С. elegans Экструзия гонад: техника быстрого рассечения

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Gervaise, A. L. and Arur, S. Пространственный и временной анализ активного ERK в зародышевой линии C. elegans. J. Vis. Exp. (2016).

Это видео описывает метод препарирования гонад у взрослых гермафродитов C. elegans, в результате чего получаются ткани, пригодные для иммуноокрашивания и флуоресцентной визуализации.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол представляет собой отрывок из Gervaise and Arur, Пространственный и временной анализ активного ERK в зародышевой линии C. elegans. J. Vis. Exp.(2016).

1. Вскрытие взрослых червей для получения гонад

Выберите 100 - 150 WT (N2) или желаемый генотип червей на желаемой и специфической стадии развития (L1, L2, L3, L4, взрослые особи и т.д.) в 100 мкл буфера M9 в микроцентрифужной пробирке объемом 1,5 мл.
Заполните микроцентрифужную пробирку 900 мкл буф....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя

Компания

Каталожный номер

Комментарии

Стеклянная тарелка для часов с плоским дном

Агар Сайентифик

AGL4161

Мы используем стекло, потому что рассеченные гонады часто прилипают к пластику

Иглы 25 г

BD PrecisionGlide

305122

Шприцы (могут быть 1 или 5 мл)

Шприцы BD

1 мл: BD 309659

Предметные стекла для микроскопа (25 x 75 x 1,0 мм)

Фишербранд

Тел.: 12-550-343

Клиническая настольная центрифуга

*Решение M9

Левамизол

сигма

Л9756

*Рецепт буфера M9

3 г KH2PO4, 6 г Na2HPO4, 5 г NaCl, 1 мл 1 М MgSO4, H2O до 1 л.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение