Методическая статья

Препарирование децеллюляризованной почки крысы: процедура получения бесклеточного васкуляризованного каркаса целого органа из собранной почки крысы

22 февраля 2023 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Kim, E. H. et al. Получение децеллюляризованных каркасов почек у крыс. J. Vis. Exp. (2021)

В этом видео описывается подготовка децеллюляризованной крысиной почки. Полученный бесклеточный сосудистый каркас может служить перспективной платформой для тканевой инженерии органных трансплантатов.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Забор почек и децеллюляризация

  1. Извлекают левую почку с брюшной аортой и нижней полой веной.
  2. Переложите мочеточник, грудную аорту, верхнюю полую вену и ветви брюшной аорты.
  3. Поддерживайте гидратацию органа в PBS Дульбекко (DPBS) в чашке Петри диаметром 10 см.
  4. Канюляция брюшной аорты и нижней полой вены с помощью катетера 23G. Чтобы удалить остаточную кровь, подсоедините канюлю к перистальтическому насосу и промойте DPBS (500 мл) и гепарином 16 Ед/мл в течение 90 мин со скоростью 5 об/мин при 37 °C.
  5. Для децеллюляризации почки необходимо перфузировать почку 1% Triton X-100 (1 л) в течение 3 ч, а затем 0,75% раствором додецилсульфата натрия (SDS) (2 л) в течение 6 ч при постоянном давлении 40 мм рт.ст.<бр/> заметка: Почка станет прозрачной через 8 ч.
  6. Для удаления остаточных SDS образец следует перфузировать 1% пенициллином в дистиллированной воде (6 л) в течение 18 ч (на ночь), а затем стерильным DPBS (500 мл) и гепарином 16 ЕД/мл в течение 90 мин.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Полиэтиленовая трубка 50, катетерная трубка 100 футовБрейнтри Сайентиал .023" × .038"
3-0 Сосудистый доступ с шелковой катушкой / лигирование у крысБрейнтри Сайентиал СУТ-С 110
Тонкие ножницы для разрезания фасции/соединительной ткани Инструменты для точной науки 14058-09
Направляющая игла 25 калибра (для сосудистых катетеров) Бектон Дикинсон 305145
Сосудистые зажимы Schwartz microserrefine Инструменты для точной науки18052-01 (прямой)
5-0 Шелковая катушка для сосудистого доступа/лигирования у мышей Брейнтри Сайентиал СУТ-С 106

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Triton X 100SDSPBS

Похожие статьи