В этом видео демонстрируется анализ полутвердого агара на основе окислительно-восстановительного красителя для оценки подвижности бактерий путем визуального различения подвижных и неподвижных штаммов.
ЗАМЕТКА: Восемьдесят штаммов были выделены из водной среды и идентифицированы с помощью автоматизированного инструмента идентификации бактерий (см. Таблицу материалов), включая Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Vibrio spp., Klebsiella pneumoniae и Aeromonas hydrophila (Таблица 1). Staphylococcus aureus (см. Таблицу материалов) использовали в качестве отрицательного неподвижного контроля; В качестве положительных контрольных штаммов использовали Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и Salmonella typhimurium (см. Таблицу материалов).
Определите тестовые штаммы бактерий, которые будут использоваться для анализа подвижности.
Включайте штаммы отрицательного неподвижного контроля и штаммы положительного подвижного контроля.
Наблюдение за ТТС-усиленной подвижностью бактерий
Отоберите одиночные колонии тестовых бактерий из агаровых планшетов и инокулируйте их в полутвердую среду TTC (2,3,5-трифенилтетразолия хлорид) путем прокола их инокуляционными иглами.
Культивируйте пробирки при 37 °C в инкубаторе в течение 24-48 ч для наблюдения за результатами.
Наблюдайте за состоянием роста: охарактеризуйте бактерии как неподвижные (-), если только линия прокола красная. Характеризуйте бактерии как подвижные (+), если красный цвет слегка распространяется наружу вдоль линии прокола.
Таблица 1: Сравнение подвижности бактерий.
Напряжение
Полутвердая среда с 0,4% агара
Полутвердая среда с 0,4% агара и 0,005% TTC
24 ч
48 ч
24 ч
48 ч
P. aeruginosa ATCC27853
+
+
+
+
Кишечная палочка ATCC25922
+
+
+
+
С. typhimurium ATCC14028
+
+
+
+
Золотистый S. aureus ATCC25923
-
-
-
-
Кишечная палочка (15)
12
14
13
14
Сальмонелла (8)
7
8
8
8
А. hydrophila (20)
18
20
20
20
Вибрион (8)
7
8
8
8
P. aeruginosa (24)
18
20
22
23
К. pneumoniae (5)
-5
-5
-5
-5
Цифрами обозначены номера положительных штаммов (+) и отрицательных красителей (-).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
Список материалов, использованных в этой статье
Имя
Компания
Каталожный номер
Комментарии
Бакто-агар
Дифко
Кишечная палочка
АТКС
ATCC25922
Положительный контроль
Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa)
АТКС
ATCC27853
Положительный контроль
Золотистый стафилококк
АТКС
ATCC25923
Отрицательный неподвижный контроль
Триптоза
ОКСОИДНЫЙ
ТТХ (2,3,5-трифенил-тетразолия хлорид)
Сигма
298-96-4
Автоматизированная система идентификации микроорганизмов VITEK 2
Био Мерье
Перепечатки и разрешения
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE