Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
4.9K просмотров
⸱
30 апреля 2023 г.
Источник: Reimels, T. A. and Pfleger, C. M. Методы исследования лимфатических желез и гемоцитов у личинок дрозофилы. J. Vis. Exp. (2016).
Это видео описывает лимфатическую железу дрозофилы — основной участок кроветворения у личинки мухи — и показывает пример протокола препарирования и монтирования органа для иммуногистохимии и флуоресцентной визуализации.
Этот протокол является выдержкой из Reimels and Pfleger, Methods to Examination the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016).
1. Иммуногистохимия лимфатических желез личинок
ПРИМЕЧАНИЕ: Лимфатическая железа расположена примерно на одну треть длины от переднего конца личинки немного ниже мозга на дорсальной стороне. (См. стрелку в Рисунок 1B.) Лимфатическая железа фланкирует дорсальный сосуд и легче всего рассекается, прикрепляясь к ротовым крючкам или к мозгу. Лимфатические узлы дикого типа, тре....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Рисунок 1: Меланизация кристаллических клеток in vivo. А) Личинки помещали по отдельности в ПЦР-пробирки перед нагреванием. Красными стрелками обозначены личинки, которых нет на дне трубок. Б) Типичный рисунок меланизации кристаллических клеток после нагревания, который иногда обнажает лимфатическую железу (стрелка; показана дорсальная сторона, передняя слева). Масштабная линейк.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Таблетки PBS | MP Biomedicals | 2810305 | |
| Тарелка для препарирования | Корнинг | 7220-85 | |
| Микроцентрифужная трубка | Денвилл | С2170 | |
| силиконовая губка для препарирования, изготовленная из набора Sylgard 184 | Krayden (распространяется через Fisher) | NC9644388 (каталожный номер Фишера) | Изготовлен в чашке Петри путем смешивания компонентов комплекта эластомеров Sylgard в соответствии с инструкциями производителя. |
| Стереомикроскоп | Morrell Instruments (дистрибьютор Nikon) | МНА42000, ММА36300 | Модели Nikon SMZ1000 и SMZ645 |
| Салфетка | ВВР | 82003-820 | |
| щипцы | Науки электронной микроскопии | 72700-ДЗ | |
| Пипетка P200 | Эппендорф | 3120000054 | |
| формальдегид | рыбак | БП531-500 | |
| тритон | рыбак | БП151-500 | |
| Подросток 20 | рыбак | БП337-500 | |
| Бычий сывороточный альбумин | Биологические препараты Скалистых гор | БСА-БСХ-01К | |
| Нормальная козья сыворотка | сигма | Г9023-10МЛ | |
| Нормальная ослиная сыворотка | сигма | Д9663-10МЛ | |
| Этанол 200 пробы | ВВР | В1001 | |
| N-пропилгаллат | MP Biomedicals | 102747 | |
| глицерин | ВВР | ЭМ-4750 | |
| DAPI (4',6-диамидино-2-фенилиндол) | рыбак | No 62248 | |
| Крышка микроскопа, круглая 18 мм | рыбак | Тел.: 12-545-100 | |
| предметные стекла для микроскопа | рыбак | Тел.: 22-034-980 | |
| 24-луночный планшет | Корнинг | 351147 | |
| одноразовая переводная пипетка | рыбак | 13-711-9УТРА | |
| флуоресцентный микроскоп | Цейсс | Процессор Axio Imager.Z1 |
