Name: Contagem e determinação da viabilidade das células em cultura (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-23T15:41:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: Aprenda a contar células em cultura e determinar sua viabilidade usando hemocitômetro e ensaio de azul de tripano. Este método padroniza experimentos de biologia celular com precisão.

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O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract" target="_blank">protocolos atuais em biologia celular</a> .

Os autores não têm nada a declarar.

contagem e determinação da viabilidade das células em cultura

Counting and Determining the Viability of Cultured Cells

Determinar o número de células em cultura é importante na normalização das condições de cultivo e na realização de experimentos de quantificação precisa. A hemocitômetro é uma lâmina de vidro grosso com uma zona central concebida como uma câmara de contagem. Suspensão de células é aplicado a uma área definida e contou para densidade das células pode ser calculada.

Determinar o número de células em cultura é importante na normalização das condições de cultivo e na realização de experimentos de quantificação precisa. Neste vídeo, demonstramos como as células são contadas usando um hemocitômetro.

Contagem e determinação da viabilidade das células em cultura

Determinar o número de células em cultura é importante para a padronização das condições de cultura e para a realização de experimentos de quantificação precisos. Um...

A determinação do número de células e do cultivo é importante para a padronização das condições de cultivo e ao realizar experimentos nos quais são necessários números precisos de células. Aqui, mostraremos como contar células utilizando um hemocitômetro e calcular a concentração de células presentes em suspensão. Também mostraremos como determinar o número de células viáveis presentes no seu cultivo com o ensaio de viabilidade com Azul de Tripano.Olá, sou o Ricky, do Laboratório do Dr. LAN, nas Instalações de Laboratórios de Patologia Molecular no Leste do Tennessee. Hoje vou mostrar como contar células em suspensão e como determinar sua viabilidade. Para preparar o hemocitômetro para a contagem de células, você deve primeiro limpar sua superfície e a lamínula correspondente com etanol a 70%.A lamínula e a lâmina devem estar limpas, secas e livres de fiapos, impressões digitais e marcas de água. Em seguida, umedeça levemente as bordas do hemocitômetro com água da torneira e pressione a lamínula sobre ele. A lamínula deve assentar-se uniformemente sobre a área prateada de contagem.Agora estamos prontos para a suspensão celular a fim de preparar a suspensão para contagem. Primeiro,

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Biologia

Conhecimento do número exato de células viáveis ​​é necessário para muitos manipulações cultura de tecidos. Este protocolo descreve como diferenciar entre células vivas e mortas e quantificar as células usando um hemocitômetro. Embora contando descreve-tronco neurais humanas / precursor células (hNSPCs), ele pode ser usado para outros tipos celulares.

Contando células-tronco neurais

O contador de células Scepter é um dispositivo portátil automático que pode ser usado para contagem de células, monitor de diâmetro celular e volume, e ser usado para verificar a saúde e qualidade de populações celulares de uma cultura para outra.

Determinação do Número celular durante Cultura Celular usando o contador de células Scepter

A aplicabilidade do ensaio clonogênica na avaliação de viabilidade reprodutiva foi estabelecida há mais de 50 anos. Aqui demonstramos o procedimento geral para a realização do teste clonogênica com células aderentes.

Clonogênica Ensaio: células aderentes

O Moxi Z miniatura contador de células automático é um novo instrumento que combina o princípio Coulter com a tecnologia de sensor patenteado de película fina e um algoritmo de software proprietário para executar dimensionamento e contagem de uma ampla gama de tamanho de partículas, bem como para determinar a saúde geral do monodispersos mamíferos culturas de células. Este protocolo descreve a utilização deste instrumento para contagem e avaliação da saúde das culturas de células.

Determinação da contagem de células de mamíferos, tamanho de célula e Saúde célula usando o Moxi Z Mini contador de células automatizado

Os compostos terapêuticos são muitas vezes primeiro analisou in vitro com ensaios de viabilidade. Contagem de células cegos por um observador humano pode ser altamente sensível a pequenas alterações no número de células, mas não avaliar a função. Ensaios de viabilidade computadorizados, como descrito aqui, pode avaliar a estrutura e função de uma forma objectiva.

Ensaios de viabilidade para células em cultura

Este protocolo descreve o uso de três métodos diferentes para analisar a proliferação celular em linhagens celulares de câncer de mama. Isso inclui o uso de contagem de células convencional, viabilidade celular baseada em luminescência e contagem de células por meio do uso de um gerador de imagens de células. Cada um oferece vantagens para a medição reprodutível da proliferação celular.

Comparação de três métodos diferentes de determinação da proliferação celular em linhas celulares de cancro da mama

Este artigo descreve a quantificação de hemocitômetro e micrografias de migração/invasão por meio de dois novos plug-ins ImageJ de código aberto: Cell Concentration Calculator e migration assay Counter.  Além disso, descreve os protocolos de aquisição e calibração de imagens, bem como discute em detalhes os requisitos de entrada dos plug-ins.

Automated Quantificação e análise dos procedimentos celular contagem utilizando ImageJ Plugins

Muitas vezes é necessário avaliar a citotoxicidade potencial de um conjunto de compostos em células cultivadas. Aqui, nós descrevemos uma estratégia para tela confiável para compostos tóxicos em um formato 96-well.

Uma estratégia para identificar compostos que afetam o crescimento celular e sobrevivência em células de mamíferos cultivadas em baixa a moderada taxa de transferência

Este protocolo fornece uma diretriz abrangente para a configuração e monitoramento quantitativo de co-culturas, incluindo cianobactérias secretoras de açúcar fotoautotróficas e leveduras heterotróficas.

Montagem e quantificação de coculturas combinando levedura heterotrófica com cianobactérias fototróficas secretoras de açúcar

Aqui, apresentamos um protocolo para quantificar a sobrevivência pós-estresse em amostras de leveduras. O ensaio emprega dois corantes fluorescentes, SYTO 9 e iodeto de propídio (PI), para quantificar a integridade da membrana plasmática. Ele usa citometria de fluxo para fornecer estimativas quantitativas e reprodutíveis das frações de células vivas, mortas e danificadas para amostras de estresse pós-oxidativo.

Um ensaio LIVE/DEAD otimizado acoplado à citometria de fluxo para quantificar a sobrevivência pós-estresse em células de levedura

Aprenda a contar células em cultura e determinar sua viabilidade usando hemocitômetro e ensaio de azul de tripano. Este método padroniza experimentos de biologia celular com precisão.

Contagem e determinação da viabilidade das células em cultura

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