Анализ температурного градиента: метод проверки температурных предпочтений у личинок дрозофил

Abstract

Источник: Liu, J., et al. Анализ температурного градиента для определения тепловых предпочтений личинок дрозофилы. J. Vis. Exp. (2018).

Плодовые мушки дрозофилы могут различать небольшие изменения температуры и поэтому выбирают среду с благоприятными тепловыми условиями. В этом видео описывается поведенческий анализ, который проверяет температурные предпочтения личинок дрозофилы по линейному тепловому градиенту.

Protocol

Этот протокол представляет собой отрывок из Liu et al. Анализ температурного градиента для определения тепловых предпочтений личинок дрозофилы, J. Vis. Exp. (2018).

1. Настройка температурного градиента

1. Подготовка однонаправленного градиента
   1. Чтобы создать влажную окружающую среду во время анализов, поместите два алюминиевых блока, соединенных двумя водяными банями, на влажные бумажные полотенца, разделенные 10 см (Рисунок 1A).
   2. Включите две водяные бани за ~2 часа до начала анализа, чтобы дать достаточно времени для выравнивания темпе....

Results

Рисунок 1: Установки однонаправленного и двунаправленного градиентного анализа. (A) Установка с однонаправленным градиентом с двумя алюминиевыми пробными пластинами на двух алюминиевых блоках. Температура алюминиевых блоков контролируется циркуляцией воды из двух водяных бань. (B) Расположение трех алюминиевых блоков, водяных бань и алюминиевой пластины (250 x 220 мм) для двунаправленног.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Аппарат для градиентного анализа
PolyScience 9106, Охлаждающая/обогреваемая циркуляционная ванна 6 л	Томас Сайенти	9106	Данная модель снята с производства. К обновленным моделям на замену относятся: 1186R00 и 1197U04 для 120 В, 60 Гц, или 1184L08 и 1197U04 для 240 В, 50 Гц.
Алюминиевая пробная пластина (для однонаправленного градиента)			Внешний размер: 14 x 10,1 x 0,9 см, внутренний размер: 12,9 x 8,7 x 0,8 см, черный анодированный.
Алюминиевая пластина (для двунаправленного градиента)			25 x 22 x 0,2 см, черный анодированный.
Алюминиевый блок			Внешний размер: 25,5 х 5 х 1,4 см, параметры внутренних каналов показаны на рисунке 1D.
Соединитель для алюминиевых блоков и трубок	Макмастер-Карр	91355К82
Гигиенические силиконовые трубки Tygon	Тайгон	No 57296	Внутренний диаметр 1/4 дюйма x внешний диаметр 3/8 дюйма x стена 1/16 дюйма
имя	компания	Каталожный номер	Комментарии
Изделия и реактивы для анализа
пестик	США Сайентифик	17361	Пестик для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5 мл
термометр	счастливая случайность	51II
термопара	счастливая случайность	Тип K
Универсальная крышка для микропланшетов	Корнинг	6980А77
Тарелка 35 мм	Корнинг	9380Д40
Маркировочная лента (для двунаправленного градиента)	Научный центр Фишера	15-951	Этикетировочная лента Fisherbrand 2 дюйма x 14 ярдов
агароза	Инвитроген	16500500	Приготовьте 1% раствор
сахароза	сигма	С0389-5КГ	Приготовьте 18% раствор непосредственно перед началом анализа
малярная кисть	Научный центр Фишера	11860
Центрифужные пробирки объемом 50 мл	Денвилл	С1062-
Скупула	Научный центр Фишера	14-357К
Круглый флакон с широким горлышком 500 мл	пирекс	1395-500
Сетчатое фильтр для ячеек (поры 300 мм)	Плюри Селект	43-50300	Дополнительный пункт для мытья личинок
Картонная коробка (лоток для флаконов)	Дженеси Сайентиал	ФС32-124