Визуализация инфекции мочевыводящих путей в модели мыши с использованием биолюминесценции

Abstract

Источник: Luyts, N. и др. Продольное наблюдение за инфекциями мочевыводящих путей и их лечение у мышей с использованием биолюминесцентной визуализации. J. Vis. Exp. (2021).

Это видео демонстрирует индукцию и отслеживание инфекций мочевыводящих путей в мышиной модели с использованием биолюминесцентной E. coli , введённой в мочевой пузырь, где происходит бактериальная адгезия, инвазия и внутриклеточная репликация. Излучаемый свет от биолюминесцентного оперона служит маркером бактериальной нагрузки в реальном времени во время прогрессирования инфекции.

Protocol

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Прививка животных

1. Подготовка животных
   1. Выбирайте желаемый штамм мышей в зависимости от исследовательского вопроса и наличия линий выбивания, экспериментальных деталей и различий в восприимчивости к ИМП. Имейте в виду, что трансуретральная катетеризация у самок мышей проще. Не используйте животных младше 8 недель, так как они иммунологически незрелы. Здесь использовались 12-недельные самки C57Bl/6J.
   2. Заранее закажите животных и дайте им привыкнуть, желательно ....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Вапорайзер для анестезии	Harvard Apparatus Limited	Н/Д	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Байтрил 100 мг/мл	Байер	Н/Д	Энрофлоксацин
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Жёлтый ангиокатетер, используйте стерильный пластиковый наконечник для инстилляции
Мыши C57Bl/6J	Жанвье	Н/Д
Центрифуга 5804R	Эппендорф	EP022628146
Dropsense 16	Освобождённые лаборатории	Тринеанский	для измерения OD 600 нм
Физиологический раствор с буфером фосфатов Dulbecco, Gibco	ThermoFisher Scientific	ССЫЛКА 14040-083
Этанол 70% денатурированный 5L	VWR international	85825360
Falcon 14 мл круглополистироловая трубка, с колпачком	Корнинг	352057
Falcon 50ml cellstart	Грейнер	227285
Шприц Hamilton GASTIGHT, PTFE luer lock, 100 мкл.	Сигма-Олдрич	26203	чтобы обеспечить медленное выращивание бактерий 50 мкл
Инокуляционная петля	Рот	6174.1	держатель: Ст. No 6189.1
Iso-Vet 1000 мг/г	Dechra Veterinary Products	Н/Д	Изофлуран
Система визуализации IVIS Spectrum In Vivo	ПеркинЭлмер	ССЫЛКА 124262	Устройство визуализации