Методическая статья

Микрочип вирусного антигена для выявления изотипов антител в сыворотке крови против вирусного антигена

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Khan, S., et al., Использование микрочипа антигена гриппа для измерения широты сывороточных антител по подтипам вируса. J. vis. Exp. (2019)

В этом видео мы демонстрируем процесс обнаружения изотипов антител в нескольких образцах сыворотки крови человека с помощью слайда микрочипа, напечатанного с антигенными подтипами штаммов вируса гриппа.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Производство микрочипов антигена гриппа

  1. Печать антигенов на предметных стеклах микрочипов
    1. Восстановите каждый лиофилизированный антиген до концентрации 0,1 мг/мл в фосфатно-солевом буфере (PBS) с 0,001% Tween-20 (T-PBS). Перенесите 10 μL каждого восстановленного антигена в отдельные лунки необработанного 384-луночного планшета с плоским дном.
    2. Печать антигенов с помощью микрочипового принтера с малообъемными микрочиповыми пятнистыми штифтами, которые аспирируют антиген в канал образца и наносят его путем прямого контакта и капиллярного действия на стеклянные стекла с 16-слойным нитроцеллюлозным покрытием. ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Схема протокола печати и зондирования микрочипов антигена гриппа. Слева направо микрочип печатается с использованием покрытых нитроцеллюлозой предметных стекол, которые используются для зондирования сывороток на антитела IgG и IgA с использованием вторичных антител, сопряженных с квантовыми точками, при этом слайды визуализируются с помощью портативного тепловизора, а резу.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
16-контактные стеклянные стекла с нитроцеллюлозным покрытиемGrace Bio Labs305016
1x GVS FAST буфер блокировкиFischer Scientific10485356
ArrayCamGrace Bio Labs400SДругие устройства визуализации могут быть использованы для визуализации слайдов, если они способны достичь разрешения пятен микрочипа, а также длин волн возбуждения и излучения квантовых точек.
биотин-конъюгированное козье антитело против мышиного IgGThermo Fischer
HiBase 384-луночный планшетGreiner Bio-One
MicrochipArrayItGMP2Для каждого принтера с микрочипами могут потребоваться собственные контакты микрочипа.
Мышиное моноклональное поли-Ис-антителоСигма-ОлдричH1029
OmniGrid 100GeneMachinesВерсия микрочипового принтера, использованная в этой работе, больше не доступна в продаже, но обновленным аналогичным оборудованием является микрочиповый принтер OmniGrid Accent от Digilab (Хопкинтон, штат Массачусетс), и тот же протокол может быть выполнен с большинством коммерчески доступных микрочиповых принтеров.
ProPlateGrace Bio Labs
ProPlate скользящие зажимыGrace Bio Labs204838
ProPlateGrace Bio Labs246879
Квантовая точка 585 нм конъюгированное козье антитело к IgA человекаGrace Bio Labs
Конъюгат стрептавидина 585 нмThermo FischerQ10111MP
Квантовая точка 800 нм конъюгированное козье антитело к человеку-IgGGrace Bio Labs
<тр > <тр > <тр > Портативный тепловизор <тр > < >31800 <тр > <ТД >Т-3037-11 <тр > Контакты <тр > <тр > Микрочиповый принтер <тр > Скользящие камеры <-й номер >246890 <тр > <тр > Скользящие рамы <тр > < >110620 <тр > <тр > <-й номер >110610

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи