дрозофила Анализ нор и туннелирования: метод оценки гипоксии тканей у личинок мух

Abstract

Источник: Qiang, K. M., et al. Анализ на закапывание/туннелирование для обнаружения гипоксии у личинок Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018).

Это видео показывает метод проверки гипоксии у личинок дрозофилы путем оценки их способностей к закапыванию и туннелированию. Используя этот метод, исследователи могут отличить личинок, испытывающих кислородное голодание, от личинок с дефицитом развития. В примере протокола показана настройка для этого анализа.

Protocol

Этот протокол представляет собой выдержку из Qiang et al., A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018).

1. Подготовка личинок

1. За два или более дней до начала анализа в чашках для откладывания яиц в соответствии с описанием Вишауса и Нуссляйн-Фольхарда в полипропиленовых стаканах объемом 50 мл и одноразовых чашках Петри диаметром 6,0 см, содержащих виноградный агар и смазанных дрожжевой пастой, непосредственно перед использованием. Держите мух в посуде для откладывания яиц в темноте при комнатной температуре до тех пор, пок....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Реагентов
Обезвоженные дрожжи
Замороженный концентрат виноградного сока	У Уэлча		Доступно в большинстве крупных супермаркетов
Ледяная уксусная кислота	Сигма-Олдрич	320099
Дрозофила агар	Продукты Apex Bioresearch	66-103
Метилпара-гидроксибензоат	Продукты Apex Bioresearch	20-658
оборудование
Полипропиленовые стаканы 50 мл
Одноразовые чашки Петри 6,0 см	сокол	08757100Б
10 см одноразовые пластиковые чашки Петри	E+K Scientific	ЭК-24104
Пластиковые микрошпатели	Корнинг Инкорпорейтед	3012
Изогнутая дразнящая игла	Наско	S08848MH
Препарирующий микроскоп			Любой микроскоп с 10-30-кратным увеличением