В этом видео демонстрируется гидропонная система совместного культивирования для изучения взаимодействия растений и бактерий в стерильных условиях. Рассаду растений пересаживают в стерильную, кислую среду для выращивания, инкубируют и проверяют на загрязнение перед инокуляцией агробактерией. Активированные бактерии прикрепляются к корням растений, переносят Т-ДНК в клетки растений и способствуют молекулярным изменениям, которые усиливают бактериальную колонизацию.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Система совместного культивирования для изучения молекулярных реакций растений-хозяев и взаимодействующих бактерий
741 просмотров
⸱
26 сентября 2025 г.
В этой статье
Аннотация
Протокол
1. Гидропонная система совместного культивирования
- Приготовьте жидкую среду Мурасиге и Скуга (МС): 2,165 г/л базальных солей МС, 10 г/л сахарозы, 0,25 г/л 2-(N-морфолин)этансульфоновой кислоты (MES) и 59 мл/л витаминной смеси B5, pH 5,75.
- Автоклав среды. Налейте по 18 мл его в каждую стерильную цилиндрическую стеклянную или прозрачную пластиковую емкость (чашки для кристаллизации, 100 х 80 мм2) со стерильными крышками.
ЗАМЕТКА: Предварительно простерилизуйте баки и крышки, завернув их в алюминиевую фольгу и автоклавирование. - В стерилизованном проточном колпаке с помощью стерильных щипцов аккуратно перенесите каждый квадрат ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Рисунок 1: Гидропонная система совместного культивирования растений и микробов. Левая панель представляет собой блок-схему, описывающую шесть ключевых этапов сборки и эксплуатации гидропонной системы совместного выращивания. Правая панель демон.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Семена растения (Arabidopsis thaliana Col-0) | Центр биологических ресурсов Arabidopsis | КС7000 | https://abrc.osu.edu/order-stocks |
| Бактерии (Agrobacterium tumefaciens C58) | Вашингтонский университет | Н/Д | |
| Меченые бактерии | Внутри компании | Опционально, зависит от последующих анализов | |
| Двойная дистиллированная вода | (различные) | ||
| Микропипетка | (различные) | ||
| Базальные соли Мурашиге и Скуга (MS) | Сигма-Олдрич | М5524 | |
| Сахароза | (различные) | ||
| МЧС | (различные) | ||
| Витаминная смесь В5 | Сигма-Олдрич | Г1019 | |
| Фитоагар | (различные) | ||
| Глубокие чашки Петри | (различные) | ||
| Сетка из нержавеющей стали | Ферриер Вайр Гудс Компани Лтд | Н/Д | класс: 304; Количество ячеек: 40 × 40; Диаметр проволоки: 0,01 |
| Микропористая лента, 1" | 3 МИН. | 1530-1 | |
| Суточная ростовая камера | (различные) | ||
| Цилиндрические стеклянные баки, 100 × 80 мм | Пирекс | 3250 | Можно использовать другие размеры, в этом случае может потребоваться корректировка содержания жидкости |
| Проточная вытяжка | (различные) | ||
| Щипцы | (различные) | ||
| Дрожжевой экстракт | (различные) | ||
| Триптон | (различные) | ||
| MgSO₄ | (различные) | ||
| Встряхивающий инкубатор | (различные) |
