Забор пахового дренирующего лимфатического узла у мышиной модели

Аннотация

Источник: Rezende, R. M. et al., Визуализация структуры лимфатических узлов и клеточной локализации с помощью конфокальной микроскопии ex-vivo.J. Vis. Exp.(2019)

Это видео демонстрирует хирургическую процедуру изоляции пахового дренирующего лимфатического узла на мышиной модели. Разрез брюшной области обеспечивает доступ к паховому лимфатическому узлу, который собирается хирургическим путем. Собранный полупрозрачный паховый лимфатический узел может быть использован для иммунологических исследований.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Мыши, использованные для эксперимента

1. Используйте 8-недельных самцов и самок мышей на фоне B6.

2. Хирургическая процедура по удалению пахового дренирующего лимфатического узла

1. Усыпляйте мышей с помощью удушения_СО2 с последующим вывихом шейки матки.
2. Обездвижите мышей на акриловой стадии с помощью клейкой ленты и нанесите минеральное масло ватным тампоном на кожу живота, чтобы предотвратить отложение шерсти вокруг разреза (рисунок 1В). Снимать мех не нужно.
3. Выполните разрез по средней линии с помощью микрохирургических изогнутых ножниц (11,5 см) и микрохирургических изогнутых щипцов (12,5 см) в области живота от лобка до мечевидного отростка (рис. 1C).
4. Отделите мускулатуру живота от кожи (рисунок 1D).
5. Сделайте горизонтальные разрезы кожи вверху и внизу вертикальной линии разреза, чтобы создать кожные лоскуты на интересующей стороне (в соответствии со стороной инъекции смеси антител) и лоскут кожи, чтобы визуализировать лимфатический узел (рис. 1E).
6. Прикрепите кожный лоскут к акриловой пластине (Рисунок 1F).
7. Удалите паховый дренажный лимфатический узел с помощью микрохирургических изогнутых щипцов (рис. 1F). Лимфатические узлы будут проявляться в виде полупрозрачных, обычно двудольных, сфер под кожей.

Результаты

Рисунок 1: Подготовка паховых лимфатических узлов.
(А) Подкожное введение основной смеси антител FACS во внутреннюю поверхность бедра. (В) Через 3 ч после инъекции усыпить мышь, обездвижить мышь на акриловой пластине с помощью клейкой ленты и нанести минеральное масло на кожу живота, чтобы предотвратить отложение шерсти вокруг разреза. (В) Выполните разрез по средней линии в бр...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Микрохирургические изогнутые щипцы	Хирургические инструменты WEP	заказной	12,5 см
Микрохирургические изогнутые ножницы	Хирургические инструменты WEP	заказной	11,5 см