Тонкослойная хроматография

Источник: Лара Аль Харири из Массачусетского университета в Амхерсте, штат Массачусетс, США

1. Подготовка решений<кнопка class="развернуть">Развернуть

   Здесь мы показываем лабораторную подготовку для 10 студентов, работающих в парах, с некоторым избытком. При необходимости отрегулируйте количество.

   • Прежде чем начать, наденьте лабораторный халат, защитные очки и нитриловые перчатки. Вы будете работать с гексаном, этанолом и этилацетатом, которые пропитывают тонкие нитриловые перчатки в течение нескольких минут, поэтому немедленно меняйте перчатки, если на них попал растворитель.
   • Приготовьте ~1 мг/мл растворов бутилфенилового эфира, фенола, бензойной кислоты, аспирина, кофеина и ацетаминофена. С помощью аналитических весов или микропипетки отмерьте приблизительно 10 мг или 10,7 мкл бутилфенилового эфира в стеклянном флаконе объемом 20 мл. заметка: Бутилфениловый эфир представляет собой жидкость при комнатной температуре, и его следует обрабатывать в вытяжном шкафу.
   • Отмерьте 10 мл этанола, добавьте его во флакон и пометьте как "1 мг/мл бутилфенилового эфира в этаноле".
   • Приготовьте остальные пять растворов, начиная с фенола. Налейте стеклянный флакон объемом 20 мл и отмерьте в него 10 мг фенола.
   • Затем добавьте 10 мл этанола в флакон и перемешайте смесь стеклянным стержнем, пока фенол полностью не растворится.
   • Закройте флакон крышкой и пометьте его как "1 мг/мл фенола в этаноле". Повторите этот процесс для приготовления растворов бензойной кислоты, аспирина, кофеина и ацетаминофена с концентрацией 1 мг/мл. Храните флаконы в вытяжке инструктора или на общем рабочем месте.
   • Приготовьте три неизвестных раствора коммерчески доступных анальгетиков в этаноле. Состав таблеток может различаться, поэтому вы можете заранее взвесить таблетки, чтобы оценить весовой процент активных ингредиентов.
   • Используйте маленькую ступку и пестик, чтобы измельчить таблетку ацетаминофена в порошок. Отмерьте 10–15 мг порошка в стеклянный флакон объемом 20 мл.
   • Затем добавьте 10 мл абсолютного этанола во флакон и перемешивайте смесь чистым стеклянным стержнем в течение 1-3 минут. Ничего страшного, если на дне флакона останется некоторое количество твердого вещества.
   • Закройте флакон крышкой и пометьте его как "Unknown 1". Выбросьте оставшийся порошок и тщательно очистите и высушите ступку и пестик.
   • Используйте 10 – 15 мг измельченной таблетки аспирина для приготовления раствора unknown 2 и 30 – 40 мг измельченной таблетки, содержащей смесь ацетаминофена, аспирина и кофеина, чтобы приготовить раствор unknown 3 таким же образом. Храните неизвестные решения вместе с известными решениями.
   • Приготовьте смеси растворителей, которые студенты будут использовать в качестве элюентов. Приготовьте 100 мл смеси из 60% гексана и 40% этилацетата. Отмерьте 60 мл гексана и налейте его в стакан объемом 250 или 400 мл. Добавьте 40 мл этилацетата и перемешайте смесь до тех пор, пока она не станет однородной.
   • Пометьте флакон объемом 150 мл "60% гексан, 40% этилацетат (v/v)" и используйте воронку для переноса раствора. Закройте бутылку крышкой, прежде чем отставить ее в сторону.
   • Приготовьте 100 мл смеси 90% этилацетата и 10% гексана. Отмерьте 10 мл гексана и налейте его в стакан объемом 250 или 400 мл. Затем добавьте 90 мл этилацетата и хорошо перемешайте смесь.
   • Пометьте флакон объемом 150 мл как "90% этилацетата, 10% гексана (v/v)". Переложите смесь в бутылку и плотно закройте крышкой. Храните растворители и смеси растворителей в шкафу для легковоспламеняющихся веществ.
2. Подготовка лаборатории<кнопка class="развернуть">Развернуть
   • Подготовьте или получите контейнеры для отходов для стекла, йода и негалогенированных органических отходов. Убедитесь, что в каждой лабораторной раковине есть запас бумажных полотенец.
   • Подключите и протестируйте маленькую ультрафиолетовую лампу с длиной волны 254 нм в общей зоне.
   • Установите конфорку в центральном вытяжном шкафу, обозначьте стакан объемом 500 мл "йодная камера" и поместите примерно 1-2 г йода в стакан. Накройте его большим стеклом для часов и установите на конфорку.
   • Установите следующую стеклянную посуду и оборудование на каждой студенческой лабораторной станции (мы рекомендуем студентам работать в парах):

     3 стеклянные банки объемом 50 мл с завинчивающейся крышкой

     3 градуированных цилиндра объемом 10 мл

     1 карандаш

     1 Ручка для маркировки

     1 Пинцет

     1 Маленькая линейка с метрическими приращениями

   • Пометьте флакон объемом 150 мл как '100% гексан', налейте около 100 мл гексана в бутылку и плотно закройте ее крышкой. Уберите стоковую бутылку с гексаном и поместите смеси гексана и этилацетата в колпак для растворителя вместе с бутылкой с чистым гексаном.
   • Расположите шесть известных решений и три неизвестных решения на общем столе.
   • Разместите рядом контейнеры с одноразовыми стеклянными капиллярами, фильтровальной бумагой среднего размера и пластинами TLC.
   • В начале лабораторной работы случайным образом назначьте неизвестное соединение каждой группе учеников.
   • Как только некоторые ученики пройдут примерно половину первого развития, нагрейте йод до 110 °C на конфорке.
   • После лабораторной работы дайте стакану остыть и утилизируйте отходы йода соответствующим образом.