Количественная оценка тканевой бактериальной нагрузки в модели хронической кишечной инфекции у мыши

Abstract

Источник: Lo, B. C. и др. Хроническая инфекция сальмонеллезы вызывает кишечный фиброз. J. Vis. Exp .(2019)

Видео демонстрирует количественную оценку бактериальной нагрузки в модели хронической инфекции стрептомицин-резистентной Salmonella typhimurium . После эвтаназии и стерильной вскрытия ткани целейной и селезёнки собираются, гомогенизируются стальными бусинами для выделения бактерий и серийно разбавляются. Разбавления наносятся на селективный агар, а видимые колонии подсчитываются для оценки бактериальной нагрузки на грамм ткани в кишечных и системных участках.

Protocol

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Подготовка культур Salmonella Typhimurium ΔAroA для орального гагавания мышей

1. Из замороженного глицеролового запаса S. Typhimurium ΔAroA подготовьте пластину с использованием агара Лурия-Бертани (LB agar), содержащего 100 мкг/мл стрептомицина с стерильной инокуляционной петлей. Инкубировать на ночь при 37 °C. Пластины Streak можно хранить до одной недели при 4 °C.
2. За день до заражения приготовьте антибиотик, растворив 0,5 г стрептомицина в 2,5 мл в....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
2 мл круглодонных безопасных замковых трубок	Эппендорф	22363344
Бусины из нержавеющей стали	Цягэн	69989
PBS	Gibco	10010031
Наконечники пипеты с большими отверстиями	Фишер	2707134
Мегаблоковые пластины объемом 2 мл	Сарштедт	82.1972.002
Гаважные иглы	FST	18061-22
Стрептомицин сульфат	Sigma	S9137
Смесительная мельница	Ретч	ММ