Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Метод диссекции для забора подколенных дренирующих лимфатических узлов у мышей для визуализации ex vivo

5.7K просмотров

⸱

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Rezende, R. M., et al. Визуализация структуры лимфатических узлов и клеточной локализации с помощью конфокальной микроскопии ex-vivo. J. Vis. Exp. (2019)

Это видео демонстрирует технику препарирования для забора подколенных дренирующих лимфатических узлов с задних лап мыши. Лимфатические узлы играют решающую роль в формировании врожденного и адаптивного иммунитета, а сбор неповрежденных лимфатических узлов — с сохраненной структурой ткани и клеточной жизнеспособностью — может помочь в изучении местных и системных иммунных реакций.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Хирургическая процедура по удалению подколенного дренажного лимфатического узла

  1. Усыпляйте мышей с помощью удушенияСО2 с последующим вывихом шейки матки.
  2. Обездвижите мышей в положении лежа на акриловой стадии с помощью клейкой ленты и нанесите минеральное масло ватным тампоном в область икры и колена (рисунок 1A-D).
  3. Выполните разрез по средней линии в икре от пятки до колена (рисунок 1E, F).
  4. Отделите мускулатуру икры от кожи (рис. 1F, G).
  5. Обнажите подколенную ямку (рисунок 1G). Подколенный лимфатический узел будет выглядеть в виде полупрозрачной сферы в подколенной ямке.
  6. Удалите подколенный лимфатический узел с помощью микрохирургических изогнутых щипцов (Рисунок 1G).
  7. В качестве альтернативы поверните мышь в положение лежа на спине и подойдите к подколенной ямке между бицепсом бедра и полусухожилием для удаления подколенной мышцы тела, выполнив разрез по средней линии в икре от пятки до колена с последующей диссоциацией мускулатуры икры от кожи.
    заметка: Подколенная ямка представляет собой неглубокое углубление, расположенное в задней части коленного сустава. Осторожно откройте подколенный лимфатический узел.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

figure-results-1
Рисунок 1: Подготовка подколенных лимфатических узлов. (А, Б) Подкожное введение мастер-смеси антител FACS в подушечку лапы. (С, Г) Через 3 ч после инъекции усыпить мышь, обездвижить мышь на акриловой пластине с помощью клейкой ленты (С) и нанести минеральное масло на кожу живота для предотвращения отложения шерсти вокруг разреза (Г). (E) Выполните ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Блюдо для культуры CellviewГрайнер-Био62786135x10 мм со стеклянным дном
КимвайпсНаучный бренд Kimtech7557размер 21 x 20 см / 100 листов в коробке
Микрохирургические изогнутые щипцыХирургические инструменты WEPзаказной12,5 см
Микрохирургические изогнутые ножницыХирургические инструменты WEPзаказной11,5 см

Больше статей

Подколенный лимфатический узеллимфатический узел мышидиссекция лимфатического узлазабор тканеймикрохирургический пинцетнанесение минерального маслаудаление жировой тканидиссекция задней конечностиизоляция лимфатического узла