Методическая статья

дрозофила Сбор яиц и дехорионация: метод удаления внешнего слоя яиц

30 апреля 2023 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Koyle, M. L., et al. Выращивание плодовой мухи Drosophila melanogaster в аксенических и гнотобиотических условиях. J. Vis. Exp. (2016).

Эмбрион дрозофилы окружен защитными внешними мембранами. Чтобы получить доступ к эмбриону, часто удаляют хорион – самую внешнюю из оболочек. В этом видео описан часто используемый метод дехорионации с использованием гипохлорита натрия. В примере протокола показана процедура с использованием стерильных методов, необходимых для выращивания животных аксеническими или гнотобиотическими препаратами.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол является выдержкой из Koyle et al., Raising the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic Conditions, J. Vis. Exp.(2016).

1. Подготовьте клетки для откладывания яиц

  1. Приготовьте пластины для агара из виноградного сока, разогрев в микроволновой печи 100 мл воды, 10 г пивных дрожжей, 10 г глюкозы и 1 г агара. Доведите до кипения 3 раза на шаге 1.1 и добавьте 10 г замороженного концентрата виноградного сока для повышения видимости яиц на агаровой пластине.
  2. Когда агар остынет до 55 °C, налейте 20 мл в 100 мм чашки Петри и дайте застыть.
  3. Поверхность агар....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Пивные дрожжиМП Биомедикалс, ООО.903312http://www.mpbio.com/product.php?pid=02903312
глюкозаСигма Олдрич158968-3КГhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/158968?lang=en®ion=US
агарФишер--Лаборатория Научнаяфлай802010https://www.fishersci.com/shop/products/drosophila-agar-8-100mesh-10kg/nc9349177
100% концентрат виноградного сока Welch'sWalmart или другой продуктовый магазин9116196http://www.walmart.com/ip/Welch-s-Frozen-100-Grape-Juice-Concentrate-11.5-oz/10804406
Клетка: полупрозрачный круглый контейнер для деликатесов на 32 унцииМагазин Webstaurant999Л5032Иhttp://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-sd5032y-32-oz-translucent-round-deli-container-24-pack/999L5032Y.html
Полупрозрачная круглая крышка контейнера для деликатесовМагазин Webstaurant999ИНЛ500http://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-ynl500-translucent-round-deli-container-lid-60-pack/999YNL500.html
Стоковые бутылкиДженеси Сайентиал32-130https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=32-130
Дрозо-заглушкиДженеси Сайентиал49-101https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=49-101
Нейлоновая сеткаДженеси Сайентиал57-102https://geneseesci.com/shop-online/product-details/715/?product=57-102
Пластиковая втулкаХоум Депо100404002http://www.homedepot.com/p/Carlon-1-in-Non-Metallic-Terminal-Adapter-E943FR-CTN/100404002
Пластиковая втулка колпачкаХоум Депо100153897http://www.homedepot.com/p/1-1-4- в-жестком-пластике-изолированной-втулке-2-упаковке-27529/100153897
Чашка для образцовПартнеры MedSupplyК01-207067http://www.medsupplypartners.com/covidien-specimen-containers.html
Репитер M4Эппендорф4982000322https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Manual-Liquid-Handling-44563/Dispensers--Burettes-44566/Repeater-M4-PF-44619.html
Центрифужные пробирки 50 млЦентрифужные пробирки TrueLineТР2003https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=TR2003
Коробки с едойСША Сайентифик2316-5001 (Английскийhttp://www.usascientific.com/search.aspx?find=2316-5001
Лизирующая матрица D BulkМП Биомедикалс, ООО.116540434http://www.mpbio.com/search.php?q=6540-434&s=Search
Наконечники для дозатора с фильтром, 300 μлСША Сайентифик1120-9810 (Английский)http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1120-9810
Чашки ПетриПродажа лабораторной продукцииM089303https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=M089303
этанолDecon Laboratories, INC.2701http://www.deconlabs.com/products.php?ID=88
кистьWalmart5133http://www.walmart.com/ip/Chenille-Kraft-5133-Acrylic-Handled-Brush-Set-Assorted-Sizes-colors-8-Brushes-set/41446005
щипцырыбак08-882 (Английскийhttps://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-medium-pointed-forceps-3/p-128693
Бытовой отбеливатель (6-8% гипохлорита)Walmart550646751http://www.walmart.com/ip/Clorox-Concentrated-Regular-Bleach-121-fl-oz/21618295
Универсальный пептонДженеси Сайентиал20-260https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=20-260
Дрожжевой экстракт Научный центр ФишераБП1422-500https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-bioreagents-microbiology-media-additives-yeast-extract-3/bp1422500?matchedCatNo=BP1422500
ДикалийфосфатСигма ОлдричП3786-1КГhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Цитрат аммонияСигма Олдрич25102-500гhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Ацетат натрияВВР97061-994https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=97061-994
Сульфат магнияНаучный центр ФишераМ63-500https://www.fishersci.com/shop/products/magnesium-sulfate-heptahydrate-crystalline-certified-acs-fisher-chemical-3/m63500?matchedCatNo=M63500
Сульфат марганцаСигма Олдрич10034-96-5 (Английскийhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Порошок MRSСигма Олдрич69966-500Гhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/69966?lang=en®ion=US
96 Считыватель пластин для скважинBioTek (Эпоха)NAhttp://www.biotek.com/products/microplate_detection/
Центрифужные пробирки 1,7 млСША Сайентифик1615-5500http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1615-5500
Наконечники для пипеток с фильтром, 1 000 μлСША Сайентифик1122-1830http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1122-1830
Планшеты на 96 лунокGreiner Bio-One655101https://shop.gbo.com/en/usa/articles/
Керамические бусиныМП Биомедикалс, ООО.6540-434http://www.mpbio.com/product.php?pid=116540434
Тканевый гомогенизаторМП Биомедикалс, ООО.116004500http://www.mpbio.com/product.php?pid=116004500
Шкаф биобезопасности класса 1Термо СайентиалМодель 1395http://www.thermoscientific.com/en/product/1300-series-class-ii-type-a2-biological-safety-cabinet-packages.html
) г. ) ) гг. гг.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи