Name: Isolamento e validação de subpopulações de células-tronco mesenquimais positivas para podoplanina usando uma estratégia indireta de esferas magnéticas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Aprenda a isolar subpopulações de células-tronco mesenquimais PDPN-positivas usando esferas magnéticas anti-PE com anticorpos marcados em PE. Este método indireto de baixo custo elimina a necessidade de classificadores de citometria de fluxo.

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<table><tbody><tr><td>7-AAD Cell Viability Assay Kit</td><td>KeyGEN</td><td>KGD1202-50</td><td></td></tr><tr><td>Anti-human CD32 Blocker (Fc gamma RII Blocker)</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>18520</td><td></td></tr><tr><td>Buffer</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>20104</td><td>Buffer</td></tr><tr><td>CCK-8</td><td>Meilunbio</td><td>MA0218-5</td><td></td></tr><tr><td>Dextran Magnetic Particles</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>50100</td><td>Magnetic Particles</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Gibco</td><td>16050-122</td><td></td></tr><tr><td>Magnet</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>18000</td><td>magnetic separation stand</td></tr><tr><td>MEM Alpha Medium</td><td>Gibco</td><td>C12571500BT</td><td>MEM Alpha Medium (82,5%) + FBS (16,5%) + Penicillin-Streptomycin (1,0%)</td></tr><tr><td>MSCs</td><td>KeyGEN</td><td>KGG5575-1</td><td>Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells</td></tr><tr><td>PE-conjugated Anti-Human PDPN Antibody</td><td>ABclonal</td><td>A26770</td><td>PDPN-PE</td></tr><tr><td>PE Selection Cocktail</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>18151</td><td>Selection Cocktail</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-072</td><td></td></tr></tbody></table>

isolamento e validação de subpopulações de células-tronco mesenquimais positivas para podoplanina usando uma estratégia indireta de esferas magnéticas

Isolation and Validation of Podoplanin-positive Mesenchymal Stem Cell Subpopulations Using an Indirect Magnetic Bead Strategy

Isolamento e validação de subpopulações de células-tronco mesenquimais positivas para podoplanina usando uma estratégia indireta de esferas magnéticas

The study of functional heterogeneity in mesenchymal stem cells relies on the efficient isolation of specific subpopulations (e.g., podoplanin ...

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JoVE Journal

Biology

Biologia

Rat CTMs foram isoladas do fémur ea tíbia e então enriquecida por separação de células magnéticas. Células classificadas foram confirmados para a expressão de marcadores de superfície por citometria de fluxo. Estas células também foram cultivadas na densidade clonal para formar colônias individuais e, em seguida essas colônias foram separados por cilindros de clonagem.

Isolamento e Enriquecimento de células-tronco mesenquimais Rat (MSC) e Separação de-colônia Único Derivado MSCs

Um método para analisar a distribuição de células progenitoras hematopoiéticas da medula óssea em citometria de fluxo, bem como para isolar eficazmente altamente purificados de células estaminais hematopoiéticas (HSCs) é descrito. O processo de isolamento é essencialmente baseado no enriquecimento de células magnética c-kit + e classificação celular para purificar HSCs para estudos celulares e moleculares.

Análise fenotípica e Isolamento de Células-Tronco Hematopoéticas Murino e Lineage comprometidos Progenitores

Este artigo descreve a preparação do tecido acabado de melanoma obtidas em culturas primárias de células, e como para remover contaminações de eritrócitos e fibroblastos a partir de células tumorais. Finalmente, descrevemos como...

Cultura de Células e Isolamento paciente Derivado de CD133<sup&gt; +</sup&gt; Células-tronco de câncer putativos Melanoma

As propriedades imunomoduladoras de células-tronco mesenquimais humanas (MSC) aparecem cada vez mais relevante para a aplicação clínica. Usando um sistema de co-cultura de MSCs e leucócitos do sangue periférico de pré-corados com o éster succinimidilo corante fluorescente carboxifluoresceína (CFSE), descreve-se a avaliação in vitro de MSC imunomodulação em proliferação e subpopulações efectoras de leucócitos específicos.

Avaliação das propriedades imunomoduladora de mesenquimais humanas Células-Tronco (MSCs)

tecido cardíaco humano abriga populações de células precursoras perivasculares multipotentes que podem ser adequados para a regeneração do miocárdio. A técnica aqui descrita permite o isolamento e purificação simultânea de duas populações de células estromais multipotentes associados com os vasos nativos de sangue, ie CD146 + CD34 - pericitos e células CD34 + CD146 - células adventícias, a partir do miocárdio humano.

Isolamento de perivascular Multipotentes populações de células precursoras a partir de tecido cardíaco humano

Este artigo apresenta um protocolo simples e económico para o simples isolamento e purificação de células-tronco mesenquimais do líquido sinovial do coelho branco Nova Zelândia.

Magnético-ativado da pilha classificação estratégias para isolar e purificar sinovial fluidos derivados mesenquimais células-tronco de um modelo de coelho

Este protocolo ilustra um procedimento seguro e eficiente para modificar CD133+ células-tronco hematopoiéticas. A apresentado não-virais, magnética polyplex abordagem pode fornecer uma base para a otimização dos efeitos terapêuticos células-tronco, bem como acompanhamento do produto celular administrado via ressonância magnética.

Protocolo para transferência de MicroRNA na medula óssea-derivado hematopoiéticas células-tronco adultas para habilitar celular engenharia combinada com alvo magnético

Demonstramos como identificar e isolar 6 subconjuntos de progenitores mieloides de murino medula óssea usando uma combinação de magnética e fluorescência classificação (MACS e FACS). Este protocolo pode ser usado para ensaios em vitro cultura (culturas metilcelulose ou líquido), na vivo experiências de transferência adotiva e análises de RNA/proteína.

Identificação e isolamento de oligopotentes e confirmada por linhagem mieloides progenitores da medula óssea de rato

Este protocolo descreve o uso da classificação de células mesenquimais humanas ativadas por fluorescência usando o método de triagem de célula única. Especificamente, o uso de triagem unicelular pode atingir 99% de pureza das células imunofenotipadas de uma população heterogênea quando combinado com uma abordagem multiparamétrica baseada em citometria de fluxo.

Triagem unicelular de células-tronco mesenquimais imunofenotipadas de dentes decíduos esfoliados humanos

Este estudo estabeleceu um método estável e eficiente para o isolamento, cultura e determinação funcional de células-tronco CD34+ residentes na parede vascular (CD34+ VW-SCs). Este método de isolamento fácil de seguir e eficaz em termos de tempo pode ser utilizado por outros investigadores para estudar os mecanismos potenciais envolvidos nas doenças cardiovasculares.

Isolamento imunomagnético das células-tronco CD34+ residentes na parede vascular de camundongos

Aprenda a isolar subpopulações de células-tronco mesenquimais PDPN-positivas usando esferas magnéticas anti-PE com anticorpos marcados em PE. Este método indireto de baixo custo elimina a necessidade de classificadores de citometria de fluxo.

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Isolamento e validação de subpopulações de células-tronco mesenquimais positivas para podoplanina usando uma estratégia indireta de esferas magnéticas

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