Method Article

С. elegans Рассечение бластомеров: метод удаления яичной скорлупы и диссоциации эмбриональных клеток

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Hsu, C. R., et al. in vitro восстановление пространственных контактных схем клеток с изолированными бластомерами эмбрионов Caenorhabditis elegans и адгезивными полистирольными шариками.J. Vis. Exp.(2019).

В этом видео представлен метод выделения бластомеров C. elegans из ранних эмбрионов. Полученные клетки пригодны для культивирования клеток или экспериментов ex vivo.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол представляет собой выдержку из Hsu et al, In Vitro Recreating of Spatial Cell Contact Patterns with Isolated Caenorhabditis elegans Embryo Blastomeres and Adhesive Polystyrene Beads, J. Vis. Exp.(2019).

  1. Выделение бластомера эмбриона
  2. Наденьте перчатки и лабораторный халат, чтобы избежать порезов и контакта с отбеливающим раствором.
    1. Придерживайте каждый конец микрокапилляра (емкость; 10 мкл) правой и левой рукой.
    2. Потяните микрокапилляр ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Аспираторная трубка в сбореDrummondДля выделения бластомеров.
Caenorhabditis elegans: N2, дикий типЦентр генетики канорхабдитаN2Штамм, использованный в данном исследовании
Caenorhabditis elegans штамм: KSG5, генотип: zuIs45; itIs37в домеКСГ5Штамм, использованный в данном исследовании
Калиброванный микропипетец, 10 μлДраммонд21-180-13Для выделения бластомеров
CD липидный концентратТехнологии Life11905031Для выделения бластомеров. Работа в вытяжке для культуры тканей.
CloroxКлороксН. А.Для выделения бластомеров. Откройте новую бутылку, когда обработка гипохлоритом не работает должным образом.
Держатель защитного стеклаВ домеН.А.Для выделения бластомеров.
Препарирующий микроскоп: Zeiss Stemi 508 со стойкой M. Источником света является встроенный светодиод. Увеличение окуляра составляет 10X.Карл ЦейссStemi 508Для выделения бластомеров.
Фетальная сыворотка крупного рогатого скота, квалифицированный один выстрел, происхождение из КанадыGibcoA3160701Для выделения бластомеров. Работа в вытяжке для культуры тканей.
Иглы для подкожных инъекций общего назначения и прецизионного скольжения, 25 калибрБД14-826ААДля выделения бластомеров
ИнулинАльфа АэсарAAA1842509Для выделения бластомеров
Витаминный раствор MEM (100x)Gibco11120052Для выделения бластомеров.
Multitest Slide 10 лунокMP BiomedicalsICN6041805Для выделения бластомеров
Пенициллин-стрептомицин (10 000 ЕД/мл)Gibco15140148Для выделения бластомеров.
ПоливинилпирролидонБиореагенты ФишераБП431-100Для выделения бластомеров
хлорид калияБиошопПК888Для выделения бластомеров
Schneider's Drosophila Sterile MediumGibco21720024Для выделения бластомеров. Работа в вытяжке для культуры тканей.
Хлорид натрияБиошопСОД001Для выделения бластомеров
раствор гидроксида натрия, 10 НФишер КемикалСС255-1Для выделения бластомеров
Шприцевые фильтры, ПТФЭ, нестерильныеБазикс13100115Для выделения бластомеров.
Tygon S3 Лабораторная трубка,, рецептура E-3603, внутренний диаметр 3.175 ммSaint Gobain Performance Plastics89403-862Для выделения бластомеров.
Tygon S3 Лабораторная трубка,, рецептура E-3603, внутренний диаметр 6,35 ммSaint Gobain Performance Plastics89403-854Для выделения бластомеров.
<тр > <-т >21-180-13 <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > » <тр > <тр > <тр > <тр > <тр > <тр >

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

C elegans BlastomeresEggshell RemovalMicropipette DissectionEmbryo DissociationHypochlorite SolutionShelton s Growth MediumHand Pulled CapillariesTwo Cell StageCell Isolation TechniqueEmbryonic Cell Culture

Related Articles