Гетеротопическая трансплантации сердца у мышей

Краткое содержание

Мышь гетеротопической модель трансплантации сердца была доказана многими исследователями важным методом изучения механизмов отторжения и иммунного ответа. Тем не менее, методы участвуют все еще сложной. Изменяя стандартные методы, которые мы имели успех с более чем 1000 трансплантатов.

Аннотация

Мышь гетеротопической трансплантации сердца широко используется, поскольку она была введена доктором. Корри и Рассел в 1973 году. Это особенно ценно для изучения отторжения и иммунный ответ теперь, что новые трансгенные и мышей гена нокаутом доступны, и большое число иммунологических реагентов были разработаны. Модель пересадке сердца является менее строгим, чем модели пересадке кожи, хотя технически более сложным. Мы разработали модифицированную технику и выполнили более 1000 успешных случаев гетеротопической трансплантации сердца у мышей. При принятии анастомоз восходящей аорты и брюшной аорты, два швов пребывания помещены в проксимальных и дистальных вершины получателя брюшной аорты с восходящей аорты с донорами, то с помощью 11-0 шва для анастомоза по обе стороны от аорты с продолжением швов. Пребывание швов делают анастомоз проще и 11-0 имеет идеальный размер шва, чтобы избежать кровотечения и тромбоз.

При принятии анастомоз легочной артерии и нижней полой вены, два швов пребывания принимаются на вершине проксимальных и дистальных вершине нижней полой вены с получателем с легочной артерии с донорами. Левой стене нижнюю полую вену и легочную артерию донора с закрыта с продолжением швы с внутренней стороны нижней полой вены после того, один узел с проксимальных пребывания вершине шва правой стенки нижней полой вены и легочной артерии с донорами закрыты с продолжением швов снаружи нижней полой пещере с 10-0 швов. Этот метод проще, поскольку для выполнения анастомоза производится только на одной стороне нижней полой вены и 10-0 швов нужного размера, чтобы избежать кровотечения и тромбоз. В этой статье мы представить подробную информацию о технике в дополнение к видео.

Протокол

Подготовка донора и сердце Урожай:

1. Мышь анестезией с внутрибрюшинного введения фенобарбитала и помещены на спине на операционном поле.
2. Долго средней линии брюшной надрез. Брюшной содержание отказался марлей налево, чтобы разоблачить брюшной аорты и нижней полой вены.
3. 1 мл гепарина (10u/ml) вводится в нижней полой вены для гепаринизация.
4. Торакотомия производится: ребра делятся по обе стороны позвоночника и передней стенки груди заемными до подвергать сердце.
5. Нижней полой вены, верхней полой вены и непарный вены лигировали с 6-0 шелка и разделен выше лигатуры.
6. Восходящей аорты и легочной артерии разделяются и разделен насколько дистально насколько это возможно.
7. Легочной вены перевязаны и разделить дистальнее связей.
8. Сердце озарен 4 С ^о физиологический раствор.
9. Сердце хранится в лед холодный раствор раствором.

Получатель Подготовка и трансплантации

1. Мышь анестезией с внутрибрюшинного введения фенобарбитала и помещены на спине на операционном поле.
2. Долго средней линии брюшной надрез. Брюшной содержимое убираются вне брюшной полости марлей, чтобы разоблачить брюшной аорты и нижней полой вены.
3. Ветвей брюшной аорты и нижней полой вены подвергаются и лигировали с 10-0 швов.
4. Проксимальной и дистальной лигатуры расположены вокруг аорты и нижней полой вены, соответственно.
5. Венотомия выполнен в нижней полой вены реципиента с 30 иглы. Открытие затем распространяется на длину равную легочной аорты донора с микро-ножниц.
6. Aortotomy выполнен в брюшной аорты получателя, 30 иглы.
7. Открыл брюшной аорты и нижней полой вены орошаются с физиологическим раствором.
8. Сердце донора помещается на левой стороне живота получателя и покрыт марлей.
9. Пребывание швы располагаются на проксимальных и дистальных вершины получателя брюшной аорты с восходящей аорты донора.
10. Анастомоз в правой части брюшной аорты реципиента и восходящей аорты донора комплектуются продолжает швов.
11. Два швов пребывания производится сначала в проксимальных и дистальных вершине вершине нижней полой вены получателя с легочной артерии донора для анастомоза легочной артерии донора и нижней полой вены получателя.
12. Левой стене нижнюю полую вену и легочную артерию донора закрыта с продолжением швов во внутренней нижней полой вены.
13. После одного узла с проксимальных шва пребывания вершине, правой стенки нижней полой вены и легочной артерии донора закрыты продолжает швов снаружи нижней полой пещере.
14. Сердце донора не переходит к правой стороне живота получателя. Правой стенки брюшной аорты реципиента и восходящей аорты анастомоза донора закрыты продолжать швов.
15. После анастомоза сделан, дистальной лигатуры удаляется проверить кровотечение из анастомоза.
16. Если есть немного ни к какому кровотечение из анастомоза, проксимальных лигатуры удаляется. Сердце донора наполняется кровью немедленно; цвет сердце становится красным и начинает биться снова.
17. Кишечник возвращаются в животе, которая закрыта с 6-0 непрерывной нити.
18. Получатель мыши помещается на теплое место. Через час получателя восстанавливается.

Обсуждение

Результаты

Мы успешно провели более 1000 случаев гетеротопической трансплантации сердца у мышей и достигла более чем 90% успеха в разных линий мышей, в том числе дикого типа, трансгенные и мышей гена нокаутом.

Обсуждение

С докторами. Корри и Рассел ввел гетеротопической трансплантации сердца у мышей, в 1973 году, эта модель доказала, что особенно ценно для изучения иммунной реакции отторжения и разработки новых иммуносупрессивных стратегий. Эта модель может быть более широко использу...