Изучение цитоскелета

Ученые изучают динамическую и статическую природу цитоскелета с помощью различных микроскопических и биохимических методов.

Механические свойства цитоскелетных нитей можно определить с помощью атомно-силовой микроскопии или АСМ.

АСМ использует наноразмерные наконечники для натягивания обоих концов цитоскелетных филаментов для определения их прочности на разрыв. Промежуточные нити растягиваются в три с половиной раза по сравнению со стандартной длиной, прежде чем разорваться на две части, что говорит о том, что они более удлиняемы, чем другие.

Флуоресцентная микроскопия используется для изучения взаимодействий между белками, связанными с цитоскелетом, и филаментами.

Например, кинезиновые моторные белки, идущие по микротрубочкам, могут быть визуализированы с помощью кинезина, меченного GFP, и микротрубочек, меченных флуоресцентными красителями.

Чтобы визуализировать полимеризацию F-актина, очищенные мономера G-актина мечут флуоресцентным красителем и микроинъектируют в живую клетку, где меченые субъединицы полимеризуются в актиновые филаменты.

Флуоресценция, обнаруженная с помощью микроскопа, в дальнейшем позволяет локализовать эти нити внутри клетки.