Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Фиксация этанола и окрашивание DAPI: метод визуализации ДНК у C. elegans

7.7K просмотров

30 апреля 2023 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Кларк, Э. К., и др. Манипуляция плоидией у Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2018).

Здесь мы описываем метод, используемый для визуализации геномной ДНК у неподвижных, неповрежденных нематод. Видео включает в себя пример протокола подсчета хроматина в неоплодотворенных яйцеклетках C. elegans.

Протокол

Этот протокол представляет собой выдержку из Clarke et al., Манипуляция плоидией у Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018).

Тетраплоидные штаммы можно проверить, подсчитав количество хромосом в их неоплодотворенных ооцитах. Флуоресцентная микроскопия может быть использована для скрининга количества пар хромосом в неоплодотворенных диплоидных ооцитах (до мейотического деления), если штамм имеет флуоресцентный маркер для хромосом. В отсутствие флуоресцентных хромосомных маркеров тетраплоидные нематоды могут быть обсле....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Препарирующий микроскопМотическая микроскопияSMZ171
ИмякомпанияКаталожный номерКомментарии
Окрашивание
Hoechst 33258, PentahydrateБиотиум40045
DAPIБиотиум40011
ИмякомпанияКаталожный номерКомментарии
Фиксация этанола
Этанол, чистый, 190 Proof (95%), USPKoptec, VWR89125-166
ИмякомпанияКаталожный номерКомментарии
M9 Буфер
Хлорид натрия, биотехнологический классВВР97061-278
Фосфат калия, одноосновной безводный сортВВР97062-346
Фосфат натрия, одноосновной дигидратНаучный центр ФишераAC271750025

Теги

Флуоресцентная микроскопияподсчет хроматинаанализ ооцитовтетраплоидные штаммыпары сестринских хроматидантифейдинговый консервантзаклеивание покровного стекла