Скрининговый анализ низкомолекулярных нематицидов: метод скрининга потенциальных нематицидов против Ditylenchus dipsaci со средней пропускной способностью

Abstract

Источник: Cammalleri, S. R., et al. Культивирование и скрининг паразитической нематоды растений Ditylenchus dipsaci. J. Vis. Exp. (2022).

В этом видео мы демонстрируем скрининговый анализ для определения эффективности низкомолекулярных нематоцидов против нематод. Нематоциды считаются эффективными, если они вызывают снижение количества подвижных нематод в образце после воздействия.

Protocol

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE

1. Скрининг малых молекул in vitro

1. Подготовьте пластины для анализа, следуя приведенным ниже инструкциям.
   1. Налейте автоклавированную дистиллированную воду в стерильное корыто и с помощью многоканальной пипетки выдайте 40 мкл дистиллированной воды из корыта в каждую лунку 96-луночного планшета с плоским дном.
2. Подготовьте инструмент для прикалывания и добавьте химикаты.
   1. Установите лотки для пиннеров (см. Та....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Стакан объемом 50 мл	пирекс	CLS100050
Планшет на 96 лунок	Сарштедт	83.3924
Алюминиевая фольга	Алкан Плюс
Область рассечения	Лейка	Лейка MZ75
Дмсо	Сигма-Олдрич	472301-500МЛ
Предметное стекло	МАГНА	60-1200
Безворсовая промокательная бумага	Научно-исследовательская компания V&P	ВП 522-100
Наконечники для пипеток с низким удержанием (200 мкл)	ЛАБФОРС	1159М44
многоканальный пипетка	Eppendorf research plus	3125000036
НаОХ	Сигма-Олдрич	С8045-500Г
Парафильм	Бемис	ПМ-996
Решения для очистки штифтов	Научно-исследовательская компания V&P	ВП110А
пиннер	Научно-исследовательская компания V&P	ВП381Н
Лотки для ополаскивания пиннером	Научно-исследовательская компания V&P	ВП 421
Резервуар для реагентов с крышкой для многоканальных пипеток	Сигма-Олдрич	BR703459
Встряхивающий инкубатор	Научный центр Нью-Брансуика	И26