Методическая статья

Забор костного мозга из задних конечностей мышей

9 февраля 2026 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Zhu, Y. P., Padgett, et al. Получение цельного костного мозга для анализа масс-цитометрии клеток линии нейтрофилов. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео описывает подробный протокол выделения свежего цельного костного мозга из задних конечностей мыши для исследования целых дефектов КМ у пациентов с заболеваниями крови, такими как лейкемия.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Сбор урожая мышиного костного мозга (BM)

  1. Приобретите мыши C57BL/6J у коммерческого поставщика. Кормите вас стандартным рационом для грызунов и размещайте в микроизоляторах в помещении, свободном от патогенов.
  2. Используйте мышей-самцов в возрасте 6-10 недель в экспериментальных целях. Эвтаназия путем ингаляцииСО2 с последующим вывихом шейки матки.
  3. Поместите мышь на стерильную хирургическую подушечку животной стороной вверх. Простерилизовать кожу в области живота и задних конечностей путем распыления 70% этанола. С помощью препарных хирургических ножниц для разрезания брюшной полости вскройте брюшную полость.
  4. Снимите кожу, чтобы обнажить задние конечности. С помощью повязочных щипцов с тупым концом удерживайте большеберцовую кость мыши прямо ниже лодыжки. Используйте еще одну пару изогнутых перевязочных щипцов, чтобы стабилизировать большеберцовую кость ниже тупых перевязочных щипцов. Сломайте большеберцовую кость и обнажите кость, оторвав мышцу тупыми перевязочными щипцами.
    заметка: Большеберцовая кость слабо прикреплена к коленному суставу и может быть легко выделена с помощью перевязочных щипцов с тупым концом.
  5. Поместите большеберцовую кость в холод 1x PBS.
  6. Далее переместите стабилизирующие изогнутые перевязочные щипцы вниз к бедренной кости. Сдвиньте тупые перевязочные щипцы ниже коленного сустава и удерживайте коленную чашечку. Вывихните коленную чашечку, аккуратно потянув ее вверх. Обнажите бедренную кость, оторвав мышцу, прикрепленную к коленной чашечке. Удерживайте обнаженную бедренную кость изогнутыми перевязочными щипцами и отрежьте бедренную кость от нижней части кости с помощью рассекающих хирургических ножниц.
  7. Поместите бедренную кость в холодный 1x PBS.
  8. Проделайте отверстие в микроцентрифужной пробирке объемом 0,5 мл иглой 18 G.
  9. Поместите большеберцовую и бедренную кости в одну и ту же микроцентрифужную пробирку объемом 0,5 мл открытым концом костей вниз к отверстию.
  10. Поместите пробирку объемом 0,5 мл, содержащую большеберцовую и бедренную кости, в микроцентрифужную пробирку объемом 1,7 мл.
  11. Вращайте двухслойные пробирки, содержащие большеберцовую и бедренную кости, при давлении 5 510 x g в течение 30 с в микроцентрифуге.
  12. Убедитесь, что БМ извлечен из костей и гранулирован на дне пробирки. Перемешайте пробирку объемом 0,5 мл с освященными костями. Мышь BM готова к следующим шагам.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Мышь: C57BL/6JЛаборатория ДжексонаБиржевой No: 000664
ГиКлон Фосфат Буферизованный физиологический растворGE Медико-биологические наукиКат#SH30256.01

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

PBS

Похожие статьи