Method Article

Трехмерная количественная фазовая визуализация для характеристики подтипов лимфоцитов

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Yoon, J. et al. Безмаркерная идентификация подтипов лимфоцитов с использованием трехмерной количественной фазовой визуализации и машинного обучения. J. vis. Exp.(2018)

Это видео демонстрирует безметочную идентификацию морфологии и биохимии лимфоцитов с помощью 3D-количественной фазовой визуализации. Этот метод позволяет провести тщательный анализ лимфоцитов, выявить их внутренние структуры и свойства без необходимости проведения процедур маркировки.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Проточная цитометрия и сортировка подтипов лимфоцитов

ПРИМЕЧАНИЕ: Сортировка лимфоцитов в зависимости от типа клеток необходима для установления достоверных (т.е. правильных) меток типов клеток для обучения и тестирования классификатора типов клеток в контролируемом обучении. Проточная цитометрия, метод золотого стандарта, используется для идентификации и разделения лимфоцитов.

  1. Приготовьте смесь антител, окрашивающих поверхностные маркеры, в 100 мкл свежей среды RPMI-1640 [с 10% FBS, 0,1 мкг CD3e (17A2), CD8a (53-6,7), CD19 (1D3), CD45R (B220, RA3-6B2) и NK1.1 (PK136)] и 0,25 мкг антител CD4 (GK1.5) ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Проточная цитометрияBD BiosciencesАрия II или III
Камера визуализацииТомокуб, Инк.ТомоДишн
ГолотомографияТомокуб, ИнкХТ-1Н
Программное обеспечение для голотомографической визуализацииТомокуб, Инк.ТомоСтудия
Программное обеспечение для обработки изображенийМатематические работыМатлаб R2017b
Коническая центрифужная трубка FalconThermoFisher Scientific14-959-53А15 мл
Фосфатно-солевой буферСигма-Олдрич806544-500МЛ
Аммоний-хлоридно-калийный лизирующий буферThermoFisher ScientificA1049201
RPMI-1640 среднийСигма-ОлдричР8758
Фетальная бычья сывороткаThermoFisher Scientific10438018

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Three Dimensional Quantitative Phase ImagingLymphocyte SubtypesRefractive Index TomogramDigital Micromirror DeviceDiffraction Tomography AlgorithmHologram ReconstructionLabel Free ImagingCell Morphology AnalysisBiochemical CharacterizationLymphocyte Imaging

Related Articles