Срез замороженной ткани мозга мыши: процедура получения тонких срезов замороженной ткани из замороженной ткани мозга мыши

Аннотация

Источник: Comba, A. et al. Лазерная микродиссекция субрегионов глиомы для пространственной и молекулярной характеристики внутриопухолевой гетерогенности, онкопотоков и инвазии. J. Vis. Exp. (2020)

В этом видео мы демонстрируем разрезание замороженной ткани опухоли мозга мыши с помощью криостата. Полученные таким образом замороженные срезы мозговой ткани хранятся при низких температурах до дальнейшего анализа.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Секционирование замороженных тканей опухоли головного мозга

1. Этикетка 2 мкм полиэтиленнафталата (PEN) с информацией об образце. Срезы тканей будут размещены непосредственно на этих предметных стеклах после среза.
2. Установите температуру криостатной камеры в диапазоне от -20 до -24 °C. Перед секционированием блок образцов поместите в камеру криостата и дайте ему уравновеситься до температуры в камере в течение 30–60 минут.
3. Очистите криостат....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Стеклянное стекло с мембраной PEN (2 мкм)	Лиека	1150518
Исследовательский криостат	Лейка	КМ3050с
Решение для обеззараживания РНКазы Zap	Научный центр Фишера	АМ9780
Отклейте одноразовые формы для встраивания	Науки электронной микроскопии	70182
Решение Pinpoint	Исследование Zymo	Д3001-1
Салфетка-Плюс ОКТ Компаунд	Научный центр Фишера	Тел.: 23-730-571