Выполнение внутритрахеальной доставки бактерий на мышиной модели

Аннотация

Источник: Venuprasad, K., et al. Внутритрахеальное введение Haemophilus influenzae на мышиных моделях для изучения воспаления дыхательных путей. J. Vis. Exp. (2016)

В этом видео демонстрируется внутритрахеальная доставка легочно-патогенного бактериального инокулята мыши, находящейся под наркозом, для моделирования инфекции нижних дыхательных путей.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Интрахеальная инстилляция

1. Введите мышке внутрибрюшинно (в/в) 0,1 мл/10 г массы тела мыши с 150 мг/мл кетамина + 20 мг/мл раствора ксилазина. Процедуру следует проводить в капюшоне с источником света, чтобы животное было в тепле.
2. Зажмите межпальцевое пространство мыши, чтобы убедиться, что мышь адекватно обезболивается.
3. Положите мышь на его заднюю сторону. Побрейте брюшную область шеи и продезинфицируйте хлоргексидином и 70% этиловым спиртом.
4. Подтяните кожу верхней вентральной части шеи с помощью щипцов из крысиных зубов. Сделайте небольшой надрез (0,5-1,0 см) над тимусом с помощью скальпеля и аккуратно рассеките мышцу, чтобы обнажить трахею.
   1. С помощью шприца объемом 1 мл с иглой 27 G медленно введите 0,05 мл воздуха, затем 0,05 мл нетипируемого Haemophilus influenzae (NTHi) или физиологического раствора в качестве контроля, а затем еще 0,05 мл воздуха. Держите животное в вертикальном положении около 1 минуты.
5. Закройте разрез хирургическим клеем. Держите мышь лежачей и теплой около 10 минут.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Ловкое быстрое решение	Сигма	ГС500-500МЛ
Игла для шприца 20/26 г	БД	REF305115/175
1 мл шприца	БД	ССЫЛКА 309602
Ножницы для препарирования, прямые, длиной 10 см	Кентнаучный	INS600393
Щипцы радужной оболочки, зубчатые, длиной 10 см	Кентнаучный	INS650915
Пинцет 5 нержавеющая сталь, длина 11 см	Кентнаучный	INS600095