Name: Congelamento, descongelamento e Células de embalagem para transporte (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-02T15:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Aprenda técnicas de congelamento e descongelamento de células mamíferas em cultura para biologia celular. Este método demonstra preservação de linhagens em nitrogênio líquido e recuperação viável.

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O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em <a class="jove_content" href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract">protocolos atuais em biologia celular.</a>

Os autores não têm nada a declarar.

congelamento, descongelamento e células de embalagem para transporte

Freezing, Thawing, and Packaging Cells for Transport

Cultura de células de mamíferos são amplamente utilizados em estudos de biologia celular. Ela exige uma série de habilidades especiais, a fim de ser capaz de preservar a estrutura, função, comportamento e biologia das células em cultura. Este vídeo descreve as habilidades básicas necessárias para congelar e armazenar as células e como recuperar estoques congelados.

Cultura de células de mamíferos são amplamente utilizados em estudos de biologia celular. Este vídeo descreve as habilidades básicas necessárias para congelar e armazenar as células e como recuperar estoques congelados.

Congelamento, descongelamento e Células de embalagem para transporte

Células mamíferas cultivadas são amplamente utilizadas em estudos de biologia celular. É necessário um conjunto de competências especiais para ser capaz de preservar a ...

Os cultivos celulares são utilizados em uma ampla variedade de aplicações de pesquisa e diagnóstico. Às vezes, é desejável armazenar linhagens celulares para trabalhos futuros, a fim de preservar as células, evitar a senescência, reduzir o risco de contaminação e minimizar os efeitos da deriva genética. As linhagens celulares podem ser congeladas para armazenamento de longo prazo.Neste vídeo, mostramos como congelar células cultivadas tanto em monocamada quanto em suspensão, e como descongê-las para crescimento novamente. Olá, sou Ricky, do laboratório do Dr. LAN, nas Instalações de Laboratórios de Patologia Molecular no Leste do Tennessee. Hoje vou mostrar como congelar células para armazenamento de longo prazo e como descongê-las do nitrogênio líquido.Para congelar células aderentes humanas, comece por destacá-las da placa como faria caso estivesse preparando-as para o congelamento. Lembre-se de que é melhor utilizar células na fase logarítmica de crescimento para criopreservação. Após as células terem se destacado e você ter interrompido a reação da tripsina adicionando soro ou meio contendo soro, transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga estéril e acrescente dois

freezing-thawing-and-packaging-cells-for-transport

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Aqui demonstramos como nosso laboratório congela MATIZ embrionárias humanas linhas de células estaminais.

Congelamento células ES

Desde que James Thomson et al desenvolveram uma técnica em 1998 para isolar e cultivar-tronco embrionárias humanas em cultura, as células de congelamento para uso posterior e descongelamento e expandir as células de um estoque de congelados tornaram-se procedimentos importantes realizados em cultura de rotina CTeh. Como as células-tronco embrionárias humanas são muito sensíveis ao estresse de congelamento e descongelamento, cuidados especiais devem tomadas. Aqui nós demonstrar a técnica...

Congelamento e descongelamento, células estaminais embrionárias humanas

Que vamos mostrar aqui como usar elétron cryotomography (ECT) para estudar a ultra-estrutura das células bacterianas em quase nativo estados, a "macromolecular" (~ 4 nm) resolução.

Electron Cryotomography de células bacterianas

Uma etileno glicol baseado em método de vitrificação para embriões de camundongos é descrito. É vantajoso para outros métodos, em sua simplicidade e toxicidade embrionária baixo e, portanto, pode ser amplamente aplicável a muitas cepas de camundongos, incluindo camundongos isogênicos e gene modificado.

Criopreservação de embriões de camundongos por Vitrificação Etileno Glicol-Based

Liofilização é muitas vezes uma forma fácil e conveniente de obter produtos secos de células bacterianas viáveis. Uma questão do processo é a sobrevivência da célula. Nós detalhe aqui um processo para investigar a forma como a sobrevivência das células durante a liofilização é influenciada pelas propriedades da formulação utilizada.

As formulações para liofilização de bactérias e sua influência na sobrevivência das células

Este manuscrito descreve um método fácil de usar e criofixação de baixo custo para a visualização de células em suspensão por meio de microscopia electrónica de transmissão.

Congelamento Plunge: Uma ferramenta para os estudos ultra-estruturais e de imunolocalização de células em suspensão em Microscopia Eletrônica de Transmissão

Linhas de células de Drosophila são importantes reagentes para investigação fundamental e biomédica. Este artigo fornece protocolos para descongelar, repicagem e a criopreservação de linhas de células de Drosophila comumente usadas para auxiliar pesquisadores em incorporar o uso destes reagentes em suas pesquisas.

Descongelamento, cultivo e Cryopreserving linhas de células de Drosophila

Aqui, é apresentado um protocolo descrevendo as etapas de preparação da amostra e coleta de dados necessárias na tomografia criobada de raios-X (SXT) para a imagem da ultraestrutura de células inteiras preservadas de crio-preservo em uma resolução de 25 nm meio passo.

Uma descrição cartográfica 3D da célula por crioma tomografia de raios-X suave

Aqui mostramos como usar o dispositivo de congelamento de sanduíches para congelamento rápido de espécimes biológicos, incluindo bactérias, leveduras, células cultivadas, células isoladas, tecidos animais e humanos e vírus. Também mostramos como preparar espécimes para seção ultrathin após congelamento rápido.

Congelamento rápido usando dispositivo de congelamento de sanduíches para boa preservação ultraestrutural de espécimes biológicos em microscopia eletrônica

Este protocolo de vídeo ilustra como realizar a tomografia por microscopia eletrônica de transmissão de varredura de espécimes virológicos. Para obter os melhores resultados, as amostras são preparadas por congelamento de alta pressão e subsequente substituição por congelamento.

Tomografia por Microscopia Eletrônica de Transmissão de Varredura em Virologia: Imagem 3D de Amostras Congeladas de Alta Pressão e Substituídas por Congelamento

Aprenda técnicas de congelamento e descongelamento de células mamíferas em cultura para biologia celular. Este método demonstra preservação de linhagens em nitrogênio líquido e recuperação viável.

Congelamento, descongelamento e Células de embalagem para transporte

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