В этом видео представлены гистологические и микроскопические анализы крови, используемые для оценки защитного эффекта Bacillus subtilis у крыс, подвергшихся тепловому стрессу.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Гистологические и гематологические анализы для оценки эффекта Bacillus subtilis на крыс, испытывающих тепловой нагрузка
422 просмотров
⸱
28 ноября 2025 г.
В этой статье
Аннотация
Протокол
1. Гистологический анализ
- Удалить образцы тонкого кишечника у каждой экспериментальной крысы хирургическим вмешательством. Фиксируйте образцы в фиксаторе Буэна, внедрите в парафин, подготовьте срезы диаметром 6 мкм и окрашивайте срезы гематоксилином и эозином по стандартным процедурам.
- Используйте высокоразрешающую микроскопическую систему для измерения высоты ворсинок кишечника и общей толщины слизистой в каждом образце (увеличение 100 раз). Проанализируйте по 4 образца каждой крысы и проведите не менее двадцати измерений в каждом образце. Экспресс показывает микрометры.
2. Высокоразрешающая световая микроскопия крови
- Используйте платформу для вибрационной изоляции в качестве основы для микроскопической системы, а также видеокамеры и компьютера для записи живых изображений. Калибруйте тестовые изображения с помощью слайда Ричардсона.
- Разместите 7 мкл свежевзятой крови каждой крысы на стеклянный слайд, на обложку, сфотографируйте и запишите десять кадров размером 72 × 53,3 мкм2 в каждый образец (увеличение 1 700 раз).
- Измеряйте концентрацию везикул с помощью программного обеспечения, которое предоставляет высокое разрешение с прямым видом оптических изображений в реальном времени. Изучите минимум 20 кадров изображения для каждого экспериментального состояния.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Фосфатно-буферный физиологический раствор (PBS) | Сигма-Олдрич, Сент-Луис, Миссури | P4417 | |
| Фиксатив Буэна | Электронная микроскопическая наука, Хэтфилд, Пенсильвания, США | 15990 | |
| Тестовый слайд Ричардсона | Электронная микроскопическая наука, Хэтфилд, Пенсильвания, США | 80303 | |
| Видеокамера Sony DXC-33 | Сони | ||
| Оптическая система светового микроскопа | CitoViva Technology Inc., Оберн, Алабама | ||
| Программное обеспечение Image-Pro Plus | Медиа Кибернетика, доктор медицины, США |
