32.3: Клеточные линии

Клеточная линия — это популяция клеток, выращенных in vitro, которые могут быть субкультивированы в течение нескольких поколений. Нормальные клетки перестают делиться после определенного количества делений клеток, этот процесс известен как репликативное старение. Это число, названное пределом Хейфлика, было концептуализировано Леонардом Хейфликом в 1961 году, когда он заметил, что клетки плода, выращенные в культуре, могут делиться только 40-60 раз. Этот предел обусловлен укорочением теломер во время каждого раунда деления клетки, что предотвращает деление клеток за пределами недостаточной длины теломер. Сверхэкспрессия фермента теломеразы предотвращает укорочение теломер и является одним из методов получения бессмертных клеточных линий.

Типы клеточных линий

Первичные клеточные линии, полученные непосредственно из тканей животных, сохраняют приближенные генотипические и фенотипические характеристики клеток своего происхождения. Например, клеточная линия легких человека BEAS2B и клеточная линия сетчатки RPE1 имеют близкое к норме количество 46 хромосом. Напротив, клеточные линии, полученные из раковых клеток, могут размножаться бесконечно долго и называются трансформированными клеточными линиями. Эти клеточные линии демонстрируют дополнительные атрибуты, такие как независимость якоря и отсутствие ингибирования контакта. Трансформированные клеточные линии также часто имеют измененное количество хромосом. Например, клеточные линии SW480 и A549 могут иметь до 56 и 66 хромосом соответственно.

Валидация клеточных линий

Клеточные линии подвержены геномной нестабильности и перекрестному загрязнению в лаборатории. Поэтому очень важно регулярно проверять их. Такие методы, как спектральное кариотипирование, помогают идентифицировать числовые и структурные хромосомные аберрации и обнаруживать перекрестное загрязнение. Клеточные линии также могут быть проверены на молекулярном уровне с помощью STR-профилирования — метода, используемого для анализа количества коротких тандемных повторов (STR) в ДНК, которые уникальны для каждой клеточной линии.