Caenorhabditis elegans (нематода)

В этом видео мы показываем метод создания синхронизированной по развитию популяции стерильных взрослых C. elegans. Пример протокола синхронизирует червей для изучения уровня потребления кислорода живыми животными.

В этом видео описывается метод быстрого скрининга одной нематоды на генетический маркер с помощью ПЦР-скрининга. В примере протокола мы проводим скрининг на редактирование генома на основе CRISPR.

Это видео описывает традиционный метод измерения продолжительности жизни C. elegans с помощью пластин. В примере протокола измеряется продолжительность жизни червей, обработанных РНК-интерференцией.

C. elegans при откладывании яиц может предоставить важную информацию в исследованиях развития, репродуктивной и анатомической деятельности. Это видео знакомит с важными этапами анализа яйцекладки и показывает эксперимент с образцом эксперимента, в котором лекарство проверяется на репродуктивную токсичность.

В этом видео описывается микроинъекция, распространенный метод создания трансгенных штаммов C. elegans. В примере мы увидим, как микроинъекция используется для введения комплекса рибонуклеопротеинов (RNP) для редактирования генов на основе CRISPR.

Это видео описывает замораживание-растрескивание, метод, позволяющий сделать ткани C. elegans доступными для окрашивания антителами путем разрушения кутикулы.

Во время визуализации C. elegans в реальном времени, можно использовать агарозную прокладку, чтобы удерживать нематоду неподвижно, не повреждая и не высушивая ее. Это видео описывает, как подготовить простую монтажную прокладку для микроскопии.

Это видео знакомит с концепциями, лежащими в основе визуализации кальция, и включает в себя пример протокола для покадровой визуализации червей, содержащихся в формованных агарозных лунках.

Здесь мы вводим анализ для измерения SWIP, поведенческого фенотипа C. elegans, который возникает во время энергичных движений, таких как плавание. В примере протокола обсуждаются как ручные, так и автоматизированные подходы к анализу.

Это видео знакомит с анализом привыкания к прикосновениям, поведенческим методом C. elegans для оценки механоощущения и количественной оценки времени до привыкания.

Это видео знакомит с хемотаксисом у нематоды C. elegans и показывает протокол примера, проверяющий хемотаксическое отвращение к сульфату меди.

Исследователи могут вызвать движение по требованию у C. elegans, применяя электрическое поле, которое черви ощущают и на которое реагируют. Это видео знакомит с электротактическим поведением и показывает протокол выборки, который выполняется в микрофлюидном устройстве.

В этом видео описывается использование программного обеспечения для видео и слежения для записи движения червей на арене. Пример протокола измеряет влияние воздействия этанола на локомоцию червей.

Это видео описывает метод препарирования гонад у взрослых гермафродитов C. elegans, в результате чего получаются ткани, пригодные для иммуноокрашивания и флуоресцентной визуализации.

Это видео представляет краткосрочный анализ выживаемости, который проверяет лечение на острую токсичность или проверяет генетический штамм на устойчивость к токсическому состоянию. Пример протокола показывает пример теста на выживаемость, в котором черви проверяются на их способность противостоять окислительному стрессу, вызванному паракватом (PQ).

C. elegans имеют два типа мышц: одиночный саркомер и множественный саркомер, или поперечно-полосатые мышцы. Это видео описывает расположение поперечно-полосатых мышц стенки тела, которые отвечают за передвижение червя, и включает в себя образец протокола для измерения морфологии мышц с помощью программного обеспечения для анализа изображений.

Это видео знакомит с методом лазерного ранения, который используется для нанесения очень точных повреждений эпидермиса червя. Пример протокола основан на исследовании реакции и заживления раны.

В этом видео представлен метод визуализации и измерения целостности просвета кишечника C. elegans путем кормления червей декстраном, меченным FITC. Пример протокола показывает анализ, проведенный с червями, обработанными 3,3'-дииндолилметаном (DIM) и откормленными патогенами.

Это видео описывает протокол окрашивания липидов целых неподвижных червей с помощью красителя Nile Red. Чтобы конкретно рассмотреть нейтральные липиды в ядре липидных капель, визуализируйте зеленые спектры излучения окрашенных C. elegans.

Это видео описывает метод диссоциации целых червей в одноклеточную суспензию, подходящую для FACS или иммунопреципитации интактных клеток.

Здесь мы описываем метод, используемый для визуализации геномной ДНК у неподвижных, неповрежденных нематод. Видео включает в себя пример протокола подсчета хроматина в неоплодотворенных яйцеклетках C. elegans.

В этом видео представлен метод выделения бластомеров C. elegans из ранних эмбрионов. Полученные клетки пригодны для культивирования клеток или экспериментов ex vivo.

Это видео знакомит с методом выделения и стерильного культивирования эмбриональных клеток C. elegans in vitro.

Это видео описывает принципы лечения РНК-интерференцией у C. elegans и демонстрирует протокол подавления lin-35 в трансгенном штамме червей.

РНК-интерференция - это мощный генетический инструмент, доступный исследователям C. elegans. В этом видео представлен метод лечения большего числа червей с помощью РНК-интерференции, чем при кормлении планшетами, с использованием жидких условий культивирования.

Нематоды могут быть легко размножены в лаборатории-- отчасти потому, что гермафродиты могут размножаться путем самооплодотворения. Однако, генетические скрещивания и другие эксперименты могут потребовать большого количества самцов. Это видео описывает метод обогащения для самцов C. elegans.

Микроинъекция трансгенов обычно приводит к получению штаммов C. elegans с большими внехромосомными массивами, что приводит к переменной экспрессии и передаче трансгена. УФ-излучение может индуцировать хромосомную интеграцию массива и более стабильную трансгенную передачу.