Клеточное дыхание

КонцепцииПодготовка преподавателяПротокол студента
0 просмотров05:00 мин
Print Procedure Steps
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Количественная оценка дыхания с помощью микрореспирометров <кнопка class="expand">Expand<ul class="lab-items">
  2. ПРИМЕЧАНИЕ: В этом эксперименте вы будете измерять скорость клеточного дыхания для прорастающих семян, измеряя скорость обмена кислорода. Поскольку кислород расходуется для получения энергии, прорастающие семена выделяют углекислый газ. Этот углекислый газ поглощается карбонатом калия, и таким образом общее газообразное давление респирометра снижается. Гипотеза: Экспериментальная гипотеза заключается в том, что прорастающие семена будут демонстрировать большую скорость дыхания, чем контрольные стеклянные шарики. Кроме того, что при более высоких температурах скорость клеточного дыхания в семенах будет увеличиваться. Нулевая гипотеза состоит в том, что и стеклянные шарики, и прорастающие семена будут демонстрировать одинаковую скорость клеточного дыхания и что температура не оказывает никакого влияния на дыхание.
  3. Чтобы настроить управление, сначала извлеките поршень из подготовленного микрореспирометра и пометьте его "CR" или "CH" соответственно, в зависимости от того, является ли это температурой в комнате управления или термической обработкой.
  4. Добавьте стеклянные микрошарики в каждый из микрореспираторов до отметки 0,5 мл и нажмите на поршень в шприце до отметки 1 мл.
  5. Поместите 3-4 шайбы на расширенный конец каждого микрорепульсометра, чтобы утяжелить их во время пребывания на водяной бане. ПРИМЕЧАНИЕ: Микрореспирометр будет сидеть капиллярной трубкой концом вверх.
  6. Установите устройства управления в сторону.
  7. Чтобы установить экспериментальные сидячие респирометры, извлеките поршень из подготовленного микрореспирометра и пометьте его "ER" или "EH" соответственно, в зависимости от того, является ли это экспериментальной комнатной температурой или термической обработкой.
  8. Отмерьте 0,5 мл проращивающихся семян в туберкулиновом шприце микрореспирометра.
  9. Затем подтолкните шприц к отметке 1 мл.
  10. Поместите 3-4 шайбы на расширенный конец каждого микрорепульсометра, чтобы утяжелить их во время пребывания на водяной бане.
  11. Чтобы использовать микрореспирометры, осторожно опустите микрореспирометры "CR" и "ER" в водяную баню комнатной температуры. Весь шприц должен быть погружен в воду, но капиллярные трубки должны быть полностью открыты. Удаляйте воду из ванны до тех пор, пока не будет достигнуто это положение. Убедитесь, что верхняя часть капиллярной трубки открыта.
  12. Выполните ту же процедуру (шаг 9) для микрореспирометров "CH" и "EH", чтобы создать экспериментальную группу с более высокой температурой.
  13. Подождите 5 минут, прежде чем двигаться дальше, чтобы температура в микрореспирометрах выровнялась с водяной баней.
  14. Добавьте по одной капле жидкости для манометра в верхнюю часть каждой из четырех капиллярных трубок, которые герметизируют камеры микрореспирометра. ПРИМЕЧАНИЕ: Если камеры работают исправно, жидкость манометра будет всасываться в капиллярную камеру.
  15. Используйте вантуз, установленный в ванне, чтобы всасать жидкость манометра в капилляр. Остановитесь, когда жидкость окажется примерно на полпути вниз по капиллярной трубке. ВАЖНО: Микрореспирометры не следует тревожить после их добавления в ванну. Не ударяйте стол, не вставляйте и не вынимайте ничего из водяной бани или из нее после того, как камеры были запечатаны и выровнены.
  16. Отметьте нижний край жидкости манометра, который находится ближе к камере. Это представляет собой нулевую точку времени.
  17. Установите таймер на звук за 5 минут.
  18. Через 5 минут создайте новую отметку, где находится жидкость манометра на каждом микрореспирометре. Повторяйте каждые 5 минут до тех пор, пока не пройдет 25 минут или пока жидкость манометра не пройдет по всей длине капиллярной трубки.
  19. Затем извлеките респирометры из водяных бань.
  20. Измерьте расстояние между каждой из отметок и запишите их в таблицу 1 рядом с правильной точкой времени. Нажмите здесь, чтобы скачать таблицу 1
  21. Во время уборки манометры должны быть либо разобраны для повторного использования, либо выброшены в мусорное ведро.
  22. Результаты <кнопка class="expand">Expand
    • Чтобы проанализировать собранные данные, сначала нанесите на график точки данных с осью x как временем, а осью y как расстояние, на которое переместился манометр, представляя потребление кислорода.
    • Рассчитайте наклон каждой линии, используя это уравнение.
    • Запишите эти значения для каждого микрореспирометра в таблицу 2. ПРИМЕЧАНИЕ: Эта величина представляет собой объем клеточного дыхания, который имел место в ходе эксперимента. Нажмите здесь, чтобы скачать таблицу 2
    • Отобразите частоту дыхания в виде гистограммы.
    • Изучите оба графика. Подумайте, как ваши результаты согласуются с гипотезами. Обратите внимание на любые наблюдаемые различия в скорости дыхания между контрольными бусинами и прорастающими семенами. Определите, повлияло ли повышение температуры на частоту дыхания.

Browse More Videos

Cellular Respiration