Иммуноферментный анализ (ELISA)

Иммуноферментный анализ или ИФА — это меченый иммуноферментный анализ, который широко применяется для обнаружения и количественного определения аналитов, таких как антитела, пептиды, гликопротеины, гормоны и вирусы.

Антитела к обнаружению, которые связываются с антигеном или молекулой-мишенью, конъюгированы со специфическими ферментами, которые при добавлении субстрата производят измеримые сигналы.

В зависимости от методов захвата и обнаружения, существует четыре основных типа ИФА.

В прямом ИФА используется первичный фермент-конъюгированный антитело для обнаружения образца антигена, покрытого пластиной.

В то время как для непрямого ИФА прикрепленный антиген захватывает образец первичного антитела, с которым связывается конъюгированное вторичное антитело.

Сэндвич-ИФА включает в себя два антитела, одно из которых покрывается на планшете для захвата образца антигена, в то время как другое конъюгированное с ферментом антитело связывается со специфическим антигеном-эпитопом, образующим сэндвич.

При конкурентном ИФА антиген и первичное антитело предварительно инкубируют и добавляют в пластину, покрытую тем же антигеном.

Чем выше концентрация антигена в образце, тем больше образуется комплексов антиген-антитело, в результате чего остается меньше свободных антител для связывания с конкурирующим антигеном из пластины, что приводит к более слабым сигналам.