Тест на кормление: оценка пищевых предпочтений у Drosophila melanogaster

Аннотация

Источник: Bovier, T. F., et al. Методы тестирования эндокринных нарушений у Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео описывает анализ кормления плодовых мушек, в котором используется окрашенная пища для мониторинга кормления и влияния добавленных соединений на пищевую активность. В примере протокола проверяется воздействие нескольких химических веществ, разрушающих эндокринную систему (EDC).

Протокол

Этот протокол является выдержкой из Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Питательный анализ

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот анализ рекомендуется для проверки того, может ли присутствие выбранного EDC в среде повлиять на питание мух.

1. Поместите 15 молодых мух во флаконы, содержащие среду из кукурузной муки (КМ) с добавлением различных концентраций выбранного EDC и красящего корма. Дайте мухам питаться средой в течение 1 суток.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Например, используйте красный краситель No 40 (1 мг/мл).
2. Поместите 15 молодых мух во флаконы, содержащие КМ с добавлением только растворителя и красящий корм для контроля. Дайте мухам питаться средой в течение 1 суток.
3. Обезболивайте индивидуально каждую группу мух эфиром.
   1. Переложите мух каждой группы в цилиндрический стеклянный контейнер (эфиризатор) с воронкой, вставленной в открытый конец, перевернув флакон над воронкой и осторожно постучав по двум контейнерам друг о друга, чтобы мухи упали в эфиризатор.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Воронка не даст им выйти из эфиризатора.
   2. Сбивайте мухи вниз, осторожно постукивая эфирайзером по мягкой поверхности, например, коврику для мыши, и быстро замените воронку на пропитанную эфиром ватную и марлевую пробку.
   3. Подождите около 1 минуты, пока мухи не упадут на дно и не перестанут двигаться.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Не превышайте время, иначе мухи погибнут.
4. Поместите обездвиженных мух под стереомикроскоп и сравните окраску брюшной полости каждой группы лечения по отношению к контрольной группе.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
17α-этинилэстрадиол	сигма	Е4876-1Г
Агар для дрозофилы средний	БИОСИГМА	789148
Бисфенол А	сигма	239658-50Г
Бисфенол AF	сигма	90477-100МГ
Кукурузной муки	CA' BIANCA
Диэтиловый эфир	сигма
Флаконы с дрозофилами	БИОСИГМА	789008	25 мм x 95 мм
Флаконы с дрозофилами	БИОСИГМА	789009	29 мм x 95 мм
Флаконы с дрозофилами	Калтек	187	22 мм x 63 мм
этанол	ФЛЮКА	2860
Эфиризатор	Ремесла		цилиндрическая стеклянная емкость с ватной пробкой
Ручной блендер Pimmy	Ариете		кухонный комбайн
Дрожжи Instant Success	ЭСКА		Порошкообразные дрожжи
Красный краситель No 40	сигма	16035
Стереомикроскоп со светодиодной подсветкой	Лейка		С4Е

г.