Методическая статья

Морфолино-опосредованное редактирование генов: техника нокдауна генов с использованием блокирующих трансляцию морфолигонуклеотидов в одноклеточных яйцах пещерных рыб

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Шталь, Б. А. и др., Манипуляция функцией генов у мексиканских пещерных рыб. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео описывает технику нокдауна генов с использованием микроинъекции трансляционного блокирования морфолиноса в одноклеточную стадию пещерной рыбы. Морфолино — это олигонуклеотиды ДНК, которые связываются с комплементарной последовательностью мРНК-мишени и блокируют ее трансляцию в белок. Следовательно, морфолино используются в качестве молекулярных инструментов для остановки или временного снижения экспрессии гена.

Протокол

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Дизайн олиго морфолино

ПРИМЕЧАНИЕ: Последовательности для A. mexicanus доступны через National Center of Biotechnology Information (NCBI) Gene и NCBI SRA (https://www.ncbi.nlm.nih.gov), а также через браузер генома Ensembl (https://www.ensembl.org). При разработке морфолино для использования как в поверхностных, так и в пещерных формах, крайне важно выявить любые генетические вариации между морфами на этой стадии, что....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Разведение рыбы и поставка яиц
Мелкоячеистая сетка для рыбы Пенн Плакс БН4
Нагреватель аквариума Аквеон 100106108
Ловушки для яиц Изготовление на заказ NA Спроектируйте и создайте пластиковую решетку для размещения на дне резервуара для защиты яиц
Стеклянные пипетки Научный центр Фишера 13-678-20С
Лампы для пипеток Научный центр Фишера Тел.: 03-448-21
агароза Научный центр Фишера БП160-500
Формы для яиц Инструменты адаптивной науки ТУ-1
Поставки Morpholino
Управление Морфолино Джин Тулс, ООО Стандартное управление olio
Кастомный Morpholino Джин Тулс, ООО NA
Фенол красный Сигма Олдрич П0290-100МЛ
Расходные материалы для микроинъекций
Стеклянные капиллярные трубки Инструменты Саттера БФ100-58-10
Съемник пипеток Инструменты Саттера -97
Пикоинъектор Уорнер Инструментс ПЛИ-100А
микроманипулятор Мировые прецизионные приборы М3301Р
микроманипулятор Стенд World Precision Instruments М10
База микрофонизатора Мировые прецизионные приборы Основание из стальной пластины, 10 фунтов

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Morpholino OligonucleotidesGene Knockdown TechniqueTranslational BlockingCavefish EggsMicroinjection ProcedureYolk Sac InjectionMorpholino HybridizationTranslation InhibitionSingle Celled EggsPicoliter Microinjector

Похожие статьи