$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Кальций играет много ролей в нервной системе, но ни один более впечатляющим, чем в качестве триггера для выпуска нейротрансмиттера, и никто более глубоким, чем в качестве посланника необходимо для синаптической пластичности, поддерживающего обучения и памяти. Для дальнейшего выяснения молекулярной основы Са 2 +-зависимые синаптических механизмов, модели требуется система, которая является и генетически ковкого и физиологически доступной. Дрозофилы предоставляет такую модель. В этой системе, генетически закодированы люминесцентные индикаторы доступны для выявления Са 2 + изменения в нервных окончаниях. Тем не менее, эти показатели имеют ограниченные чувствительность к Са 2 + и часто показывают нелинейную реакцию. Синтетические люминесцентные индикаторы лучше подходят для измерения быстрых Са 2 + изменения, связанные с нервной активностью. Здесь мы показываем, технику для погрузки декстран-сопряженных синтетического Ca 2 + показатели в живых нервных окончаний у личинок дрозофилы. Особый акцент делается на тех аспектах протокол наиболее решающее значение для успеха этой техники, например, как избежать статических разрядов электричества вдоль изолированных нервов, поддержании здоровья подготовки в течение длительных периодов погрузки, а также обеспечение аксон выживание, предоставляя Са 2 + содействовать уплотнения разорвала окончаниях аксона. Низкое сродство декстран-сопряженных Са 2 +-индикаторы, такие как флуоресцентные-4 и rhod, доступны, которые показывают высокое отношение сигнал-шум в то время как минимально нарушая пресинаптических Са 2 + динамики. Декстран сопряжения помогает предотвратить Са 2 + показатели, поглощенных в органеллах типа митохондрий. Погрузка техника может быть применена в равной степени к личинки, эмбрионы и взрослых.