Method Article

Визуализация окислительного стресса, вызванного патогенами, у C. elegans с использованием GFP-метированного SKN-1

March 31st, 2026

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Naji, A. и др. Изучение окислительного стресса, вызванного стрептококками группы Mitis у Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp . (2019)

В этом видео демонстрируется использование зелёного флуоресцентного белка SKN-1 у C. elegans для мониторинга окислительного стресса путем отслеживания зелёной флуоресценции. Черви, подвергшиеся воздействию S. gordonii , демонстрируют сильную ядерную флуоресценцию, что подтверждает стресс, вызванный патогеном, в то время как у тех, кто питается E. coli , демонстрируют диффузную зелёную флуоресценцию в цитоплазме, что указывает на минимальную активацию SKN-1.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Наблюдение локализации SKN-1 в ответ на инфекцию Streptococcus gordonii

  1. Добавьте ~100 личинок L4 к каждому экстракту дрожжей Тодда–Хьюитта (THY), засеянному стрептококком , и на каждую агаревую среду для роста нематод (NGM), засеянную Escherichia coli (E. coli). Используйте три пластины на каждый штамм бактерий. Инкубировать тарелки в течение 2–3 часов при 25 °C.
  2. После этого вынимите пластины из инкубатора, промойте их модифицированным буфером M9 (M9W) и соберите червей в конические трубки по 15 мл.
  3. Помой червей три раза.
  4. Удалите бо....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Среды и химические вещества   
BD Bacto Тодд Хьюитт бульонFisher ScientificDF0492-17-6 
15 мл конических стерильных полипропиленовых центрифугных трубокFisher Scientific12-565-269 
Натрий-азидСигма ОлдричS2002-25G 
Гидрохлорид тетрамизолаСигма ОлдричL9756 
Закрышки No1.5 размером 18 мм x 18 ммFisher Scientific12-541A 
АгарозеСигма ОлдричA9539-50G 
LD002IdIs1SKN-1B/C::GFP + ROL-6(SU1006)Кит Блэквелл

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

C elegans Oxidative StressSKN 1 TranslocationGFP Tagged SKN 1Fluorescence MicroscopyPathogen Induced StressWorm AnesthesiaAgarose Pad MountingNuclear Localization ScoringStreptococcus ExposureFITC DAPI Filters

Related Articles