Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Поддержание Wolbachia в бесклеточных среднего

10.1K просмотров

DOI:

10.3791/223

4 июля 2007 г.

В этой статье

Краткое содержание

Это видео описывает способ очистки Wolbachia pipientis из клеточной линии Anopheles gambiae, а затем культивирования эндосимбионта в бесклеточной среде. Тест для жизнеспособности бактерии продемонстрировал.

Аннотация

В этом видео-протокол, процедуры показаны на (1) очищают Wolbachia симбионтов из культивируемых клеток комаров, (2) использования флуоресцентного анализа выяснить жизнеспособность очищенной Wolbachia и (3) поддерживать сейчас внеклеточной Wolbachia в клеточной среде без . Очищенная Wolbachia остаться в живых во внеклеточной фазе, но не размножаются, пока снова инокулировали в эукариотических клетках. Внеклеточный Wolbachia очищенная таким образом, будут оставаться жизнеспособными в течение по крайней мере неделю при комнатной температуре, а возможно и больше. Очищенная Wolbachia подходят для микро-инъекции, выделения ДНК и других приложений.

Раскрытие информации

Авторы не имеют конфликтов интересов, подлежащих раскрытию.

Перепечатки и разрешения

Теги

Очистка Wolbachiaлизис стеклянными шарикамидифференциальное центрифугированиеэтапы фильтрациианализ жизнеспособности бактерийокрашивание живых и мертвых клетоквысокоскоростное центрифугированиенизкоскоростное центрифугированиеподдержание бесклеточной средысреда Шнайдера для насекомых