<em&gt; In Vivo</em&gt; Imagens do Cerebrovasculature: Relevância para doenças do SNC

Descrevemos um procedimento experimental para medir a atividade neuronal através de janelas ópticas duas acima bilateral corticies somatossensorial primária (S1) em Thy1-GCaMP6s de ratos transgênicos usando 2-fóton (2P) microscopia na vivo.

Imagem de atividade Neural no córtex somatossensorial primário usando Thy1-GCaMP6s de ratos transgênicos

Apresentado aqui é um protocolo para a implantação de uma janela craniana crônica para a imagem longitudinal de células cerebrais em camundongos acordados e com a cabeça.

Implantação de uma janela craniana para imagem repetida em vivo em ratos acordados

Aqui, descrevemos um protocolo combinando injeção de vírus adenoassociado com implante de janela craniana para obtenção simultânea de imagens da dinâmica microglial e atividade neuronal em camundongos acordados.

Imagem Simultânea da Dinâmica Microglial e Atividade Neuronal em Camundongos Acordados

O presente protocolo descreve a confecção de uma grande janela craniana (6 x 3 mm2) usando envoltório de alimentos, silicone transparente e vidro de cobertura. Esta janela craniana permite experiências de imagem de cálcio in vivo de campo largo e de dois fótons no mesmo rato.

In vivo Imagem de cálcio de campo amplo e de dois fótons de um rato usando uma grande janela craniana

Aprenda a técnica HOTS para imagem transcraniana profunda em camundongos acordados e livres. Este método permite visualização cortical até ~800 µm com microscopia de dois fótons, superando limitações de técnicas anteriores.

Janela de Crânio Opticamente Transparente Montada na Cabeça (HOTS) para Imagem Transcraniana Profunda do Córtex do Camundongo

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