Методы редактирования генома

Это видео объясняет концепцию CRISPR-опосредованных редакторов цитозиновых оснований для индуцирования целевой замены нуклеотидов.

В этом видео мы демонстрируем универсальное редактирование генома на основе CRISPR-Cas9 в культивируемых клетках, где Cas9 и sgRNA предоставляются клеткам как единая плазмидная конструкция. Система CRISPR-Cas9 и желаемый ген, который должен был быть вставлен, были введены в клетки с помощью техники электропорации для облегчения успешного редактирования генов.

Это видео демонстрирует технику редактирования генома на основе нуклеазы цинкового пальца в плюрипотентных стволовых клетках человека (hPSCs). Поскольку hPSCs потенциально могут быть дифференцированы в различные типы клеток, эта технология полезна для патологоанатомических и фармакологических исследований in vitro с учетом специфики пациента.

Это видео описывает точную технику редактирования генома в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках человека, или hiPSCs, с использованием TALEN для создания двухцепочечных разрывов в целевом локусе, индуцируя направленную на гомологию репарацию для интеграции генов флуоресцентного белка.

В этом видео мы демонстрируем phiC31-опосредованную site-specific трансгенную интеграцию в эмбрионе Anopheles с помощью микроинъекции. Этот метод помогает ввести желаемые гены в систему хозяина для исследовательских и промышленных применений.

В этом видео мы демонстрируем генерацию трансгенных растений Arabidopsis, экспрессирующих стабильный трансген через трансформацию генов на основе искусственной хромосомы Agrobacterium-опосредованных.

В этом видео мы демонстрируем процедуру создания стабильной трансгенной линии данио-рерио, конститутивно экспрессирующей белок индикатора флуоресцентного напряжения, после совместной инъекции системы транспозона Tol2, содержащей мРНК транспозазы и конструкцию транспозона Tol2, кодирующую флуоресцентный индикатор напряжения.

Это видео демонстрирует процедуру генерации моторных нейронов путем трансфекции человеческих iPSC с помощью транспозонной системы PiggyBac путем эктопической экспрессии факторов транскрипции, специфичных для линии.

Это видео демонстрирует подавление экспрессии гена на основе CRISPR у патогенных лептоспир. Целенаправленное подавление экспрессии генов с помощью системы CRISPR/Cas, блокирующей образование мРНК, помогает идентифицировать гены-кандидаты для патологических и фармакологических исследований.

Это видео описывает процедуру нокаута гена-мишени с использованием тамоксифен-индуцируемой системы Cre-рекомбиназы после внутрибрюшинного введения тамоксифена в мышиной модели.

В этом видео описывается техника нокаута генов с использованием CRISPR-конкатемера для одновременного нокаутирования нескольких генов в культивируемых органоидных клетках кишечника мыши. Этот метод используется для того, чтобы нокаутировать больной ген и выяснить функцию гена и его паралогов.

В этом видео мы демонстрируем метод выполнения трансдукции лентивирусных векторов shRNA для получения стабильных нокдаун-клеточных линий в иммортализированных гемопоэтических стволовых и прогениторных клетках (iHSPCs).

Это видео демонстрирует систему экспрессии генов тетрациклина, или Tet-On, в мышиной модели. В присутствии доксициклина, производного тетрациклина, система Tet-On, состоящая из белка-трансактиватора, управляемого обратным тетрациклином, активируется и экспрессирует интересующий ген.

В этом видео мы описываем процедуру выполнения обратной трансфекции миРНК в адипоциты для модуляции экспрессии целевого белка.

Это видео описывает метод регуляции экспрессии генов в культивируемых клетках путем трансфекции плазмидой, содержащей интересующий ген, и регуляторной плазмидой. Экспрессия этой плазмиды может контролироваться тетрациклином или его синтетическими аналогами, что делает эту систему полезной моделью для изучения регулируемой экспрессии генов.

Это видео описывает технику нокдауна генов с использованием микроинъекции трансляционного блокирования морфолиноса в одноклеточную стадию пещерной рыбы. Морфолино — это олигонуклеотиды ДНК, которые связываются с комплементарной последовательностью мРНК-мишени и блокируют ее трансляцию в белок. Следовательно, морфолино используются в качестве молекулярных инструментов для остановки или временного снижения экспрессии гена.