Методическая статья

Метод диссекции для забора подколенных дренирующих лимфатических узлов у мышей для визуализации ex vivo

5.3K просмотров

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Rezende, R. M., et al. Визуализация структуры лимфатических узлов и клеточной локализации с помощью конфокальной микроскопии ex-vivo. J. Vis. Exp. (2019)

Это видео демонстрирует технику препарирования для забора подколенных дренирующих лимфатических узлов с задних лап мыши. Лимфатические узлы играют решающую роль в формировании врожденного и адаптивного иммунитета, а сбор неповрежденных лимфатических узлов — с сохраненной структурой ткани и клеточной жизнеспособностью — может помочь в изучении местных и системных иммунных реакций.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Хирургическая процедура по удалению подколенного дренажного лимфатического узла

  1. Усыпляйте мышей с помощью удушенияСО2 с последующим вывихом шейки матки.
  2. Обездвижите мышей в положении лежа на акриловой стадии с помощью клейкой ленты и нанесите минеральное масло ватным тампоном в область икры и колена (рисунок 1A-D).
  3. Выполните разрез по средней линии в икре от пятки до колена (рисунок 1E, F).
  4. Отделите мускулатуру икры от кожи (рис. 1F, G).
  5. Обнажите подколенную ямку (рисунок 1G). Подколенный лимфатический узел будет выглядеть в виде полупрозрачной сферы в подколенной ямке.
  6. Удалите подколенный лимфатический узел с помощью микрохирургических изогнутых щипцов (Рисунок 1G).
  7. В качестве альтернативы поверните мышь в положение лежа на спине и подойдите к подколенной ямке между бицепсом бедра и полусухожилием для удаления подколенной мышцы тела, выполнив разрез по средней линии в икре от пятки до колена с последующей диссоциацией мускулатуры икры от кожи.
    заметка: Подколенная ямка представляет собой неглубокое углубление, расположенное в задней части коленного сустава. Осторожно откройте подколенный лимфатический узел.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

figure-results-1
Рисунок 1: Подготовка подколенных лимфатических узлов. (А, Б) Подкожное введение мастер-смеси антител FACS в подушечку лапы. (С, Г) Через 3 ч после инъекции усыпить мышь, обездвижить мышь на акриловой пластине с помощью клейкой ленты (С) и нанести минеральное масло на кожу живота для предотвращения отложения шерсти вокруг разреза (Г). (E) Выполните ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Блюдо для культуры CellviewГрайнер-Био62786135x10 мм со стеклянным дном
КимвайпсНаучный бренд Kimtech7557размер 21 x 20 см / 100 листов в коробке
Микрохирургические изогнутые щипцыХирургические инструменты WEPзаказной12,5 см
Микрохирургические изогнутые ножницыХирургические инструменты WEPзаказной11,5 см

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи