Внутрибрюшинная инъекция бактериального липополисахарида у мышей для изучения системных иммунных ответов

Аннотация

Источник: Радулович, К. и др. Инъекции липополисахарида мышам для имитации появления микробных продуктов после прорыва кишечного барьера. J. Vis. Exp. (2018)

В этом видео демонстрируется пошаговая процедура инъекции липополисахарида (ЛПС) мышам внутрибрюшинного пути для индуцирования системного воспаления.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Внутрибрюшническая инъекция липополисахарида (ЛПС) мышам
   1. Аспирировать рабочее раствор LPS в шприце объёмом 0,5 мл с иглой 30 G в ламинарном воздушном потоке.
   2. Взвесьте самок мышей C57Bl/6 (от шести до десяти недель) и рассчитайте количество ЛПС, которые будут введены: 10 мкл (2 мкг)/г массы тела.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Например, если мышь весит 20 г, то необходимо ввести рабочее раствор 20 г x 10 мкл = 200 мкл LPS.
   3. Держите мышь аккуратно, но крепко и удержите животное одной рукой. Убедитесь, что животное может дышать нормально, но не крутится и не поворачивается во время фиксации.
   4. Слегка наклоните нос мыши к полу, чтобы обнажить живот для инъекции. Определите среднюю линию живота и место инъекции в нижней части живота слева или справа от середины. Вводите внутрибрюшинно (например, фосфатно-буферный физиологический раствор (PBS) вместо LPS контрольным мышам.
   5. Свободной рукой введите соответствующий объём (объем, рассчитанный на шаге 1.2) рабочего решения LPS. Убедитесь, что игла вошла в брюшную полость, иначе могут произойти неправильные инъекции в мышечный слой брюшной полости. Тем не менее, не заходите иглой слишком глубоко в брюшинную полость, чтобы не повредить внутренние органы, расположенные в этой области.
   6. Аккуратно возвращайте животное в клетку — до 5 мышей в каждой клетке.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
LPS Escherichia coli O111:B4	Invivogen, Сан-Диего, Калифорния, США.	tlrl-eblps
Одноразовый инсулиновый шприц Omnican 50	Б. Браун Мельзунген, Мельзунген, Германия	9151125