$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.
1. Взятие мазка с просвета влагалища для количественной оценки нагрузки GBS
- Приготовьте по одной микроцентрифугной трубке объёмом 1,5 мл на мышь, добавив 100 мкл фосфатно-буферного физиологического раствора (PBS). Непосредственно перед взятием мазка предварительно смочите мазок в PBS.
- Сдержите мышь и введите мазок на 10 мм в просвет влагалища. Аккуратно поверните мазок 4 раза по часовой стрелке и 4 раза против часовой, немного давите на стенку влагалища.
- Перенесите мазок в микроцентрифугу объёмом 1,5 мл с 100 мкл PBS. Перед нанесением пластины пропустите микроцентрифугу в вихрь в течение ~15 секунд, чтобы выпустить бактерии из тампона. Последовательно разбавляйте каждый образец в PBS и на пластине 20 мкл разбавления в соотношении 1:10–10 000 на дифференциальных средних агарных пластинах, подготовленных по инструкции производителя. Инкубировать пластины при 37 °C в течение 24 часов. Колонии группы B Streptococcus (GBS) будут выглядеть ярко-розовым или лиловым цветом. Другая эндогенная флора будет ингибироваться или выглядеть синими, белыми или серыми колониями.