Методическая статья

Ортотопическая аорты трансплантации: Крыса модель для изучения развития хронического заболевания сосудов

DOI:

10.3791/1989

⸱

4 декабря 2010 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1University Heart Center Hamburg, Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab (TSI), University Hospital Hamburg, 2Stanford University School of Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это видео демонстрирует модели ортотопической трансплантации аортального как простая модель для изучения развития трансплантации васкулопатии (TVP) у крыс.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Исследование модели хронического отторжения имеют важное значение для расследования патобиологические и патофизиологических процессов при развитии трансплантации васкулопатии (TVP).

Обычно используется животной модели развития сердечно-сосудистых исследований хронического отторжения гетеротопической модель трансплантации сердца прошла в лабораторных грызунов. Эта модель широко используется в экспериментах с Оно и Линдси (3) опубликовал свою технику. Для анализа результатов в кровеносных сосудах, сердце должно быть секционного и все суда должны быть измерены.

Другой метод для исследования хронического отторжения при сердечно-сосудистых опросов является пересадка аортального модели (1, 2). В модели ортотопической трансплантации аорты, аорта может быть легко гистологически оценивается (2). PVG к ACI модель особенно полезна для CAV исследования, так как острой сосудистой отказ не основной сбивающий фактор и Циклоспорин (CSA) лечение не предотвращает развитие CAV, подобное тому, что мы находим в клинических условиях (4 ). A7-дневный период CsA требуется в этой модели для предотвращения острого отторжения и добиться выживания в долгосрочной перспективе с развитием TVP.

Эта модель также может быть использован для исследования острого отторжения и сотовые средства массовой информации некроза в ксеногенных моделей (5).

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Крысы весом около 250-300г закупаются у Charles River (Sandhofer Weg 7, Д-97633 Sulzfeld).
Трансплантация выполняются с помощью PVG крыс в качестве доноров, и ACI крыс в качестве получателей.

Крысы размещаются в обычных условиях, кормили стандартной крыс кормом и водой объявление libidum.

Все хирургические инструменты стерилизуются перед использованием.

Донор подготовки:

Обезболить крысы с изофлуран (2,5-3%) с помощью индукции камеры.

  1. Бритье брюшной и грудной волосы и место крысу на спину и положите маску на нос и рот, чтобы не отставать анестезии.
  2. Лечить брюшной и грудной области широко используя Прово-йод, следующего использования 80% этанола, повторите этот шаг в три раза.
  3. Проверить рефлексы щипать задние ноги, чтобы быть уверенным, что крысы достаточно anesthesized.
  4. Обескровить крысы, открыв живот и резки отверстий в брюшной аорты.
  5. Аккуратно откройте грудной клетки, чтобы найти нисходящей грудной аорты.
  6. Рассеките грудной аорты от окружающих тканей, как жир, нервы и пищевода.
  7. Вывод 1,5 см кусок аорты использованием couter, без повреждения ткани аорты.
  8. Заливать аорты трансплантат полностью с холодным стерильным физиологическим раствором и хранят трансплантата при 4 ° C.

Получатель:

Обезболить крысы с изофлуран (2,5-3%) с помощью индукции камеры. Температура тела сохраняется во время хирургической операции.

  1. Бритье области живота и применять глазную мазь, чтобы предотвратить глаз от высыхания во время анестезии.
  2. Место крысу на спину и положите маску на нос и рот, чтобы не отставать анестезии.
  3. Лечить брюшной области с помощью Прово-йод, следующего использования 80% этанола, повторите этот шаг в три раза.
  4. Проверить рефлексы щипать задние ноги, чтобы быть уверенным, что крысы достаточно anesthesized.
  5. Выполните средней линии разреза брюшной полости разделения кожи и мышц в два этапа, чтобы открыть живот.
  6. Место в кишечнике нагревается солевой увлажненной неопудренные перчатки. Сложите перчатка вокруг кишечника, чтобы предотвратить потерю влаги.
  7. Удалить жировой ткани, покрывающей брюшную аорту.
  8. Рассеките аорты форме инфраренального региона к развилке, осторожны, чтобы не причинить ущерб отрасли судов.
  9. При необходимости перевязывать ветви аорты.
  10. Первое использование микрохирургической зажим на инфраренального части расчлененного аорты, чтобы остановить поток крови.
  11. Далее, поместите второй зажим вблизи бифуркации аорты.
  12. Теперь, когда поток крови останавливается, удалите короткий сегмент аорты.
  13. Возьмите трансплантата донором аорты, которая хранится в 0,9% стерильного физиологического раствора на льду, сократите ее до надлежащей длины и поместите его в зазоре.
  14. Подключите доноров аорты получателю аорты, выполняя работы швы использованием 8-0 проленовой шва (Ethicon, Нордерштедт, Германия). Начните с черепно из конца в конец анастомоза.
  15. Когда дистального конца в конец анастомоза закончен, осторожно откройте дистальных зажимом.
  16. При отсутствии кровотечения после открытия дистальных зажим, осторожно откройте черепных зажимом. В случае кровотечения в швы, рядом зажим снова, найдите кровотечения и остановить кровотечение, используя одну стежка.
  17. Там должно быть видимым импульса на дистального конца аорты.
  18. Следующий шаг назад кишечника в брюшную полость.
  19. Флеш живота с нагретого стерильного физиологического раствора.
  20. Закрыть мышечного слоя брюшной стенки использованием 6-0 проленовой работает швов (Ethicon, Нордерштедт, Германия).
  21. Используйте 5-0 проленовой (Ethicon, Нордерштедт, Германия), работающих швы, чтобы закрыть кожи.
  22. Хотя крысы все еще находится в анестезии, вводят 4-5mg/kg Carprofen подкожно.
  23. Для обеспечения достаточного обезболивания для этого типа процедуры, метамизол добавляется к питьевой воде (50 мг на 100 мл Метамизол) болеутоляющее средство в течение 3 дней после трансплантации.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

По ряду причин мы нашли модель ортотопической трансплантации аорты более точный способ исследовать развитие TVP по сравнению с моделью гетеротопической трансплантации сердца:
Что касается хирургической техники, аорты модель трансплантации воплощает легко осуществимый метод, требующий исключительно достижением конца в конец-анастомоза, в то время как модель гетеротопической пересадке сердца можно считать более сложной и подверженной ошибкам вызов навыков хирурга с , требуя конца в сторону анастомоза на двух основн...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы благодарят Кристиана Pahrmann ее гистологических работ.

Финансирование

Соня Schrepfer получил грант от Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 и SCHR992/4-1).]

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Хирургический микроскоп (увеличение 25x)
Изофлуран
шейвер
Повидон-йод
ледяной 0.9% физиологический раствор
предварительно подогретый 0.9% стерильный физиологический раствор
глазная мазь
перчатки
микрохирургические ножницы
пинцет
зажимы
шовный материал 8-0 (пролен)
шовный материал 6-0 (пролен)
шовный материал 5-0 (пролен)
Карпрофен
Метамизол
ватные палочки

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778. Transplantation. 85, 870-877 (2008).
  2. Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).
  3. Ono, K., Lindsey, E. S. Improved technique of heart transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).
  4. Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model. Circulation. 100, 67-100 (1999).
  5. Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy. J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

PVG ACI

Похожие статьи