$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Роль сотовой микроокружения признается решающее значение в определении судьбы и функционирование клеток практически во всех тканях млекопитающих от разработки к злокачественной трансформации. В частности, взаимодействие с соседними стромы был вовлечен в множество биологических явлений, однако обычные методы ограничивают возможность допросить пространственные и динамические элементы такого взаимодействия.
В Микромеханические культуры реконфигурируемых (RC), мы используем Micromachined кремниевой подложке с движущимися частями, для динамического контроля межклеточных взаимодействий с помощью механических репозиционирования. Ранее этот метод был применен для исследования межклеточных взаимодействий во взаимодействии культур гепатоцитов и не паренхиматозных клеток, демонстрируя зависящих от времени взаимодействия и ограниченный диапазон для растворимых сигнализации 1.
Здесь мы подробно описывать подготовку и использование системы КР. Мы начнем с демонстрации обработки устройство деталей с помощью пинцета, в том числе исполнительных между разрывом и контактных конфигураций (клеточных популяций, разделенных узкой 80-мкм разрыв, или в прямой интимный контакт). Далее мы подробно процесс подготовки субстрата для культуры, и многоступенчатый процесс посева ячейки, необходимых для получения сливной монослоев клеток. Использование живых микроскопии, мы затем проиллюстрируем в реальном времени управлять клеток между различными возможными экспериментальных конфигурациях. Наконец, мы демонстрируем шаги, необходимые для того, чтобы восстановить поверхности устройства для повторного использования: толуол и пираньи очистки, полистирол покрытия, и лечения кислородной плазмы.