Мышиная модель односторонней обструкции мочеточника: хирургическая процедура по препятствию оттоку мочи из почки на мышиных моделях

Аннотация

Источник: Yanai, K. et al. Количественная оценка экспрессии микроРНК в почке мыши с односторонней обструкцией мочеточника методом ПЦР в реальном времени. J. Vis. Exp. (2020)

Это видео демонстрирует процедуру создания модели мыши с односторонней обструкцией мочеточника. Процедура включает в себя разрезание одного из мочеточников мыши для затруднения потока мочи.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Хирургия UUO

1. Подготовьте следующие предметы: изофлуран, пробковый лист, крем для депиляции, лабораторные салфетки, чашку Петри с PBS, шелк 4-0, нейлон 4-0, шприц объемом 2,5 мл, ватные палочки, пинцет, хирургические ножницы и 8-недельного самца мыши C57BL/6.
2. Обезболите мышь 1,5% изофлураном и поддерживайте на уровне 1,5%. Затем нанесите крем для депиляции на живот мыши. Через несколько минут сотрите крем для депиляции с помощью лабораторной салфетки, смоченной в PBS.
3. Введите 70% этанол в брюшную полость мыши и положите мышь в лежачее положение на пробковый лист.
4. С помощью хирургических ножниц и пинцета сделайте разрез на коже в области живота и разрежьте мышцу и перитонеальную оболочку от мочевого пузыря до левого нижнего края ребер.
5. Поместите шприц объемом 2,5 мл под мышь. Возьмите два ватных тампона и смочите их PBS. Осторожно отведите кишечник в сторону с помощью пинцета и поместите смоченные тампоны соответствующим образом, чтобы определить левый мочеточник. С помощью пинцета поднимите левую почку.
6. С помощью шелка 4-0 перевязать левый мочеточник в двух местах на расстоянии около 1 см друг от друга. Разрежьте мочеточник в центральной точке двух лигий, а затем используйте нейлоновые швы 4-0, чтобы закрыть перитонеальную оболочку и разрез.