дрозофила Анализ на агрессию: метод проверки поведенческой пластичности у мух

Аннотация

Источник: Trannoy, S., et al. Новый подход, который устраняет необходимость в изучении агрессии и эффекта "неудачника" у Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2015).

Агрессия - это врожденное поведение, и предыдущий боевой опыт влияет на стратегию боя и исход последующих состязаний у мух. В этом видео описывается анализ, используемый для изучения агрессивного поведения дрозофилы. В примере протокола показан анализ, проводимый в условиях, исключающих контакт с мухами и, следовательно, снижающий стресс для животных, который в противном случае повлиял бы на производительность испытуемых.

Протокол

Этот протокол является выдержкой из Trannoy et al., A New Approach that Elimination Handling for Study Activity and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. Поведенческий эксперимент

1. Проводите поведенческие эксперименты с самцами мух в возрасте 6-7 дней.
2. В каждую боевую камеру вставьте пластиковые разделители.
3. Извлеките ватную пробку из изолирующей трубки и поместите трубку ниже открытого отверстия сбоку аппарата.
4. Позвольте мухе войти в боевую камеру с помощью отрицательного геотаксиса, обычно в течение нескольких секунд.
5. Закройте скользящую стенку после того, как муха покинула трубку и вошла в камеру.
6. Повторите процедуру по введению второй мухи в боевую камеру с другой стороны аппарата.
7. Установите аппарат обратно в положение для видеосъемки с подсветкой.
8. Начните видеосъемку и снимите пластиковую перегородку, чтобы мухи могли взаимодействовать.
   1. Для экспериментов с агрессией:
      1. В этих экспериментах следует записывать бои в течение не менее 20 минут, чтобы обеспечить формирование прочных отношений доминирования.
      2. По истечении нужного времени остановите запись видео.
      3. Удалите мух из боевых камер, провернув описанную выше процедуру.
      4. Тщательно промойте поведенческий аппарат мягким моющим средством и водой после каждого использования и прополощите.
   2. Для экспериментов с эффектом "Проигравший":
      ПРИМЕЧАНИЕ: В этих экспериментах первые бои рассматриваются как фаза подготовки, а вторые бои — как тестовая фаза. Период отдыха между боями может быть разным, но 10 минут позволяют сформировать сильный эффект «проигравшего».
      1. Следуйте описанной выше процедуре для проведения первого боя.
      2. КРИТИЧЕСКИЙ ШАГ: Чтобы вызвать формирование менталитета «неудачника», убедитесь, что первые бои длятся не менее 20 минут, чтобы установить прочные отношения доминирования. Через 20 минут снова вставьте пластиковый разделитель в боевые камеры, чтобы отделить мух.
      3. После 10-минутного отдыха аккуратно снимите пластиковую перегородку, чтобы мухи могли взаимодействовать для вторых боев.
      4. По окончании второго 20-минутного боя остановите видеосъемку.
      5. Удалите мух из поведенческих камер, как указано выше.
      6. Еще раз тщательно очистите поведенческий аппарат.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Поведенческие камеры	Машина Майка		Изготовлен на собственном производстве. Свяжитесь напрямую с компанией для получения дополнительной информации.
Флаконы из боросиликатного стекла	VWR Интернэшнл	47729-576	16 x 10 мм
хлопок	Фишербранд	Тел.: 22-456-881	Можно использовать любую марку
Трубка с колпачком Srew	VWR Интернэшнл	10011-394	Диаметр 15 мм, высота 10 мм
Пластиковые ломтики	Науки электронной микроскопии	70329-40	22 x 40 x 0,25 мм Толщина
Источник света (лампочка)	VWR Интернэшнл	500003-418	Можно использовать любую марку
таймер	VWR Интернэшнл	Тел.: 62344-641	Можно использовать любую марку
бинокулярный	Компания Nikon	СМЗ-745	Можно использовать любую марку
Камера (SONY Handycam HDR-CX330)	БиГ	SOHDRCX330B	Можно использовать любую марку